Insulin-3基因敲除鼠生殖系统LGR8蛋白的表达

目的 Insulin-3(Insl3)和其唯一配体富含亮氨酸的G蛋白受体[LGR8(aka RXFP2)]系统在睾丸下降过程中起重要作用。本研究拟利用Insl3基因敲除鼠探讨Insl3与LGR8相互关系及其在生殖系统的表达情况。方法使用免疫共沉淀、Western blot及免疫组化法检测雄性野生型小鼠和Insl3基因敲除雄性小鼠各生殖器官LGR8蛋白的表达并比较分析。结果 LGR8蛋白在野生型小鼠睾丸、睾丸引带、附睾及输精管等多个雄性生殖器官均有表达。其表达程度在不同生殖器官不同,野生型小鼠睾丸LGR8的表达强于Insl3基因敲除鼠(P<0.05)。结论 LGR8蛋白在多个雄性生殖器官均有表达,Insl3-LGR8系统可能在男性多种生殖发育疾病中起作用。     

内质网应激在高脂血症引起肾脏损害中的作用

目的 探讨内质网应激在高脂血症引起的肾脏损害中的作用.方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC,n=20)和高脂喂养组(HF,n=20),分别给予普通饲料和高脂饲料喂养.分别于4、8、12、18周时各组随机选取5只大鼠,观察血脂、24h尿蛋白、肾组织病理改变;TUNEL方法检测肾组织细胞凋亡情况;免疫组织化学方法检测肾组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达;RT-PCR方法检测肾组织GRP78 mRNA和CHOP mRNA的表达.结果 与NC组相比,HF组血脂水平、GRP78 mRNA及蛋白的表达在4、8、12、18周时明显增加(P<0.05);而24h尿蛋白、肾组织细胞凋亡指数及CHOP mRNA的表达在8、12、18周时明显增加(P<0.05).结论 内质网应激通过CHOP途径参与了高脂血症引起的肾脏损伤.     

Y-box结合蛋白-1在胃癌组织中的表达及意义

目的 研究Y-box结合蛋白-1(YB-1)在胃癌的不同发展阶段中的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学和原位杂交方法检测正常胃组织、肠化生组织、早期胃癌和进展期胃癌组织中YB-1蛋白和mRNA的表达变化.结果 在正常胃组织中YB-1蛋白和mRNA无表达;在肠化生组织中可见YB-1阳性染色于胃黏膜上皮细胞中,但表达较弱;在早期胃癌中YB-1表达于全层胃黏膜上皮细胞中,染色较肠化生组织重,而在进展期胃癌中其表达较在早期胃癌中下降.结论 YB-1的升高可能在胃癌的早期发生和发展中起作用.     

益肾胶囊对慢性肾小球肾炎患者sEPCR及CD62P的影响

目的 观察益肾胶囊对慢性肾小球肾炎(慢性肾炎,chronic glomerulonephritis, CGN)患者血浆可溶性内皮细胞蛋白C受体(soluble endothelium protein C receptor, sEPCR)、P-选择素(P-selectin, CD62P)及血清免疫球蛋白(Ig)、补体3水平的影响.方法 分别采用酶联免疫双抗体夹心法、流式细胞仪及免疫比浊法检测了40例健康查体者和78例患者治疗前后血浆sEPCR、CD62P及血清免疫球蛋白(Ig)、补体3水平的改变.结果 治疗前慢性肾炎患者血浆sEPCR、CD62P及血清IgA水平均明显升高(P<0.01),血清IgG、IgM及补体C3水平明显降低(P<0.01),经过3个月的治疗,治疗组患者血浆sEPCR、CD62P及血清IgA水平明显下降(P<0.05或P<0.01),IgG、IgM及补体C3明显升高(P<0.05或P<0.01).结论 益肾胶囊治疗CGN患者的作用机制之一可能与降低血浆sEPCR、CD62P水平及调节血清IgA、IgG、IgM和补体C3水平有关.     

