牛关节软骨培养稳态模型的实验研究方法

参照Ｈａｓｃａｌｌ实验方法建立了牛关节软骨体外培养，并通过组织学观察，３５Ｓ掺入率测定及已糖醛酸测定的方法证明在加入２０％小牛血清的ＤＭＥＭ培养液中，培养７ｄ后，软骨蛋白多糖的代谢达到了稳态，这为研究关节软骨蛋白多糖代谢及其影响因素提供了一个较好的实验模型。     

航运反恐何时休

时隔近两年,"9·11"事件对世界贸易的深远影响已经显现.在这短短的时间内,美国近乎疯狂地出台了各种航运反恐计划.C-TPAT及"24小时新规"的陆续登场,已将海事界搅得波涛四起、暗流涌动,更有甚者,在以美国为首的多国推动下,ISPS规则被国际海事组织列入SOLAS公约,成为108个签约国必须履行的职责.7月29日,中国海关总署署长牟新生与美国海关与边境保护局局长伯纳在京签署中美海关"集装箱安全倡议"(CSI)合作声明.这标志着两国CSI实质性合作的开始.可以说,一系列的反恐计划毕竟为航运企业带来了或多或少的麻烦,我们不禁要问:航运反恐几时方休?     

P~(53)蛋白和PCNA在恶性纤维组织细胞瘤中的表达与预后的关系

为探讨恶性纤维组织细胞瘤（Ｍａｌｉｇｎａｎｔｆｉｂｒｏｕｓｈｉｓｔｉｏｃｙｔｏｍａ,ＭＦＨ）中Ｐ５３蛋白和增殖细胞核抗原（Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ,ＰＣＮＡ）的表达强度与预后的关系,应用免疫组化ＬＳＡＢ法及彩色图像分析系统定量检测了４６例ＭＦＨ细胞中Ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ的表达强度。结果显示ＭＦＨ的Ｐ５３蛋白与ＰＣＮＡ表达间呈正相关,Ｐ５３蛋白阳性表达组ＰＣＮＡ的表达强度高于Ｐ５３蛋白阴性表达组（Ｐ＜０．０５）。Ｐ５３蛋白表达阳性和ＰＣＮＡ表达强度值高组较Ｐ５３表达阴性和ＰＣＮＡ表达强度值低组的生存期短、肿瘤转移率高、组织学分级高（Ｐ＜０．０５）;肿瘤位置深在组Ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ表达强度高于肿瘤位置浅表组（Ｐ＜０．０５）。结果提示定量检测ＭＦＨ的Ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ对于评估ＭＦＨ患者的预后具有较可靠的应用价值。     

V(D)J重组起始阶段的研究进展与展望

重组激活基因(recombination activating gene)1和2编码的RAG1和RAG2蛋白通过对V(D)J重组起始阶段的调节作用,使得抗原受体基因重排严格地按组织、细胞发育阶段进行。本文将就RAG蛋白结合和催化断裂抗原受体基因机制作简要介绍。这些新发现明确了体内V(D)J重组发生的部位以及其出现错误时可能发生的地方,提示V(D)J重组机制不仅对淋巴细胞正常发育起关键性作用,而且对基因组不稳定性和淋巴系统恶性肿瘤的发生也具有重要意义。     

人CAP1蛋白与PIF1解螺旋酶及其剪接体蛋白的相互作用

目的在细胞水平及体外验证腺苷酸环化酶相关蛋白1(CAP1)蛋白与PIF1解螺旋酶及其剪接体是否存在相互作用。方法采用激光共聚焦免疫荧光实验,通过细胞内蛋白共定位确定蛋白质间的相互作用关系;GST Pulldown实验在体外验证CAP1与PIF1及其剪接体是否存在直接的相互作用。结果激光共聚焦免疫荧光实验显示,CAP1与PIF1全长蛋白及其剪接体BC018978没有共定位,但与剪接体AF108138C存在共定位。GST Pull-down未检测到CAP1与PIF1全长及其剪接体的相互作用。结论 CAP1与PIF1剪接体蛋白可能存在非直接相互作用。     

(西安地区)心脏机械瓣膜置换术后抗凝状态的研究

目的探讨西安地区机械瓣膜置换术后华法林的最佳安全剂量范围。方法检测74例机械瓣膜置换术后患者的凝血酶原时间(PT)、国际化标准比值(INR)、血栓前蛋白(TpP)及D2聚体(DD)等指标。结果 60kg以上组华法林剂量较60kg以下组增大(P<0.05);血栓前蛋白、D2聚体在术后3月内明显增高(P<0.05)。结论结合口服华法林剂量与并发症的发生情况,华法林最佳用量为(3.07±0.19)mg;国际化标准比值最佳范围为1.3～2.5。     

