幽门螺杆菌尿素通道蛋白基因UreI载体的构建、融合表达及纯化

目的构建幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)尿素通道蛋白基因UreI的融合表达载体,并在E.coliBL21中表达,为进一步研究UreI的功能奠定基础。方法利用分子克隆技术以Hp DNA染色体为模板,扩增Hp UreI基因片段,将目的基因UreI与载体pET32a( )分别经kpnⅠ和HindⅢ双酶切,纯化,连接。筛选阳性重组载体,转化大肠杆菌BL21,以IPTG诱导表达pET32a( )/UreI融合蛋白。表达产物经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化后,用SDS-PAGE及Western blot分析。结果经酶切、测序分析表明,插入的基因片段为Hp UreI编码基因,由585 bp组成,与GenBank相应菌株HP AM417 609序列完全一致,无碱基突变。经SDS-PAGE分析显示重组质粒pET32a( )/UreI在原核细胞中得到了高效融合表达,其重组融合蛋白分子量为130 ku,经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化后,其纯度达95%以上,Western blot分析显示,该重组融合蛋白可被6-His鼠抗单克隆抗体所识别,具有良好的反应原性。结论成功地克隆和构建了原核表达载体pET32a( )/UreI,并在原核细胞中得到了高效融合表达。     

《江苏省内河干线航道通航管理规定》2015年7月1日起实施

<正>本刊从江苏省交通运输厅获悉,《江苏省内河干线航道通航管理规定》将于月日起正式实施。该规定明确渡口运营人应当在渡运航线上下游200 m附近设置渡口标志。顺航道行驶的船舶驶近渡运水域时,应当加强了望、谨慎驾驶、减速慢行,采取有效措施协助避让渡船。地方海事、航道等管理机构可以根据船舶差别     

建设“新海丝” 港口还需关注这些

展望未来,世界是＂多极＂的,也是＂平坦＂的,移动互联网、全球供应链将在＂地球村＂中发挥越来越重要的作用,其中海上贸易通道及其供应链就是新时期＂海上丝绸之路＂建设（＂新海丝＂）的主要内容。而作为海上贸易通道中的关键节点和重要枢纽,港口的战略发展,将对＂新海丝＂建设和全球供应链发展,具有十分重要的作用。     

火灾场景下公路隧道横通道参数研究

横通道作为公路隧道的避难设施,其间距和宽度的确定非常重要。从人员安全疏散的角度出发,阐述了根据隧道火灾时人员安全疏散的判据确定横通道间距和宽度的方法。结合某隧道工程实例,通过模拟隧道内火灾烟气蔓延和人员疏散过程,对比分析不同工况下可用安全疏散时间(ASET)与需要的安全疏散时间(RSET),从而为横通道间距和宽度的确定提供定量依据。     

侧推减阻降噪装置设计与应用探索

侧推减阻降噪装置是一种填补国内空白的特种船舶装置,此装置可针对性解决因侧推通道激发的局部紊流及气泡层影响船舶声学设备正常使用的难题,该文介绍了该装置产生的背景、预期功能、设计校核方案及船上安装使用方法,经实船验证,该装置满足母船声学设备使用要求。     

考虑多人相互影响的舰船通道最短路径规划

将时间维引入既定舰船通道网络,把考虑多人相互影响的动态最优路径规划问题转化为时间依赖网络中的最优路径搜索问题。首先,论文的算法为所有人员随机生成走行路径,为了预测网络中的弧(路段)的走行时间,按人员速度从慢到快的顺序依次计算并记录人员到达路径中的各路段首节点的时刻,先记录到的人员将成为后记录到的人员的动态障碍。然后,将遗传算法与网络中弧的走行时间预测方法相结合,借助遗传算法的个体多样性天然地解决了人员走行任意性问题,因而获得了全局动态最优路径算法,并仿真计算了两人以及三人的最短时间路径;经与不考虑人员间相互影响时获得的最优路径相比较,论文的算法获得了人员遇到障碍时(或跟行或绕行)的最优走行路径。最后,借助时间依赖网络中的最优路径充要条件定理,说明了算法的有效性。     

CSS附录简介14及其对船舶运营的影响

简介CSS附录14的主要内容和其对集装箱配载、船舶设计和船舶管理方面的影响。     

250000DWT矿砂船外舾装设计

介绍了250000 DWT矿砂船外舾装专业的设计要点。着重总结了锚系泊设计和检验通道设计等方面的心得和体会。     

基于规则评价的武器目标分配方法

遗传算法、蚁群算法、粒子群优化算法等解决武器目标分配问题的典型方法尚不能满足工程应用的要求,为了提高舰艇对反舰导弹防御过程中的武器目标分配问题的工程化水平,采用系统分析的方法,提出一组适应舰艇火力通道组织的火力分配规则,设计了基于规则评价的武器目标分配方法,建立了评价函数及求解过程,并分析了算法的复杂度,该方法可以使目标分配结果与规则的符合度直观明确,更符合指挥员的自然决策思维过程,具有很好的工程实用价值。     

坚守为了“精忠界河”——佳木斯海事局打造中国界河一流海事监管品牌纪实

<正>大概在很多人的印象中,冬天的黑龙江大地河流封冻,海事似乎应该没啥事。然而,随着气垫船的运营和浮箱固冰通道的开通,中俄界河实现了四季通关,人们的这一传统印象已经被颠覆。在佳木斯海事局辖区,由于气垫船、浮箱固冰通道客货批量小、批次多,海事部门冬季反比夏季更忙了。佳木斯海事局辖区位于祖国版图的最东端,是四季监管综合性特点十足的海事局,其流凌期和冰封期监管、国内运输航行国际航线监管、维护主权与保障安全