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A simple and rapid expression and purification method of recombinant firefly luciferase was developed for bacteria detection. A modified luciferase gene from North American firefly Photinus pyralis was cloned into pET28a expression vector and the recombinant protein was produced in Escherichia coli BL21. The recombinant luciferase, equipped with a polyhistidine affinity tag, was purified by immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC). The approach generated an abundant expression and an efficient purification of a recombinant luciferase with final yield 1.995mg/L of cell culture. Experiments on the recombinant luciferase also showed that the relative light units (RUL) of the enzyme were 5.8×108, and the specific activity was 2.9×1010 RLU/mg. By applying adenosine triphosphate (ATP) bioluminescence to detection of the coin bacteria using the recombinant protein, the ATP content of bacteria was 9.48×10-16mol/mL, and was identical to the bacteria counts (4500CFU/mL) in order of magnitude. Taken together, our results provided a simple and efficacious method of the preparation of recombinant luciferase, which could be applied in the determination of bacteria via ATP bioluminescence. 相似文献
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1 问题的提出 MQ16-30型门机是70年代中期开始研制和试生产的,采用平行四联杆组合臂架系统,其大拉杆中心线与臂架中心线互相平行,象鼻梁中心线与摇臂中心线互相平行,臂架下铰点改变以往的固定铰形式而为能在轨道上上下移动的滑动铰形式. 相似文献
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婴儿型脊肌萎缩症的产前基因诊断 总被引:3,自引:0,他引:3
对一婴儿型脊肌萎缩症家系统进行前基因诊断。;方法用PCR-酶切技术对一家系孕17w的风险的胎进行SMN基因外显子7缺失的检测。结果此风险胎儿SMN基因外显子7缺失可继续妊娠。结论婴儿型脊肌萎缩症可通过产前基因诊断避免患儿出生。 相似文献
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本文重点介绍了锡澄高速公路沥青砼上面层,研究采用的AK-16C型级配的特点和施工要点,以及初压采用振动碾压方式等新的工艺要求。结合试铺路段测试的数据,总结出AK-16C型级配,在新工艺的保证下,避免了离析,确保了路面坚实、稳定、平整、抗滑和密水。 相似文献
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张志林 《华东交通大学学报》1998,15(B12):33-37
根据活动舱盖压力谱P-t曲线特点,通过任务类型划分、异常信号剔除、滤波、雨流计数和计数结果统计处理以及等损伤折算等工作,结合巴基斯垣空军提供的K8飞机各任务类型飞行小时和起落次数的统计结果,编制了K8飞机活动舱盖压力谱。 相似文献
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