PDGFR信号通路促进星形胶质细胞和成纤维细胞共培养时细胞簇的成团效应

目的探讨血小板衍生生长因子受体(PDGFR)信号通路对小鼠脑星形胶质细胞和成纤维细胞共培养体系增殖的影响。方法取出生1～3 d的小鼠乳鼠大脑皮质培养星形胶质细胞,取脑膜培养成纤维细胞,免疫细胞化学荧光染色胶质纤维酸性蛋白(GFAP)鉴定星形胶质细胞纯度,染色纤连蛋白(FN)鉴定成纤维细胞纯度。通过向小鼠脑星形胶质细胞和成纤维细胞共培养细胞体系中加入细胞因子血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)刺激细胞或抑制剂AG1296进行干预,观察各组细胞增殖情况,Western blot检测共培养细胞系中p-PDGFR-β、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)的表达变化。结果鉴定结果显示星形胶质细胞和成纤维细胞的细胞纯度达到90%。显微镜下观察显示,加入PDGF-BB后星形胶质细胞和成纤维细胞共培养体系增殖明显并形成团块,给予抑制剂AG1296则增殖受到抑制,团块明显减少。Western blot结果显示加入PDGF-BB时,p-PDGFRβ、p-Akt表达增多(P<0.01);给予抑制剂AG1296则表达减少(P<0.05)。结论 PDGFR信号通路促进体外小鼠脑星形胶质细胞和成纤维细胞的增殖。     

神水泉大桥动力特性及地震作用分析

结合神水泉大桥的工程设计实例,采用大型有限元分析程序Midas Civil,选取空间梁单元建立动力计算模型,研究了桩土共同作用边界约束条件下的动力特性.采用反应谱法对该桥进行了E1地震作用分析,讨论了在CQC振型组合方法情况下结构地震响应的最大值,同时验算了E1地震作用下相关构件强度.     

通用系列车型变速器故障解决方法

一、通用4T65E系列变速器故障 目前在汽车维修市场中早期通用系列车型所用的4T65E型4挡自动变速器仍然还很多见.不过在维修中大家已基本掌握该变速器的故障特点,绝大部分问题都是很容易解决的.在这里我把一些特殊问题的解决方法与大家一起共享.     

昆虫激素体外调节家蚕滞育激素受体基因的表达

为了深入研究家蚕滞育的分子机理,从家蚕基因组中扩增了1395 bp和972 bp 2个不同长度的滞育激素受体基因Bmdhr启动子片段,以pGL3.0 Basic为载体,分别构建荧光素酶报告质粒,利用家蚕细胞瞬时表达系统分析其转录活性以及昆虫保幼激素类似物（JHA）、蜕皮激素（20-OH-ecdysone）和滞育激素（DH）对其活性的影响．结果表明：1395 bp的Bmdhr启动子活性显著低于972 bp的Bmdhr启动子,这说明Bmdhr启动子在-941～-1364 nt区间存在负调控元件．JHA浓度为2,4,6μg/mL时,极显著地增强启动子活性;浓度为1μg/mL时活性显著减弱,而为8μg/mL时则活性极显著减弱．20-OH-ecdysone对Bmdhr启动子活性的影响具有剂量效应,低浓度（1,2μg/mL）时显著增强启动子活性;浓度为4μg/mL时,启动子的活性显著减弱;但当浓度继续升高时,启动子活性又极显著增强．DH对Bmdhr启动子活性的影响同样具有剂量效应,其浓度为10～40 nM时,显著增强启动子活性;而当其浓度达到60 nM时,启动子活性变化不显著．     

诱捕受体3在宫颈癌中的表达及临床意义

目的探讨诱捕受体3(DcR3)表达与宫颈癌发生、发展的关系及其可能机制,为宫颈癌的诊治提供新的理论线索。方法应用ELISA法检测宫颈癌、宫颈上皮内瘤变(CIN)、健康女性外周血清及宫颈癌患者术前、术后1周配对组外周血清中DcR3的表达水平;应用免疫组织化学(SP)法检测宫颈癌(从上述血清宫颈癌组随机抽取组织)、CIN及正常宫颈组织中DcR3的表达。结果 ELISA检测显示,宫颈癌组DcR3血清水平显著高于其他两个对照组(P<0.05),其表达水平在健康女性组、CIN组、宫颈癌组间呈逐渐升高趋势;宫颈癌组术后1周血清DcR3较术前显著降低(P<0.05)。免疫组化显示,宫颈癌组DcR3表达阳性率为72.5%,CIN、正常宫颈的表达阳性率分别为45%、6.7%(P<0.05);宫颈癌组DcR3血清水平及组织表达阳性率均随着临床分期、淋巴结转移及分化程度加重而升高(P<0.05);宫颈癌组DcR3血清水平及组织表达阳性率之间呈正相关(P<0.05)。结论 DcR3过度表达可能在宫颈癌的发生、发展中起着重要作用;血清学检测DcR3水平可以作为宫颈癌筛查、诊断及治疗方案选择的一种辅助手段。     

