大鼠PER2基因RNAi慢病毒载体的构建及干扰效率的测定

目的构建及筛选有效干扰大鼠血管平滑肌细胞PER2基因的shRNA慢病毒载体,并测定其干扰效率。方法设计大鼠PER2的siRNA靶序列,插入慢病毒载体质粒pGLV-U6-EGFP中,构建pLentivirus-per2-rat表达重组体并转染至A7r5大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞内,利用Real-time PCR方法检测PER2基因的mRNA表达水平,筛选有效沉默钟基因PER2表达的RNAi慢病毒载体。结果经电泳、基因测序证实插入的目的序列正确,有PER2表达,成功构建了pLentivirus-per2-rat表达重组体;转染慢病毒载体pLentivirus-per2-rat至A7r5大鼠胸血管平滑肌细胞,测定转染效率达70%;Real-time PCR检测PER2基因的mRNA相对表达量,筛选出有效干扰大鼠血管平滑肌细胞钟基因Per2表达的siRNA片段,使PER2mRNA表达量下调约84%。结论成功构建了大鼠PER2的RNAi慢病毒载体,为进一步研究时钟基因的功能奠定了基础。     

戊四氮点燃癫痫大鼠海马Cx32和Cx43表达及甘珀酸对其表达的影响

目的探讨点燃癫痫大鼠神经元、星形胶质细胞及其缝隙蛋白的变化,甘珀酸(CBX)对缝隙连接的影响。方法 30只SD雄性大鼠随机分为3组:对照组(NS组)、点燃组(K组)、点燃后干预组(KCBX组),每组10只大鼠。NS组每日腹腔注射生理盐水。K组和KCBX组大鼠腹腔注射戊四氮(PTZ)[35mg/(kg.d)]至点燃,再分别腹腔注射生理盐水、CBX(10mg/kg)干预3d。观察3组大鼠惊厥行为变化,并观察Cx32、Cx43在海马内的表达变化。结果①PTZ点燃癫痫大鼠出现自发性抽搐,KCBX组自发性抽搐次数明显减少(P<0.05)。②点燃癫痫大鼠海马Cx32、Cx43的表达增加;CBX干预后,Cx32、Cx43的表达减少(P<0.05)。结论 CBX抑制点燃大鼠Cx32、Cx43的表达和癫痫活动,提示缝隙连接在癫癎的发生发展过程中具有重要的作用。     

一种新的基于细胞模型车流模拟方法

考虑到原始细胞传输模型(CTM)在处理多细胞汇合、分岔以及多对细胞流线间交叉等情形时存在明显的局限性,通过分析细胞间车流流线关系来反映多种不同细胞连接结构,提出一种新的基于细胞阶段传输车流量累计模拟方法(简记ASCF-TS),不仅满足了细胞内车流的FIFO规则和细胞输送车流能力约束,同时也能满足流线交叉点的车流输送能力约束,有效处理车流流线交叉产生的优先权问题,增强了CTM模型的适用性.最后的数值算例结果表明,所提出的ASCF-TS车流模拟方法能有效处理多细胞汇合、分岔情形,且相比较于原始CTM模型,能模拟出车流在交叉口流线交叉的滞后影响,方法具有较强的时间有效性.     

全反式维甲酸对NT2细胞系胶质瘤趋向性的影响

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对NT2细胞系胶质瘤趋向性的影响。方法将NT2细胞分为4组:NT2组(未经ATRA干预)、NT2RA1周组(ATRA干预1周)、NT2RA2周组(ATRA干预2周)、NT2RA3周组(ATRA干预3周),采用细胞迁移分析的方法,分别检测其对U87胶质瘤细胞、无血清DMEM培养基以及含100mL/L胎牛血清DMEM培养基的趋向性。结果经ATRA干预的NT2细胞,其胶质瘤趋向性较未经干预组(NT2组)显著提高(P<0.05),对非特异性迁移趋化物如血清等的迁移则较未经干预组显著减少(P<0.05),其中NT2RA2周组胶质瘤趋向性最强,与其他各组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论经ATRA干预2周的NT2细胞其胶质瘤特异趋向性显著提高,有望成为临床治疗胶质瘤的新型靶向基因传递载体。     

Effect of elastic constitutive laws on the deformation of two-dimensional red blood cell

Deformation of two-dimensional red blood cell in linear shear flow is simulated using the immersed boundary method, in which the cell is modeled as a force source instead of a real body. The effect of three constitutive laws, i.e. Hookean, Neo-Hookean and Skalak elasticity, on the deformation is studied by simulating the cell movement in two linear shear flows. The results show that the effect of the constitutive laws gets more obvious as the shear rate increases. Both the aspect ratio and the inclination of the steady shapes get bigger, and the differences between the periods of the cell tank-treading motion become larger. For the same shear flow, the period with Hookean elasticity is less than the period with Neo-Hookean elasticity and bigger than the period with Skalak elasticity.     

带阈值的广义双向细胞联想神经网络GCBAM及其稳定性质研究

在提出双向细胞联想神经网络CBAM的基础上,通过引入阈值概念,进而提出广义双向细胞联想神经网络GCBAM,研究了其平衡态,存在性质及其Lyapunov意义下的网络稳定性质。     

利用激光拉曼光谱研究^137Csγ射线照射人食管癌细胞的最佳剂量

目的：利用激光拉曼光谱研究^137Csγ食管癌细胞的最佳剂量。方法：人食管癌细胞（EC9706）经不同剂量^137Csγ4h后采集其激光拉曼光谱,并对拉曼光谱进行比对分析。结果：（1）蛋白质酰胺Ⅲ带1240cm^-1谱带在各剂量组出现不同程度蓝移,表明改变了β回折构象;色氨酸残基的吲哚环振动谱带550、762cm^-1谱带在各剂量组中出现较明显的频移,说明其内部构象的改变;空白对照组EC9706细胞中酪氨酸是＂埋藏式＂的,而在4、5、6Gy组却变成了＂暴露式;＂（2）核酸中磷酸骨架基团的785、1096cm^-1在射线剂量组出现了明显频移和散射强度变化,这可能与^137Csγ出现频移,其它剂量组基本上没有改变。结论：4、6Gy组频移明显,说明4、6Gy组为最佳照射剂量。     

混合苯对接触者细胞遗传物质,白细胞的影响

纯苯的遗传学毒效应早已得到证实,而混合苯对细胞有丝分裂的影响正受到人们的关注及探讨。为了解在一定浓度混合苯环境中,对从事机车、车辆,铁路设备喷漆作业人员的遗传物质,白细胞的影响,我们检查了连续多年从事喷漆作业者的染色体畸变及微核,白细胞总数及嗜中性粒细胞绝对值。结合近几年作业环境定期、定点监测结果,进行分析提出建议,仅供参考。 1 材料与方法 1.1 对象接触组:从事喷漆作业连续5年以上,近期未     

10例癌肉瘤的光镜及角蛋白免疫细胞化学

本研究结果示肉瘤样成份与癌灶相比,二者不仅在形态及某些功能特点上不同,而且在免疫角蛋白的表达方面也呈现出显著差异,各例之癌灶不论其为鳞癌,囊腺癌或导管癌,也不论其分化程度如何均呈现出不同强度的棕色角蛋白阳性颗粒,而肉瘤成份则无1例为阳性,提示本组病例中的两种成份各源于上皮及间叶细胞.本病肉瘤样成份形态多样,据此将该瘤分为梭形细胞型、巨细胞瘤型、腺泡型及多形细胞型等四种组织类型。