局灶脑缺血再灌流后c-fos和bcl-2基因的表达

为探讨短暂局灶脑缺血后不同灌流期即刻早期基因（ＩＥＧｓ）与凋亡抑制基因在同一脑区的表达状况,采用不开颅血管腔内置线法制作鼠大脑中动脉阻塞（ＭＣＡ０）的局灶缺血再灌流模型,通过免疫组化法观察原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｂｃｌ－２蛋白在缺血３０ｍｉｎ再灌６ｈ和２４ｈ的表达。结果显示∶再灌６ｈ,二者在缺血同侧梨状皮层显著表达,而底节区表达很弱（Ｐ＜０．０１）;再灌２４ｈ,ｃ－ｆｏｓ蛋白在梨状皮层表达显著减弱（Ｐ＜０．０１）;ｂｃｌ－２蛋白表达仍显著（Ｐ＞０．０５）,且在底节区的表达有增强（Ｐ＞０．０５）。因而推论∶ｃ－ｆｏｓ与ｂｃｌ－２蛋白的表达可能与缺血损害的内源性保护机制有关。     

哇巴因与地高辛对大鼠肾脏皮质钠泵α亚单位基因表达的影响

目的　对比研究哇巴因与地高辛对大鼠肾脏皮质钠泵 (Na+ ,K+ ATP酶 )α亚单位基因表达的影响 ,探讨内源性哇巴因 (EO)的生物学效应以及洋地黄类药物药理作用的分子机制。方法　长期给予大鼠注射小剂量哇巴因 (2 0 μg·kg- 1·d- 1)与地高辛 (32 μg·kg- 1·d- 1) ,动态观察大鼠血压变化 ;分别应用分子生物学RT PCR及免疫组织化学技术 ,研究各组大鼠肾脏皮质钠泵α1、α2及α3亚单位mRNA及蛋白水平基因表达的改变。结果　哇巴因与地高辛对大鼠血压的影响存在着明显差别 ,长期给予大鼠注射小剂量哇巴因可使大鼠血压升高 ,而地高辛对大鼠血压无影响。但哇巴因与地高辛对大鼠肾脏皮质钠泵α亚单位基因表达的影响是相同的 ,在mRNA水平均可使α1亚单位表达增强 ,α2与α3亚单位表达无改变 ;而在蛋白水平α1亚单位表达减弱 ,α3亚单位表达增强 ,α2亚单位表达无改变。结论　哇巴因在高血压发病中可能起着重要作用 ;哇巴因与地高辛可导致相同的肾脏皮质钠泵基因表达改变 ,提示这种表达的改变在哇巴因导致血压升高的过程中可能并不起着关键性作用。     

MOLECULAR CLONING OF HUMAN NEUROTROPHIN-4 GENE

Ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎ 4 (ＮＴ 4 )ｉｓａｍｅｍｂｅｒｏｆｈｅｎｅｕ ｒｏｔｒｏｐｈｉｎｆａｍｉｌｙｏｆｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｌｙｒｅｌａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎｓ[1] ,ｔｈａｔａｌｓｏｉｎｃｌｕｄｅｓｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎ 3(ＮＴ 3) ,ｎｅｕ ｒｏｔｒｏｐｈｉｎ 6 (ＮＴ 6 ) ,ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ (ＮＧＦ)ａｎｄｂｒａｉｎ ｄｅｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ (ＢＤＮＦ) [2 - 6] ,ｗｈｉｃｈｓｕｐｐｏｒｔｓｔｈｅｓｕｒｖｉｖａｌｏｆｖｅｒｔｅｂｒａｔｅｎｅｕｒｏｎｓ[7] .Ａｔｐｒｅ…     

西安地区汉人GPT遗传多态性研究

用琼脂糖－淀粉混合凝胶电泳法结合特异组织酶染色技术，对汉族人群红细胞谷氨酸转氨酶（ＧＰＴ）的遗传多态性进行研究。结果表明：该方法灵敏快速，分辨率高。ＧＰＴ可分为ＧＰＴ１－１型；ＧＰＴ２－２型；ＧＰＴ２－１型。基因频率ＧＰＴ１为０．５３６８，ＧＰＴ２为０．４６３２，符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｒｉｎｂｅｒｇ平衡定律。ＧＰＴ分型在人群个体间的识别ＤＰ值为０．６２４９，是法医个人识别和亲权鉴定非常有用的遗传标记，也可作为异体骨髓移植成功在接的诊断指标。     

A VNTR ELEMENT ASSOCIATED WITH STEROID SULFATAES GENE DELETIONS STIMULATES RECOMBINATIONIN CULTURED CELLS

ＡＶＮＴＲＥＬＥＭＥＮＴＡＳＳＯＣＩＡＴＥＤＷＩＴＨＳＴＥＲＯＩＤＳＵＬＦＡＴＡＥＳＧＥＮＥＤＥＬＥＴＩＯＮＳＳＴＩＭＵＬＡＴＥＳ　ＲＥＣＯＭＢＩＮＡＴＩＯＮＩＮ　ＣＵＬＴＵＲＥＤ　ＣＥＬＬＳＧｏｎｇＹａｎ；Ｘ．Ｍ．Ｌｉ，Ｌ．Ｊ．Ｓｈａｐｉｒｏ（Ｄｅ...     

