STUDY OF ECK GENE EXON-3 FROM HUMAN NORMAL TISSUE AND BREAST CANCER CELL LINE

ECK (epithelialcellkinase) ,alsonamedasEphA 2 ,isoneofthemembersofEphAsubfamilyinEphfamily .ECK protein ,atransmembranety rosinekinase[1] ,canbestructurallydividedintothreedomainsaccordingtotheirpositionsincells.ThreedomainsareexternaldomainwithanN ter minalsignalpeptide ,atransmembranedomainandacytoplasmicdomainwhichincludesacanonicalpro tein tyrosinekinasecatalyticdomain .ECKiswide lyexpressedinavarietyofhumantissues ,abun dantly presentinlung ,skin ,smallintestineandovary .ECKisalsoe…     

诊断超声对人早孕绒毛细胞DNA影响的定量研究

目的　探讨诊断超声经腹照射子宫内孕囊对人早孕绒毛细胞DNA的影响。方法　 60名拟行人流的早孕妇女随机分为照射 1 0min组和未照射组 ,各 3 0例。取绒毛组织后 ,以紫外分光光度法和3 2 P标记Alu探针打点杂交法定量检测绒毛细胞DNA单、双链断裂。结果　两种方法检测结果显示 ,照射组与对照组绒毛细胞单、双链DNA的量均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　诊断超声宫内照射孕囊 1 0min ,未引起人绒毛细胞DNA单、双链断裂 ,提示未引起绒毛细胞DNA损伤     

有机锗多酸衍生物对S_(180)肿瘤细胞DNA合成的抑制作用

目的　探讨有机锗多酸衍生物对S1 80 肿瘤细胞DNA合成的抑制作用。方法　用3H TdR掺入法检测有机锗多酸衍生物在体外对S1 80 肿瘤细胞DNA合成的抑制作用 ,观察不同剂量有机锗多酸衍生物对S1 80 实体瘤的抑制作用和对免疫器官的影响。结果　体外实验表明 ,有机锗多酸衍生物对S1 80 细胞的生长具有明显的抑制作用 ,而且浓度越高 ,抑制作用越强。体内实验也表明 ,有机锗多酸衍生物对S1 80 实体瘤的生长具有抑制作用 ,而且剂量越大 ,抑制作用越强。且有机锗多酸衍生物可防止荷瘤鼠脾脏重量的下降。结论　有机锗多酸衍生物可抑制肿瘤细胞生长 ,并存在剂量依赖关系     

应用PCR技术克隆人乳头瘤病毒16型E6基因

为进一步研究与宫颈癌发生密切相关的人乳头瘤病毒16型E6基因的转化作用,我们运用PCR技术扩增HPV16 E6 DNA,以pUC—19为载体,大肠杆菌了JM103为宿主菌,组建了质粒pRCE6经限制性核酸内切酶和Southern转印杂交证实,其插入片段约为0.5Kb,含有全部HPV16 E6序列。该质粒的组建为检测HPV感染中mRNA转录提供了特异性的早期基因探针。同时为进一步研究HPV16 E6基因的转化作用及转化蛋白打下基础。     

人白介素24cDNA克隆、突变纠正和原核表达

目的获取人白介素24(IL-24)cDNA,构建原核表达载体以表达含有谷胱甘肽S转移酶(GST)的融合蛋白GST-IL-24。方法以人外周血单核细胞(PBMC)总RNA为模板,RT-PCR扩增IL-24 cDNA,克隆入原核表达载体pGEX-4T-2,测序结果显示在IL-24 cDNA第223位G→A,370位T→C,从而导致其编码蛋白的氨基酸发生改变:A75T,H124Y,通过二次PCR将其纠正,重组载体pGEX-IL-24转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基--βD-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE,Western blot检测显示有融合蛋白GST-IL-24表达。结果通过RT-PCR及二次PCR得到人IL-24 cDNA,构建其原核表达载体,经IPTG诱导在相对分子量约为50 000处有融合蛋白表达。结论IL-24的重组载体在大肠杆菌BL21(DE3)可以表达GST-IL-24融合蛋白。     

