慢性肝病患者血硒、GSH－Px和LPO的动态变化及补硒的影响

动态观察１６例慢性肝病患者加服硒酵母（２００μｇ硒／ｄ，连用１２周）后血浆硒水平、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性和脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量的变化，并与未服硒制剂１６例（对照组）作比较。结果：①实验开始１２周后，对照组患者血浆硒、ＧＳＨ－Ｐｘ活性才明显增高，ＰＯ含量明显下降，与治疗前比较差异有显著性（Ｐ＜０．０５）；②服硒组患者４周后血硒、８周后ＧＳＨ－Ｐｘ活性即显著增高，１２周趋于稳定，接近正常人水平。且血硒水平均显著高于对照组同期值（Ｐ＜０．０５）；③服硒组患者８周后血ＬＰＯ含量亦显著下降。提示利用硒酵母口服提高慢性肝病患者的抗氧化能力是可行的。     

酵母菌活性物质及多糖对红细胞免疫粘附能力的影响

用 CD35单抗阻断实验研究酵母菌活性物质 (yeast competence products,YCP)和酵母多糖(zymosan A,ZA)增强红细胞免疫粘附能力并探讨其作用机理。结果显示 :YCP和 ZA组在 CD35单抗阻断前 RBC· C3 b RR率分别为 2 4 .73± 2 .72 ,2 2 .82± 3.6 6 ,与对照组 (12 .33± 1.0 7)比较有非常显著性差异 (P <0 .0 0 1)。CD35单抗阻断后 RBC· C3 b RR率分别为 6 .4 5± 1.86、6 .4 5± 1.2 9,与阻断前比较有非常显著性差异 (P <0 .0 0 1)。提示 YCP和 ZA能增强红细胞免疫粘附能力 ,其机理可能与红细胞膜上 CR1表达增强有关。     

硒对克山病病区低硒居民红细胞GPX蛋白的影响

给克山病病区１４岁～１６岁居民每日口服２００μｇ硒（亚硒酸钠或硒酵母）１２周测定红细胞硒含量、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）活性和ＧＰＸ蛋白水平，以探讨补硒对人红细胞ＧＰＸ蛋白的影响。结果说明：①硒水平不仅可增加克山病病区人体红细胞ＧＰＸ活性，而且对ＧＰＸ蛋白水平也有提高作用；（②硒酵母硒对红细胞ＧＰＸ蛋白水平的增高作用比亚硒酸钠硒明显。     

玉米秸秆半同步糖化共发酵产乙醇的研究

用经过两步碱法(氢氧化钠-氢氧化钙)预处理的玉米秸秆为原料,以树干毕赤酵母为发酵菌株,分别研究在三角瓶体系和发酵罐体系中,未水洗和水洗物料在不同pH下对玉米秸秆半同步糖化共发酵的影响.结果表明:在三角瓶体系中,未水洗物料在pH 4.8下预酶解48 h之后维持pH不变,乙醇产率为0.193 g/g(以物料中纤维素和半纤维素含量计,下同),预酶解48 h之后将pH调至6.0时乙醇产率为0.234 g/g,改变pH对乙醇产率有较大提高,提高了21.24%;水洗物料在pH 4.8下预酶解48 h之后维持pH不变时乙醇产率为0.287 g/g,预酶解48 h之后将pH调至6.0时乙醇产率为0.292 g/g,改变pH对乙醇产率的提高不明显.同时进行了3 L发酵罐的放大实验,在与三角瓶同样的反应条件下,未水洗和水洗物料的乙醇产率分别为0.220和0.234 g/g.综合考虑水洗所带来的环境污染等问题后发现,未水洗物料同样可用于乙醇发酵.     

兔Oddi氏括约肌细胞BK通道Alpha亚基在Pichia酵母中的高效表达、纯化和鉴定

目的用巴斯德毕赤酵母系统表达兔Oddi氏括约肌(SO)细胞BK通道α亚基,并进行纯化和鉴定。方法采用RTPCR扩增编码兔SO细胞BK通道α亚基B细胞表位区基因的cDNA,经测序正确将其克隆入酵母表达载体pPIC9K,以电穿孔法转化酵母GS115。经MD平板筛选重组子、G418筛选鉴定后,甲醇诱导表达,镍离子亲合层析法对表达上清进行纯化,进行SDSPAGE和免疫印迹分析。结果用RTPCR扩增出约1497bp的兔SO细胞BK通道α亚基基因的cDNA。序列分析显示,扩增序列与已发布的新西兰大白兔骨骼肌BK通道α亚基的cDNA序列完全一致。SDSPAGE显示本系统表达的α亚基融合蛋白Mr约为55000,表达量约为55mg/L,纯度为96%。Westernblot检测证明,该α亚基融合蛋白可与兔BK通道α亚基多克隆抗体特异性结合。结论克隆了编码兔SO细胞BK通道α亚基B细胞表位区基因的cDNA,并在毕赤酵母中成功地表达了该蛋白,为进一步研究BK通道提供了物质基础。     