宇通：E7纯电动客车领衔

在2014北京客车展上,宇通客车发布了E7纯电动客车,再次用实际行动向业界证实了自身的技术实力。据宇通新能源技术部相关人员介绍,E7纯电动客车依托睿控TM技术平台,采取＂空间布置最大化、管线路布局最优化、综合能量管理最优化＂的理念进行整车设计。     

期待又一个“60万公里无大修”出现 e6纯电动车行程超过50万公里的浮想

<正>比亚迪e6突破50万公里,且还能跑50万公里,让18年前的一汽大众"60万公里无大修"之事,再次浮现,历历在目。4年前的5月,40辆零排放无污染的比亚迪e6纯电动车率先加盟深圳出租车行列,至今已发展为拥有850辆e6的电动出租车队。最早运营的e6电动出租车,单车行驶里程均超过50万公里,第一批中其它e6也将陆续突破50万公里,创造了全球电动车实际行驶里程最长的世界纪录。众所周知,出租车是车主或司机挣钱谋生的工     

基于机器视觉的农产品自动分选机机构设计

介绍了用于分选农产品的自动分选机的设计,包括机械结构的总体设计和主要机械部件的设计选型,最后采用PRO/E对分选机进行三维设计.     

Toll样受体4信号通路过度激活在大鼠激素性股骨头坏死中的作用

目的建立大鼠激素性股骨头坏死模型并研究Toll样受体4(TLR4)信号通路在激素性股骨头坏死中的作用机制。方法成年雄性SD大鼠随机分为模型组、干预组,每组各24只,按照甲强龙20mg/kg的剂量给予双侧臀大肌交替肌注造模,1周1次,共8周。其中干预组在每次激素注射后,同时给予10mg/kg TAK242药物静脉注射;另12只大鼠设为对照组,仅在同等条件下给予生理盐水肌注。在激素注射后的8、10、12周时分别以过量麻醉法处死各组动物,采用ELISA测定血清中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的含量,并对股骨头进行组织病理学观察和TRAP特异性染色观察。分别提取各组大鼠股骨头总mRNA和总蛋白,采用RT-PCR和Western blot技术检测TLR4、髓样细胞分化因子88(MyD88)、NF-κB p65和单核细胞趋化蛋白(MCP-1)的mRNA及蛋白的表达。结果模型组股骨头坏死的组织病理学表现明显,其中血清TRAP含量、TRAP特异性染色面积、各因子的mRNA和蛋白含量表达均较其他两组有统计学差异(P<0.05)。干预组与空白对照组的各指标检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)。结论大剂量激素的使用可以引起TLR4信号通路过度激活从而介导激素性股骨头坏死的发生。     

高表达FGFR4细胞株的建立及其生物活性分析

目的构建FGFR4高表达细胞,研究FGFR4对细胞增殖能力的影响及相关蛋白活化机制,为研究以FGFR4为靶点的药物提供细胞模型。方法构建FGFR4真核表达载体并转染HEK293细胞,筛选稳定表达FGFR4细胞株,免疫印迹和免疫荧光分析FGFR4表达水平,细胞计数检测FGFR4高表达细胞的增殖情况,流式细胞仪检测FGFR4对细胞周期的影响,同时对ERK1/2磷酸化水平进行免疫印迹分析。结果在相同培养环境下,HEK293-FGFR4细胞同HEK293-pcDNA细胞相比,其增殖能力提高。周期分析表明,FGFR4使G0/G1期降低,促进细胞的增殖。同时,对MAPK信号通路进行了初步分析,发现FGFR4蛋白可以引起ERK1/2的磷酸化,从而导致MAPK/ERK1/2通路的激活,说明FGFR4可激活MAPK信号通路。结论成功构建了FGFR4高表达细胞株,为筛选以FGFR4为靶标的抗肿瘤药物奠定了前期实验基础。