手足口病附28例临床观察

手足口病是近年来引入注意的一种口腔粘膜和手足发疹为主的传染性疾病，本文报道２８例均为小儿患者，并详述了手足口病的典型症和治疗。本病传播广泛，可呈暴发流行，治疗不当可并发心肌炎，脑炎及麻痹等症，甚可引至死亡，应引起人们高度重视。     

从西安地区正常儿童尿中检测人巨细胞病毒DNA

为了研究人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染的流行病学及鉴定ＨＣＭＶ核酸在尿中分布，我们用ＨＣＭＶＡＤ１６９株ＨｉｎｄⅢ－ＥＤＮＡ片段制备探针，采用核酸杂交技术对取自西安地区１８０例３岁～５岁正常儿童的尿标本进行了ＨＣＭＶ相关序列的检测。结果显示出西安地区ＨＣＭＶＤＮＡ阳性者３例（５０份尿标本）占６％；咸阳地区ＨＣＭＶＤＮＡ阳性者７例（５０份尿标本）占１４％；兴平地区ＨＣＭＶＤＮＡ阳性者１９例（８０份尿标本）占２５％。在不同的地区之间，阳性检出率有较明显地差异。     

用分子杂交法检测妇女宫颈疾患中的HPVDNA

为了探讨人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）与宫颈癌之间的相关性，我们收集了全国宫颈癌高发县之一的略阳县１２例宫颈癌，１２例宫颈间变，３６例宫颈Ⅱ～Ⅲ度糜烂患者的组织标本，经抽提ＤＮＡ以后，以［ａ－３２Ｐ］ｄＡＴＰ标记ＨＰＶ１６、１８型ＤＮＡ进行打点杂交。结果为宫颈癌ＨＰＶ１６阳性６例，ＨＰＶ１８阳性１例。宫颈间变ＨＰＶ１６阳性４例，ＨＰＶ１８阳性１例。ＨＰＶ１６阳性率分别为５０％和３３．３％，ＨＰＶ１８阳性率为８．３％。宫颈糜烂Ⅱ～Ⅲ度的患者组织ＤＮＡ与ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８混合杂交阳性１７例，阳性率为４７．２％。     

大骨节病4种病因学说的同步研究

目的　研究大骨节病的始动病因。方法　对大骨节病既往的生物地球化学说(低硒说)、水中有机物中毒说、粮食真菌毒素中毒说3种病因说及我们发现的病毒病因说进行同步研究,探讨该病的始动病因。结果　生物地球化学说(低硒说)、水中有机物中毒说、粮食真菌毒素中毒说均不是大骨节病的始动病因。大骨节病的病因模式应该是与环境条件下的生物毒素中毒(低硒条件下的人类微小病毒B19感染)有较大关联性。结论　大骨节病的始动病因可能是低硒条件下的人类微小病毒B19感染引起的。     

通用腺伴随病毒载体的构建及表达报告基因GFP的实验研究

目的构建基因治疗通用型腺伴随病毒(AAV)载体并检测其转染外源基因作用。方法使用限制性内切酶切除pSSV9int质粒中的AAV病毒Rep和Cap基因元件后,插入了重组腺病毒专用穿梭质粒-pACCMVpLpA的含有CMV启动子、多克隆位点(MCS)和多聚腺苷酸信号(PolyA)的表达盒,构建了重组AAV通用载体质粒pSSHG-CMV。在该质粒MCS插入绿色荧光蛋白(GFP)基因后,使用pSSHG-CMV-GFP、GFP140和pAAV/Ad三种质粒共转染293包装细胞,制备GFP重组AAV。应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度,并将该病毒感染新生大鼠NIH3T3细胞,荧光显微镜观察GFP表达。结果重组AAV的滴度在浓缩前可达2×1011cfu/mL,浓缩后可达2×1013cfu/mL,表明成功地构建了重组AAV载体。插入外源基因GFP后,在包装病毒和辅助质粒的联合作用下,能产生具有感染性的重组AAV。感染了重组GFP-AAV的大鼠NIH3T3细胞表达了明显的GFP荧光。结论构建的重组AAV通用载体pSSHG-CMV可转染外源基因,这为进一步的基因治疗奠定了基础。     

