迷迭香酸甲酯通过抑制Akt/mTOR信号通路诱导人肝癌细胞凋亡

目的 探讨迷迭香酸甲酯(methyl rosmarinate, MR)诱导人肝癌细胞(HCC)Hep-3B、SK-Hep1凋亡的作用及其机制。方法 CCK-8法检测各浓度MR(0～200μmol/L)对Hep-3B、SK-Hep1、MIHA细胞的增殖-毒性作用;光学显微镜观察不同浓度MR处理三种细胞后的形态变化;EdU实验及流式细胞术分别检测Hep-3B、SK-Hep1细胞增殖及凋亡情况;Transwell迁移和侵袭实验检测MR对Hep-3B、SK-Hep1细胞迁移与侵袭能力的影响;Western blotting检测凋亡、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)及Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达情况。结果 不同浓度MR(0～200μmol/L)处理Hep-3B、SK-Hep1细胞48 h,其细胞活性呈浓度依赖性显著降低(P<0.01),而对MIHA细胞活性无显著影响(P>0.05),Hep-3B、SK-Hep1细胞MR的IC₅₀分别为102.5μmol/L和99.3μmol/L。MR(0～15...     

Vaspin通过胰岛素信号通路改善地塞米松诱导的3T3-L1脂肪细胞的胰岛素抵抗

目的探讨Vaspin对胰岛素抵抗脂肪细胞3T3-L1信号通路的作用及其机制。方法前脂肪细胞3T3-L1经地塞米松、IBMX及胰岛素混合诱导剂诱导8d,分化成为成熟脂肪细胞。(1)不同质量浓度Vaspin(0、50、100、200ng/mL)处理成熟3T3-L1细胞,观察PAKT/AKT通路的变化。(2)采用1μmol/L地塞米松建立胰岛素抵抗模型。分化成熟的脂肪细胞随机分为4组:对照组、模型对照组、实验组、Vaspin 200ng/mL+wortmannin 100nmol/L组。(3)观察Vaspin作用不同时间对胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖消耗量的影响,Western blot分析胰岛素信号通路IRS-1、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)及Akt/phospho-Akt蛋白表达。结果 (1)Vaspin(0、50、100、200ng/mL)干预成熟脂肪细胞12h,Vaspin以浓度依赖的方式增加PAKT蛋白表达,与对照组相比,在100、200ng/mL组均有统计学差异(P<0.01)。(2)实验组葡萄糖消耗量均高于模型对照组(P<0.05);对照组与实验组比较,葡萄糖消耗量没有统计学差异(P>0.05)。(3)与对照组相比,模型对照组的IRS-1、PI3K、PAKT的蛋白表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);与模型对照组相比,实验组IRS-1、PI3K、PAKT的蛋白表达量均上调,差异有统计学意义(P<0.01);wortmannin预处理则阻断了Vaspin对PAKT/AKT、PI3K、IRS-1蛋白表达的上调。结论 Vaspin通过影响胰岛素抵抗的脂肪细胞中的PAKT/AKT胰岛素信号通路,增加葡萄糖的利用,改善了地塞米松诱导的3T3-L1脂肪细胞的胰岛素抵抗。     

黄芩苷对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的抑制作用及其机制

目的观察黄芩苷对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的作用及其相应机制。方法利用MTT法检测黄芩苷对HeLa细胞增殖的影响;Transwell小室法检测黄芩苷对HeLa细胞侵袭能力的影响;Real-time PCR法检测黄芩苷对MMP-2、MMP-9RNA表达水平的影响;Western blot法检测黄芩苷对MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响;Western blot法检测黄芩苷对P38和p-P38蛋白表达的影响;Real-time PCR法检测黄芩苷和sb203580联合应用对MMP-2和MMP-9RNA表达水平的影响。结果黄芩苷能够有效抑制HeLa细胞的增值,当质量浓度超过60μg/mL时,与对照组相比(0μg/mL)差异出现统计学意义。在低于细胞增殖抑制浓度时,黄芩苷也能够有效抑制HeLa细胞的侵袭,10、20、40μg/mL组穿过基质胶到达小室底端的细胞数目分别为对照组的(97.58±17.78)%、(67.95±49.75)%和(32.35±20.41)%。黄芩苷能够有效抑制HeLa细胞中MMP-2和MMP-9的表达及有效抑制HeLa细胞中P38的磷酸化水平;P38信号通路抑制剂预处理,能够增强黄芩苷对MMP-2和MMP-9表达的抑制作用。结论黄芩苷能够有效抑制HeLa细胞的侵袭转移,这种作用可能与其通过调节P38信号通路的活性进一步调节MMP-2和MMP-9的表达有关。     