亚硒酸钠和硒酵母对克山病病区居民硒水平的影响

给克山病病区居民补充亚硒酸钠和硒酵母１２周，观察对血硒水平的影响。结果说明：①给病区低硒居民补硒所用两种硒制剂，均可使血浆和红细胞硒积蓄增高，停硒４周后血硒水平仍高于服硒前水平；②补硒后８周血浆硒含量已升至恒定水平不再继续上升，而红细胞硒含量仍继续增高；③硒酵母在提高和维持血硒水平上优于亚硒酸钠，硒酵母硒具有高于亚硒酸钠硒的生物利用率。     

克山病病区粮喂养大鼠对硒酵母硒的相对生物利用度

本研究用克山病病区低硒粮喂养大鼠比较了硒酵母和亚硒酸钠硒的生物利用度。在补硒2和4周时,用心、肝、肾和红细胞硒含量评估,硒酵母硒的生物利用度明显高于亚晒酸钠,说明硒酵母硒比亚硒酸钠硒更有效地存留于组织。当用血小板和肝谷胱甘肽过氧化物酶(GSH_(PX))活性评估时,硒酵母硒的生物利用度在补硒2周时比亚硒酸钠硒低,但在补硒4周时却高于之,表明硒酵母和亚硒酸钠硒均可供GSHP_(PX)合成所利用,但硒酵母恢复GSH_(PX)活性较慢。在停止补硒后,硒酵母维持心和红细胞硒以及肝和血小板GSH_(PX)活性的作用优于亚硒酸钠。     

补硒对克山病病区居民血浆和血小板GPX活性的影响

给克山病病区低硒居民补充亚硒酸钠、硒酵母共１２周，以观察对血浆和血小板谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）活性的影响。结果说明：①给克山病病区低硒居民补充两种形式的硒制剂，均可使血浆和血小板ＧＰＸ活性增高，停硒４周后仍未下降到服硒前水平；②补硒８周两组血浆ＧＰＸ活性已升至恒定水平，而硒酵母组在停硒后高于亚硒酸钠组；血小板ＧＰＸ活性在补硒４周和８周分别升至恒定水平；③硒酵母在提高血小板活性上比亚硒酸钠慢，但在维持血小板ＧＰＸ活性方面优于亚硒酸钠。     

多抗甲素A对鼠J774巨噬细胞免疫活性的增强作用

对多抗甲素A对J774巨噬细胞活性的调节作用作了观察研究。细胞与多抗甲素A共同孵育,加酵母多糖作激发剂,在自动微量荧光分析仪下进行分析。结果显示多抗甲素能增强该细胞的免疫活性。500mg/L和1000mg/L为最佳浓度,增强效果分别达2.02倍和2.07倍。高于或低于该浓度,增强效果减弱,3000mg/L时,出现抑制效应。     

丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及人胎肝cDNA文库的扩增、纯化和鉴定

目的用含丙型肝炎病毒核心(HCV core)蛋白的cDNA片段构建酵母双杂交诱饵载体,并进行人胎肝cDNA文库的扩增、纯化和鉴定。方法PCR扩增含HCV core蛋白不同大小的cDNA片段,分别克隆入pUC19质粒,经测序正确后,再亚克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中。扩增人胎肝cDNA文库并纯化、鉴定。结果获得含HCVcore蛋白的cDNA片段,并成功克隆入pGBKT7中。待转化的人肝cDNA文库滴度在5×108左右,纯化后的质粒DNA质量浓度约1 g/L。用EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切显示插入片段大小不一。结论成功构建了核心蛋白的酵母双杂交诱饵载体;扩增、纯化的人胎肝cDNA文库的多样性很好,适合于筛选。为用酵母双杂交技术研究与HCV core蛋白相互作用的蛋白打下坚实基础。