WWOX蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨WWOX(WW domain-containing oxidoreductase)基因在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义.方法 用免疫组化方法检测50例鳞癌、31例腺癌及20例癌旁正常组织中WWOX基因蛋白的表达,并分析其与各临床病理指标之间的相关性.结果 WWOX基因在72.8%的非小细胞肺癌中失表达或表达减少,而在相邻正常肺组织中有80.0%正常表达.WWOX基因的表达与组织类型、细胞分化程度密切相关(P<0.05),在鳞癌和低分化癌中WWOX基因失表达或表达减少.结论 WWOX蛋白在非小细胞肺癌组织中呈低表达,该蛋白表达的缺失可能在不同类型非小细胞肺癌的形成中发挥了不同的作用.     

EB1基因表达与胚胎染色体数目异常的关系

目的研究EB1基因在胚胎绒毛细胞中的表达,并分析其对染色体分离的影响。方法采用荧光定量PCR技术检测EB1基因在人工流产绒毛核型分析正常的胚胎细胞和自然流产绒毛核型分析异常的胚胎细胞中的表达差异;免疫组织化学方法检测EB1蛋白在两者中的表达情况,并用Western blot加以验证。结果EB1基因mRNA拷贝数/GAPDH基因mRNA拷贝数的均值在人工流产绒毛核型分析正常的胚胎细胞中为0.010 04±0.008 223,在自然流产绒毛核型分析异常的胚胎细胞中为0.150 9±0.063 3。Western blot和免疫组织化学结果表明其在自然流产绒毛核型分析异常胚胎细胞中的表达也高于其在人工流产绒毛核型分析正常胚胎细胞中的表达。经统计分析,EB1基因mRNA水平和蛋白水平在上述两组细胞中的表达均有显著差异。结论EB1基因在自然流产绒毛核型分析异常的胚胎细胞中的表达明显高于其在人工流产绒毛核型分析正常的胚胎细胞中的表达,其高表达可能导致染色体分离异常。     

文化推波 企业弄潮

今年10月，笔者参加了由中国企业联合会、中国企业家协会举办的第三届全国企业文化年会，这次年会确定的主题是：“把脉企业生态，探寻文化基因”。从而用文化的力量推动企业快速健康成长，把中国企业做强做大做久。     

撒丁岛 远离尘嚣的世外桃源

撒丁岛吸引游人之处是拥有一条精彩独特的海岸线,这里确实能找到金色沙滩和绿色大海,是潜水、航行及其他水上运动的上佳场地。但深入内陆,你会发现延续了几个世纪的传统和生活方式,当地人淡泊宁静,这才是撒丁岛的迷人之处,也是撒丁岛民长寿的秘诀。     

EZH2、MMP-2及MMP-9在肝癌侵袭转移中的作用及关系

目的检测果蝇zeste基因增强子的人类同源物2(EZH2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在原发性肝癌组织中的表达,分析三者表达的相关性,并明确三者表达与肝癌临床病理参数间的关系;探讨EZH2在肝癌细胞侵袭迁移中的作用以及对MMP-2和MMP-9表达的影响。方法 qRT-PCR检测EZH2、MMP-2和MMP-9在肝癌组织中的表达;肝癌组织中三者表达的相关性采用Pearson相关分析;采用小干扰RNA转染构建EZH2表达下调的SMMC-7721肝癌细胞系;Transwell小室观察EZH2对SMMC-7721细胞侵袭、迁移的影响;qRT-PCR检测肝癌细胞中EZH2对MMP-2和MMP-9表达的影响。结果原发性肝癌组织中EZH2、MMP-2和MMP-9呈高表达,且其高表达与不良的临床病理因素相关;在肝癌组织中EZH2与MMP-9表达呈正相关;干扰EZH2表达抑制肝癌细胞侵袭、迁移和MMP-9表达。结论 EZH2、MMP-2和MMP-9与肝癌的发生发展密切相关,可成为肝癌的潜在生物标记物和治疗靶点。     

二甲双胍通过激活胰腺癌细胞AMPK通路抑制TGF-β1表达

目的探讨二甲双胍对胰腺癌细胞TGF-β1表达的影响及可能的机制。方法二甲双胍干预胰腺癌细胞株Panc-1及BxPC-3,MTT法检测细胞增殖;Transwell法检测细胞侵袭能力;qRT-PCR、Western blot及免疫荧光法检测细胞中TGF-β1表达,Western blot检测细胞中AMPK/p-AMPK的表达,ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1的含量。采用基因沉默技术敲除胰腺癌细胞AMPK后,二甲双胍干预,qRT-PCR及Western blot检测TGF-β1的表达情况。结果二甲双胍干预后,Panc-1及BxPC-3细胞AMPK的磷酸化水平明显降低,肿瘤细胞内TGF-β1的表达明显减少(Panc-1:P<0.001;BxPC-3:P<0.001),敲除肿瘤细胞AMPK可以逆转二甲双胍对TGF-β1的下调作用(P<0.05)。结论二甲双胍可以通过诱导AMPK磷酸化而抑制胰腺癌细胞内TGF-β1的表达。     