新型杂多化合物抗禽流感病毒的实验研究

目的探讨新型杂多化合物(PTW)抗禽流感病毒的作用。方法采用细胞病变法结合MTT法检测PTW对MDCK细胞的毒性和对禽流感病毒(H5N1)的抑制作用;以H5N1感染的小鼠为实验模型,检测PTW对H5N1感染小鼠的治疗作用。结果PTW对MDCK细胞的最大无毒质量浓度为190.55 mg/L,半数致死质量浓度为909.9 mg/L;体外实验结果表明PTW对禽流感病毒半数抑制质量浓度(IC50)为13.49 mg/L,治疗指数(TI)为67.44;体内实验显示PTW对H5N1感染小鼠有明显的治疗作用,25 mg/kg剂量组对H5N1感染小鼠的肺炎抑制率达166.16%,生命延长率为28.36%。结论PTW对H5N1禽流感病毒具有较好的抑制作用。     

HPV-6/11 L1/E6、HPV-6/11 L1/E7嵌合DNA疫苗质粒的构建

目的　构建HPV 6 / 11L1/E6、HPV 6 / 11L1/E7预防、治疗性DNA疫苗质粒。方法　运用PCR扩增HPV 6 /11L1、E6、E7序列 ,PCR产物连接至pGEMT Easy质粒 ,测序鉴定正确后 ,分别连接至真核表达载体pVAX ,再用酶切、连接而构建成HPV 6 / 11L1 E6 /E7 pVAX质粒。运用电穿孔法将所获得质粒转染COS 7细胞 ,免疫组化检测蛋白表达情况。结果　所构建质粒的插入目的片段测序正确 ;免疫组化检测在胞浆胞核可见棕黄色点状阳性产物沉积。结论　所构建的HPV 6 / 11L1 E6 /E7 pVAX融合蛋白表达质粒可在体外表达L1 E6 /L1 E7蛋白 ,为今后进行DNA疫苗的动物实验及临床实验研究做好准备     

DETECTION OF CYTOMEGALOVIRUS（CMV） IMMEDIATE EARLY ANTIGENIN KIDNEY BIOPSIES AND TRANSPLANT NEPHRECTOMIES

Cytomegalovirus (CMV )infectionisoneofthemostcommonposttransplantcomplicationsandwasassociatedwithanincreasedmorbidityandmor talityintransplantrecipients[1,2 ] .Duringthefirst 4monthsafterrenaltransplantation ,theincidenceofactiveCMVinfectionisapproximately 5 0 % -90 % [3] .Recently ,manyresearchershavefoundthatCMVcouldaffecttheimmunityofhumanbe ing .CMVinfectionisalsoariskfactorforacuteandchronicrejectionofrenalallograftanddirectlycorrelateswithdecreased patientandallograftsur vival[4 - 7…     

涎腺肿瘤组织中人乳头瘤病毒DNA的检测

为探讨腺上皮起源的涎腺良、恶性肿瘤与人乳头瘤病毒（Ｈｕｍ ａｎ ｐａｐｉｌｌｏ ｍ ａｖｉｒｕｓ, ＨＰＶ）感染的关系,应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）,采用共有引物检测４４例涎腺肿瘤组织中的ＨＰＶ ＤＮＡ的存在状况。１０ 例正常涎腺组织作为对照。结果显示：肿瘤组织中ＨＰＶ ＤＮＡ 阳性检出率达７０．４５％ （３１／４４）,其中恶性肿瘤 ＨＰＶＤＮＡ 阳性率为７７２７％ （３１／４４）;良性肿瘤ＨＰＶＤＮＡ阳性率为６３６３％ （１４／２２）;而正常对照组织中ＨＰＶ ＤＮＡ阳性率仅为１０％ （１／１０）。提示：涎腺肿瘤的发生可能与ＨＰＶ感染有关