昌平路—恒通路跨苏州河桥前期研究

一、概况昌平路—恒通路跨苏州河桥位于上海市中心城的中部,处于苏州河东段,介于恒丰路桥和普济路桥之间,呈东西走向。此桥在苏州河以西,与静安区昌平路相接;在苏州河以东,与闸北区恒通路相接。根据规划,昌平路—恒通路桥两侧接线道路均为城市次干路,苏州河处规划红线宽40米,昌平路规划红线宽40米,恒通路规划红线宽45米。二、区域路网研究1.研究范围研究范围北至长寿路—天目西路、东至西藏北路、     

如何做好分销网络的建立与管理工作

介绍现代企业竞争中的供应链之间的竞争，并细化分析供应链中各环节的协调运作，强调销售通路的重要性。     

隧道通风网络及调节

根据隧道通风网络的构成及网络中风流流动的基本规律，运用通风网络解算的斯考德-恒斯雷法和风量调节通路计算法，以二郎山和重庆中梁山2条长大公路隧道工程为例进行了网络模拟和调节计算研究．研究表明，分段纵向式通风系统已形成网络，可通过网络的自然分风和按需分风解算，模拟隧道内风流的分配、风机的设置，从而为确定通风调节的位置、大小和方法提供参考．     

组合电路的故障测试生成D算法研究

测试生成指针对电路中一个故障找出能检测该故障的测试码，测试生成算法的好坏决定着测试技术的好坏。确定性测试中，测试算法的研究显得尤为重要。分析了组合电路的故障测试生成D算法，以施耐得计数器电路为例，研究了D算法在组合电路故障测试生成中的应用，并给出了D算法与通路敏化法、布尔差分法的应用比较结果。     

siRNA directed against TrkA sensitizes human pancreatic cancer cells to apoptosis induced by gemcitabine through an inactivation of PI3K/Akt-dependent pathway

Pancreatic cancer is a lethal disease.Despite sig-nificant advances in diagnosis,staging,and surgicalmanagement of the disease,less than10%of pa-tients survive for more than one year fromthe ti meof diagnosis[1-2].The largely refractory response tochemotherapy is a common feature of this disease,and eventhe principal therapeutic agent,the nucleo-side analogue gemcitabine(2′,2′-difluorodeoxycyt-idine),only marginally affects clinical outcomes[3].Therefore,further understanding of the chemores…     

Gαq/11在哇巴因信号转导中的意义

目的观察不同浓度哇巴因对SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞Gαq/11表达的影响,并探讨其在哇巴因信号转导中的作用。方法采用贴块法原代培养SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞,进行传代和纯化。分别给予生理浓度以及病理浓度的哇巴因干预48 h,免疫细胞化学染色观察平滑肌细胞Gαq/11蛋白的表达。结果生理浓度哇巴因干预后,平滑肌细胞有增殖现象;而病理浓度组细胞发生凋亡。生理浓度组Gαq/11表达(111.21±30.47)显著高于病理浓度组(68.70±6.21)以及对照组(58.81±4.51,P<0.01);病理浓度组和对照组相比无显著变化。结论①Gαq/11介导了生理浓度哇巴因引起细胞增殖的生物学效应;②病理浓度哇巴因引起细胞凋亡的生物学效应与Gαq/11无关;③哇巴因在不同浓度下,可能通过不同的信号转导通路产生相应的药理学作用或生物学效应。     

曹妃甸工业区西通路高架桥耐久性设计

该文根据西通路高架桥主桥处于渤海湾填海造地工程上的环境条件、桥梁结构特点,介绍了其桥面板的耐久性设计,并提出了满足设计基准期100 a的技术措施,以及施工要点。桥面板混凝土采用高性能混凝土,并采用适当的保护层及控制裂缝宽度等措施,还对高性能混凝土的原材料、配合比、拌制、浇筑、养生等施工环节制定相应的质量保证措施。