基于生物信息学探讨胰腺导管癌患者基因表达谱的变化

目的分析胰腺癌患者癌组织和癌旁组织的差异表达基因特征及其关键调控蛋白,为胰腺癌的预防及治疗提供理论依据。方法从Pubmed基因芯片数据库(GEO Database)中下载胰腺癌患者基因芯片数据,并将数据导入GCBI、networkAnalyst及Genclip等分析软件,分析癌组织和癌旁组织的基因表达谱、基因功能、蛋白质相互作用网络等,筛选两组之间的关键节点基因。结果癌组织和癌旁组织的基因表达谱有明显差异;在分析的28 869个基因中,癌组织和癌旁组织之间有4 447(15.40%)个差异表达基因;前250个差异表达基因蛋白相互作用网络分析发现5个关键蛋白(SMURF1、MET、BCL2L1、RALA和ERBB4),主要与蛋白结合及细胞外区域信号通路密切相关。结论癌组织和癌旁组织的基因表达谱有明显不同,提示基因转录谱在肿瘤的发生中发挥着调节作用;SMURF1及MET基因对胰腺癌的发生均有一定的预测能力,并可能受到蛋白结合和细胞外区域信号通路的调节而发挥生物学作用。     

脐血胰岛素样生长因子-2和印记基因H19与胎儿生长受限的关系

目的探讨脐血胰岛素样生长因子-2(IGF-2)和H19印记状态与胎儿生长受限(FGR)的关系。方法采用放射免疫法测定42例FGR孕妇(研究组)和晚期正常妊娠妇女30例(对照组)脐血中IGF-2水平,同时采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术,检测胎盘组织中H19基因印记状态。结果①研究组脐血IGF-2水平为(1.52±0.20)μg/L,明显低于对照组的(1.97±0.21)μg/L(P<0.05)。②研究组中杂合子20例,其中9例双等位基因表达;对照组中杂合子14例,均为单等位基因表达;研究组H19基因印记丢失明显高于对照组(P<0.05)。③研究组H19双等位基因表达的病例脐血IGF-2水平均明显低于H19杂合性丢失和H19单等位基因表达病例(P<0.05);H19杂合性丢失和H19单等位基因表达病例脐血IGF-2水平无显著性差异。结论妊娠晚期IGF-2减低是导致FGR发生的原因之一;H19基因印记丢失下调IGF-2基因间接影响胎儿生长发育。     

Fine Mapping of a Deafness Mutation hml on Mouse Chromosome 10

Objective To map a mouse deafness gene.identify the underlying mutation and develop a mouse model for human deafncss.Methods Genetic lindage cross and genome scan wer used to map a novel mutation named hypoplasia of the membranous labyrinth (hml),which causes hearing loss in mutant mice.Results ① hml was mapped on mouse Chr 10 (～43 cM from the centromere) suggests that the homologous human gene is on 12q22--q24, which was defined on the basis of known mouse-human homologies (OMIM,2004). ② This study has generated 25 polymorphic microsateUite markers, placed 3 known human genes in the correct order in a high-resolution mouse map and narrowed the hml candidate gene region to a 500 kb area.     

夫妻配对MTHFR基因型分布与不明原因反复流产的关系

目的　探讨亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因多态性在夫妻间的不同存在形式与不明原因反复流产之间的关系。方法　采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFPL)的方法 ,对 32对有两次及两次以上不明原因流产史的夫妇和 39对健康夫妇进行MTHFR6 77C→T突变相关性研究。结果　病例组与正常对照组流产发生的危险性比较 ,夫妻双方都是纯合或杂合突变型 ,其基因型分布与流产发生的危险性增高高度相关 ,OR =2 94 1,95 %CI[1.0 6 2～ 8.133];夫妻双方有一人是纯合或杂合突变型 ,而另一人为野生型的 ,其基因型分布与流产发生的危险性无关联 ,OR =0 .819,95 %CI[0 .32 0～ 2 .0 94 ];夫妻双方都是野生型 ,其基因型分布与发生流产的危险性降低高度相关 ,OR =0 188,95 %CI[0 .0 4 6～ 0 .76 0 ]。结论　子代携带MTHFR纯合或杂合突变可能是胚胎早期发育异常的原因之一 ,从而导致流产的发生。