镓盐对人胃癌MGc_（80－3）细胞DNA合成的影响及其抑瘤机制

采用细胞培养，￣３Ｈ－ＴｄＲ同位素示踪及ＭＴＴ显色技术观察了氯化镓（ＧａｌｌｉｕｍＣｈｌｏｒｉｄｅ，ＧＣ）对人胃低分化粘液腺癌ＭＧｃ_（８０－３）细胞株的生长抑制作用及ＤＮＡ合成的影响，并以铁为实验因子探讨镓抑瘤作用机制。结果表明：稼能使ＭＧｃ_（８０－３）人胃癌细胞￣３ＨＴｄＲ掺入显著减少，抑制癌细胞ＤＮＡ合成。镓不仅使癌细胞生长抑制，还可使癌细胞死亡。这种抑制作用可被Ｆｅ￣（＋３）的加入而减弱。提示：ＧＣ抑制癌细胞生长的机制可能与癌细胞铁利用障碍致ＤＮＡ合成低下有关。     

THE CONSTRUCTION AND PRELIMINARY APPRAISEMENT OF HSV-2 gD GENE DNA VACCINE

Ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｖｉｒｕｓｔｙｐｅ 2 (ＨＳＶ 2 ) ,ｏｎｅｋｉｎｄｏｆｄｏｕｂｌｅｓｔｒａｎｄｓＤＮＡｖｉｒｕｓ ,ｃａｎｃａｕｓｅｓｅｒｉｏｕｓｗｏｒｌｄｗｉｌｄｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ.Ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｖｉｒｕｓｇｅｎｏｍ ｉｃＤＮＡｃｏｄｅｓｆｏｒａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ 80 ｐｒｏｔｅｉｎｓ .Ｍｏｓｔｏｒａｌｌａｒｅｅｘｐｒｅｓｓｅｄｄｕｒｉｎｇｌｙｔｉｃｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ,ｍａｎｙａｒｅｆｏｕｎｄｉｎｉｎｔａｃｔｖｉｒｉｏｎｓａｎｄａｔｌｅａｓｔ 11ｈａｖｅｂｅｅｎｉｄｅｎｔ…     

DNA损伤修复基因与人鼻咽癌细胞辐射耐受CNE-2R细胞的相关性研究

目的探讨射线诱导后DNA损伤修复相关基因在放射敏感性不同鼻咽癌细胞系CNE-2、CNE-2R的差异表达。方法中性彗星分析法检测细胞DNA的双链断链(DSB);免疫荧光技术检测磷酸化组蛋白γH2AX焦点形成、射线照射后细胞放射性损伤的时间剂量效应及放射敏感性的变化;基因芯片(OHS-029)技术检测CNE-2及CNE-2R细胞2Gy照射前后的基因差异表达;Western blot方法验证二者的差异表达蛋白质。结果 4Gy的9MeV-β射线照射后2h,CNE-2R细胞与CNE-2细胞相比,细胞DNA损伤程度加重,且随时间的延长更为明显。荧光显微镜显示,2Gy的9MeV-β射线照射后6h,CNE-2各时间段细胞γH2AX阳性细胞率明显高于CNE-2R组。DNA损伤相关基因表达谱分析发现,CNE-2和CNE-2R细胞相比,差异表达的DNA损伤修复相关基因共37个,其中上调基因24个,下调13个,其中6个位点差异6倍以上,3个位点低于0.1的差异表达;Western blot结果显示,与CNE-2细胞相比,GADD45a、RRAD1在CNE-2R中的表达水平明显下调,而ERCC1及PRKDC蛋白质明显上调,与基因芯片的研究结果一致。结论 9MeV-β射线照射后CNE-2细胞DNA的损伤程度较CNE-2R细胞明显,CNE-2R细胞放射抗拒性与DNA损伤修复能力的基因差异表达相关。通过对筛选出的靶基因进行调控,有可能改变细胞的放射敏感性。     

破译Merkle-Hellman背包加密方案的DNA计算模型

背包公钥密码体制是第一个公钥体制,其攻击算法是NP完全问题.首先对背包问题和背包公钥体制进行了描述,然后给出了2种破译Merkle-Hellman背包加密方案DNA计算模型,即分步排除法和二分法,分步排除法是一种基本算法,二分法对分步排除法进行了改进,提高了破译背包密码的效率.     

一种基于DNA计算的多模态函数求解模型

通过对DNA计算的研究,提出了一种在DNA计算的基础上引入一种基于Lokta-Volterra方程的生态竞争繁殖、家庭选择机制等的求解多模态函数的进化算法,使得群体能够保持多样性,并有效地避免了早熟收敛,通过对测试函数的求解,同时搜索到多模函数多个极值峰点,取得了令人满意的结果。