黑素瘤抑制蛋白2和VEGF在肝癌中的表达及其临床意义

目的研究黑素瘤抑制蛋白2(MIA2)和血管内皮生长因子(VEGF)在肝癌中的表达及其与肝癌临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测36例肝癌手术切除标本的MIA2及VEGF的表达情况。结果 36例HCC中MIA2、VEGF阳性表达分别为41.7%和77.8%;MIA2和VEGF表达有相关性(P<0.05)。29例癌旁组织中MIA2和VEGF阳性表达分别为93.1%和34.5%。肝癌组织和癌旁组织MIA2和VEGF表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MIA2在肝癌组织中呈低表达,且与肝癌的TNM分期、病理分级及肿瘤转移有关。MIA2和VEGF的表达呈负相关。     

“鸟枪”蛋白组学技术鉴定牙龈卟啉单胞菌47A-1亚型外膜蛋白

目的利用shotgun(鸟枪)蛋白质组学策略鉴定牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)亚型47A-1外膜蛋白,深化P.g外膜蛋白的蛋白质组学研究,为进一步研究P.g外膜蛋白的致病性奠定基础。方法提取P.g47A-1外膜蛋白,SDS-PAGE电泳分离蛋白,胶内酶解为多肽混合物,应用毛细管高效液相色谱加串联质谱分析,SEQUEST程序进行数据库搜索并鉴定蛋白。结果用考马斯亮蓝法染色凝胶分离的蛋白,发现P.g47A-1蛋白条带主要在14.3~97 ku之间。酶解的肽段经毛细管高效液相色谱分离,得到肽段水平的总离子流图,分析肽段序列后发现P.g47A-1蛋白有623个唯一肽段,鉴定出136种蛋白,包括了51种已知蛋白,85种未知蛋白。结论 Shotgun技术可分析出P.g47A-1大量未知蛋白,尤其是丰度低、疏水性强的外膜蛋白,优于二维凝胶电泳(two dimensional gelelectrophoresis,2-DE)等传统蛋白质组学方法,为进一步研究P.g外膜蛋白的致病性奠定了基础。     

氟对小鼠釉鞘蛋白基因表达的影响

目的探讨氟对小鼠釉鞘蛋白基因表达的影响。方法在建立小鼠中度及重度氟斑牙模型的基础上,应用原位杂交技术观察对照组(饮用去离子水)、低氟组(饮水F-为50 mg/L)、高氟组(饮水F-为150 mg/L)小鼠下切牙发育过程中,釉鞘蛋白mRNA在成釉细胞增殖分化期、分泌期及成熟期的表达情况。结果对照组小鼠下切牙形态正常,牙齿表面呈半透明、乳白色,光滑而有光泽。镜下釉鞘蛋白mRNA在成釉细胞增殖分化期表达为阴性;分泌初期细胞内及新生釉基质中开始出现弱阳性表达;至分泌期,细胞内及新生釉基质中均呈强阳性表达;成熟釉质中无釉鞘蛋白mRNA的阳性表达。低氟组小鼠下切牙表面有或宽或窄的白垩色釉质矿化不良区与矿化较好的釉质条带相交替,镜下釉鞘蛋白mRNA在釉牙本质界附近的釉基质中有弱阳性表达。高氟组小鼠的下切牙表面大面积白垩色区域伴局灶性釉质缺损,镜下成釉细胞排列紊乱;在成釉细胞分泌期,釉基质分泌几乎中断;釉鞘蛋白mRNA在新生釉基质表面及釉牙本质界处阳性表达,在成釉细胞分泌期,其表达多次中断,并且在深层釉基质中也可见到釉鞘蛋白mRNA的较强阳性表达。结论氟影响釉鞘蛋白mRNA在成釉细胞、釉基质中的表达,过高浓度的氟周期性抑制成釉细胞分泌釉基质的功能,从而导致釉质的矿化不全、矿化不均及局灶性缺损。     

远程缺血预适应对体外循环心脏瓣膜置换术患者脑损伤的保护作用

目的观察远程缺血预适应(RIPC)对体外循环(CPB)下心脏瓣膜置换术患者围术期血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100β蛋白浓度及认知功能的影响,探讨其对脑损伤的保护作用。方法体外循环心脏瓣膜置换术患者40例,随机分为实验组(E组)和对照组(C组),每组20例,实验组于麻醉诱导插管完毕稳定5 min后,给左上肢连续4次的缺血预适应,而对照组只固定止血带,不加压。分别于麻醉诱导插管完毕稳定5 min后(T1)、CPB开始10 min时(T2)、CPB停止时(T3)、CPB后12 h(T4)、术后24 h(T5)、48 h(T6)和72 h(T7)抽取颈内静脉血检测血清NSE及S-100β蛋白浓度。于术前2 d、术后第5天进行神经心理学测试评估术后认知功能的变化。结果两组S-100β蛋白浓度在T2即开始升高,T3时达到峰值,随后持续下降,两组NSE浓度在T2升高达到峰值,随后持续下降,但E组S-100β蛋白浓度在T2~T6时均明显低于对照组(P<0.05),E组NSE浓度在T2~T5时均明显低于对照组(P<0.01),E组术后认知功能障碍(POCD)发生率明显低于C组(P<0.05)。结论远程缺血预适应可降低体外循环下心脏瓣膜置换术患者血清NSE和S-100β蛋白浓度,降低患者POCD发生率,具有脑保护作用。