青春期与育龄期多囊卵巢综合征患者的临床对照研究

目的 通过对青春期多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome, PCOS)与育龄期PCOS患者的临床资料的对照研究,分析两组患者的临床特点以及PCOS对女性健康和血管内皮功能的影响.方法 选择在我院妇产科门诊就诊的PCOS患者68例,其中青春期33例,育龄期35例.所有患者记录基线资料,采用ELISA法检测内皮素-1(ET-1)浓度,免疫浊度法检测C-反应蛋白(CRP)浓度,放射免疫法测定女性激素.结果 ①基线资料的比较:青春期组F-G评分及痤疮评分较育龄期组显著升高(P<0.05),而其余指标无显著性差异.②临床特点的比较:青春期患者月经失调、多毛、痤疮发生率较育龄期显著升高(P<0.05).③女性激素的比较:青春期组睾酮(T)、黄体生成素(LH)、LH/卵泡刺激素(FSH)显著高于育龄期组(P<0.05),而FSH、催乳素(PRL)、孕酮(P)和雌二醇(E2)无显著性差异(P>0.05);④ET-1浓度的测定结果:育龄期组较青春期组显著升高(P<0.05);育龄期肥胖组及胰岛素抵抗(IR)组血清ET-1浓度分别较非肥胖组及非IR组显著升高(P<0.05),而青春期组无此改变.⑤两组CRP浓度无显著性差异.结论 PCOS在女性青春期与育龄期的临床特点不同,育龄期尤其是伴有IR和(或)肥胖者血管内皮功能紊乱较明显.     

外排系统与膜通透性的改变对淋球菌高水平多重耐药的影响

目的 探讨外排系统与膜通透性的改变对淋球菌多重耐药的影响.方法 PCR扩增淋球菌mtrR启动子区域包含13 bp回文序列在内的157个碱基片段并进行DNA测序分析;提取外膜蛋白,利用SDS-PAGE进行组成型的分析.结果 5株敏感株的mtrR启动子区域未发生突变,3株高水平多重耐药株的mtrR启动子区域13 bp回文序列均发生了单个A/T碱基的缺失,且均存在外膜孔蛋白表达的缺失.结论 mtrR启动子区域13 bp回文序列单个A/T碱基的缺失引起的mtrCDE外排泵表达增加与外膜孔蛋白表达的缺失或下降导致的膜通透性降低,在介导淋球菌产生高水平多重耐药中起一定的作用.     

烧伤对不同性别小鼠肝脏和脾脏铁相关蛋白的影响

目的 研究不同性别小鼠肝脏和脾脏铁相关蛋白烧伤前后的变化.方法 90 ℃水蒸气制备烧伤小鼠模型,采用比色法测定烧伤小鼠肝脏和脾脏中的铁含量,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肝脏hepcidin和膜铁转运蛋白1(Fpn1)表达,使用Western检测了肝脏和脾脏Fpn1蛋白表达.结果 烧伤后雄性小鼠脾脏铁含量升高,肝脏hepcidin表达升高同时肝脏和脾脏Fpn1蛋白含量减少.烧伤后雌性小鼠铁内稳态破坏程度较轻.结论 铁相关蛋白的表达变化可能是引起烧伤后铁内稳态破坏的重要原因,不同性别小鼠铁相关蛋白表达差异可能暗示了雌激素的保护作用.     

Calphostin C对乳腺癌细胞增殖的抑制作用及相关机制

目的 研究Calphostin C对乳腺癌细胞MDA-MB-435S增殖的影响及初步机制.方法 通过观察Calphostin C处理MDA-MB-435S细胞前后细胞的生长速度、倍增时间、克隆形成率和细胞周期分布等变化,探讨Calphostin C对MDA-MB-435S细胞增殖的影响;通过Western blotting、免疫细胞化学染色和RT-PCR等方法探讨Calphostin C影响MDA-MB-435S细胞增殖的初步机制.结果 与MDA-MB-435S亲本细胞(对照组)相比,Calphostin C处理的MDA-MB-435S细胞(实验组)生长速度明显减慢,倍增时间明显延长(P<0.01),并且呈现浓度和时间依赖性;对照组和实验组细胞克隆形成率分别为(82.33±6.81)%和(22.00±1.73)%,差异有统计学意义(P<0.01);实验组细胞周期出现明显的G1期阻滞(P<0.01).Western blotting和免疫细胞化学染色结果显示,与对照组细胞相比,实验组细胞中蛋白激酶Cα(protein kinase Cα, PKCα)表达没有明显变化,但活性状态(胞质转位至胞膜)的PKCα显著减少.Western blotting和RT-PCR结果显示,与对照组细胞相比,实验组细胞中p53、Cyclin A和Cyclin B表达没有明显变化,但p21表达上调,Cyclin E表达下调.结论 Calphostin C可显著抑制乳腺癌细胞MDA-MB-435S的增殖,该作用可能与其抑制PKCα活性、上调p21表达和下调Cyclin E表达有关.