Changes of the cell cycle regulators and cell cycle arrest in cervical cancer cells after cisplatin therapy

Objective To investigate the changes of the cell cycle regulators ATM, Chk2 and p53 and cell cycle arrest in HeLa cells after cisplatin therapy. Methods The proliferation-inhibiting rates of HeLa cells induced by eisplatin of different concentrations were measured by MTT assays. The mRNA and protein expressions of ATM, Chk2 and p53 of HeLa cells with and withont cisplatin were detected by RT-PCR and Western blot, respectively. The cell cycle analysis was conducted by flow cytometric analysis. Results Cisplatin inhibited the proliferation of HeLa cells in a dose- and time-dependent manner. The mRNA and protein expressions of ATM, Chk2 and p53 were increased in HeLa cells treated with cisplatin. The cell cycle was arrested in G2/M phase in HeLa cells treated with cisplatin. Conclusion Activation of ATM, Chk2 and p53 might be critical in determining whether cells survive or undergo apoptesis. Targeting ATM, Chk2 and p53 pathway might he a promising strategy for reversing chemoresistance to clsplatin in cervical cancer.     

假型逆转录病毒载体高效介导兔平滑肌细胞基因转染

目的 构建假型逆转录病毒载体MuLV/VSV-G,并用于转染兔平滑肌细胞,为兔平滑肌细胞基因转染寻找一种高效的载体.方法 构建含有报道基因lacZ的假型逆转录病毒载体MuLV/VSV-G,测定滴度,并转染兔平滑肌细胞,观察其转导效率.并与MuLV的转导效率进行比较.结果 构建的MuLV/VSV-G载体,病毒滴度为6～7.8×10~6CFU,转染兔平滑肌细胞的效率是(92±12)%.而MuLV的转导效率为(24±5)%.结论 成功构建了假型逆转录病毒载体MuLV/VSV-G载体,该载体作为一种高效的载体可用于兔平滑肌细胞基因转染.     

P~(53)5-8外显子在喉癌中的表达

采用改良玛尼亚法从喉癌患者术后新鲜组织标本中分别抽提全DNA，用PCR－SSCP方法进行扩增和电泳，然后行硝酸银染色，判断喉癌的中心组织、癌旁组织、转移淋巴结中的P535－8外显子的突变。结果表明：35例喉癌组织标本中P535－8外显子的突变率为60％，P53突变与淋巴结转移存在相关关系，P535－8外显子的突变与TNM分期及高中低分化均存在正相关关系，提示P53突变与喉癌的发生发展有密切关系。     

增殖抑制基因和血管内皮生长因子在胃癌中的表达及其意义

目的探讨增殖抑制基因(HSG)以及血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化法检测HSG和VEGF在胃正常黏膜、癌旁组织及胃癌组织中的表达。结果胃正常黏膜、癌旁组织及胃癌组织HSG的阳性表达率分别为66.7%、58.0%和38.3%,正常黏膜组到胃癌组HSG表达率呈递减趋势,差异有统计学意义(P<0.05);VEGF在3组中的阳性表达率分别为13.3%、20.0%和68.3%,正常黏膜组到胃癌组的表达率呈递增趋势,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman等级相关分析显示,HSG与VEGF表达呈负相关(r=-0.847,P<0.05)。结论 HSG与VEGF的过表达可能是胃癌发生发展以及转移的重要原因之一。     

内脂素基因多态性与2型糖尿病的关系

目的探讨内脂素(visfatin)rs11977021、rs12537455、rs2110385位点单核苷酸多态性与2型糖尿病易感性的关系。方法收集陕西西安地区汉族人群192例受试对象,其中106例单纯2型糖尿病(T2DM)患者和86例健康对照者,采用标准化的聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RLFP)方法,分别检测内脂素(visfatin)rs11977021/DdeⅠ、rs12537455/AluⅠ和rs2110385/AluⅠ基因型并进行比较。结果 rs2110385位点的T等位基因频率和GT基因型频率在T2DM组均高于健康对照组(分别为28.3、14.0和14.2、7.0,P均<0.05);两组的rs11977021位点和rs12537455位点C、T等位基因及基因型频率分布均无统计学差异(P>0.05);单倍型分析显示T-C-T和T-T-T单倍型在T2DM组均显著高于健康对照组(分别为0.066、0.026和0.029、0.012,P均<0.05)。结论 Visfatin基因rs2110385位点在陕西西安汉族地区人群中存在遗传变异,其rs2110385多态性位点的T等位基因可能与T2DM的发病风险有一定的关系。