心脏传导阻滞SCN5A基因L1001Q突变体构建和功能研究

目的对作者发现的一个中国3代人心脏传导阻滞家系SCN5A基因新突变L1001Q,构建突变表达载体,利用分子生物学方法和全细胞膜片钳技术观察L1001Q突变的功能。方法一步定点诱变法构建pEGFP-L1001Q-SCN5A突变体;激光共聚焦和Western blotting技术检测突变蛋白定位和表达;全细胞膜片钳技术观察突变体钠电流。结果野生型和L1001Q突变均表达在细胞膜上,且表达量无明显变化。二者最大激活电流分别为(148.34±0.77)pA/pF和(132.59±0.96)pA/pF(P>0.05),L1001Q突变半失活电压V1/2为(-73.25±0.87)mV,较野生型正向转移约3.5mV[V1/2为(-76.71±0.73)mV,P<0.05],L1001Q突变失活后恢复时间常数较野生型稍减小,差异无统计学意义(WT tau=16.8ms,L1001Qtau=14.1ms,P>0.05)。结论 L1001Q突变未影响钠通道蛋白的表达和转运,主要通过改变钠通道门控特性引起钠通道功能减弱进而导致心脏传导阻滞。     

荧光原位杂交法与免疫组织化学法检测乳腺癌c-erbB-2表达的比较

目的 比较免疫组织化学法(IHC)和荧光原位杂交法(FISH)检测乳腺癌c-erbB-2状态的一致性.方法 选取乳腺癌石蜡标本共50例,其中以IHC法检测c-erbB-2蛋白表达(+)10例、(++)20例、(+++)20例.以FISH法检测上述乳腺癌细胞c-erbB-2基因扩增情况,分析比较两种方法差异性与相关性.结果 在IHC检测乳腺癌c-erbB-2(+)和(+++)时,FISH检测结果与其具有较好的一致性,总符合率为89.2%.在IHC检测c-erbB-2(++)时,FISH结果与其一致性较差,符合率仅为35.3%.结论 IHC可以作为初步筛查c-erbB-2表达的首选方法;IHC检测乳腺癌c-erbB-2(+)和(+++)时与FISH有良好的一致性.因IHC检测c-erbB-2表达(++)时与FISH结果的一致性较差,这类患者在应用赫赛汀治疗时应做FISH确诊.     

Inhibitory action of docetaxel on the proliferation of HeLa and SiHa cells

Objective To study the inhibitory action of docetaxel (DOC) on the proliferation of HeLa and SiHa cells. Methods Cell morphological changes were observed with inverted phase contrast microscope. MTT was adopted to test and calculate the cell inhibition ratio. Flow cytometry was used to detect cell cycle. Results DOC had an obvious concentration-dependent inhibitory effect on the proliferation of both HeLa and SiHa cells. The inhibition ratio of DOC on SiHa was significantly higher than that on HeLa (P<0.05). DOC blocked HeLa at G2/M phase. Under the effect of DOC, the cell cycle of SiHa was not changed much. Conclusion DOC has an obvious inhibitory action on both HeLa and SiHa cells, which shows a promising prospect of DOC in clinical treatment of cervical cancer.     

三氧化二砷诱导人胃癌裸鼠移植瘤细胞凋亡及其对Fas/FasL表达的影响

目的 探讨三氧化二砷(As_2O_3)对Fas/FasL表达的影响及其在诱导肿瘤细胞凋亡中的作用.方法 雄性BALB/C-nu/nu裸鼠30只,建立人胃癌裸鼠移植瘤模型后,随机分为3组,即对照组、As_2O_3低剂量组和As_2O_3高剂量组.As_2O_3低剂量组和高剂量组分别按2.5mg/kg和5mg/kg剂量给予As_2O_3腹腔注射治疗;对照组给予等体积生理盐水.测量瘤块体积观察肿瘤的生长情况;采用电镜观察和原位末端标记(TUNEL)法检测肿瘤细胞的凋亡情况;采用免疫组化法检测Fas/FasL的表达.结果 As_2O_3治疗组瘤块的平均体积均显著小于对照组(P<0.05);As_2O_3治疗组肿瘤组织中凋亡细胞的数量较对照组显著增多(P<0.01);As_2O_3治疗组肿瘤细胞的Fas表达显著高于对照组(P<0.05),但FasL的表达两组间无显著性差异(P>0.05).结论 As_2O_3对人胃癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制可能与上调Fas表达、诱导胃癌细胞凋亡有关.     

雷帕霉素对小鼠H_(22)肝癌细胞生长增殖的影响

目的 研究雷帕霉素(rapamycin, RPM)对H_(22)肝癌细胞生长增殖的影响.方法 体外培养小鼠H_(22)肝细胞癌株,分别与RPM、CsA、FK506和5-Fu共同孵育48 h,进行MTT实验.流式细胞仪测定各组H_(22)细胞的细胞周期变化,ELISA法测定各组上清液中VEGF含量.体内实验建立H_(22)肝细胞癌皮下移植瘤模型,同时完成C57BL/6→BALB/c小鼠异体皮肤移植模型.给予RPM、CsA、FK506和5-Fu灌胃,观察皮片存活情况.获取实验小鼠血清及肿瘤组织.计算各组肿瘤体积,通过CD34免疫组化染色测定各组肿瘤组织的微血管密度(MVD).结果 剂量为0.01、0.1、1 mg/L的RPM对对数生长的H_(22)肝细胞具有细胞毒性,抑制H_(22)小鼠肝癌细胞增殖,培养上清液中的VEGF浓度较对照组显著降低(P<0.05),细胞周期分析显示S期细胞数较其他免疫抑制剂组显著减少(P<0.05).体内实验显示给予1.5 mg/(kg·d)和4.5 mg/(kg·d)的RPM与5 mg/(kg·d) FK506、20 mg/(kg·d) CsA的皮片存活时间相等,而肿瘤体积显著减小(P<0.05).与对照组相比,实验剂量RPM显著降低了荷瘤小鼠血清中的VEGF含量(P<0.05),同时瘤组织内的MVD显著减少(P<0.05).结论 体外实验研究和动物实验证实,RPM具有抗免疫排斥和抗肿瘤增殖的特点,可能在肝移植治疗肝脏恶性肿瘤方面发挥优势.     

A COMPREHENSIVE EVALUATION OF THE ROLE OF INHERITANCE AND ENVIRONMENTAL FACTORS IN PRIMARY LIVER CANCER

ＡＣＯＭＰＲＥＨＥＮＳＩＶＥＥＶＡＬＵＡＴＩＯＮＯＦＴＨＥＲＯＬＥＯＦＩＮＨＥＲＩＴＡＮＣＥＡＮＤＥＮＶＩＲＯＮＭＥＮＴＡＬＦＡＣＴＯＲＳＩＮＰＲＩＭＡＲＹＬＩＶＥＲＣＡＮＣＥＲＷａｎｇＸｕｅｌｉａｎｇ；ＸｕＨｕｉｗｅｎ；ＣｈｅｎｇＢｉｎｇ；ＭｅｎＢ...     

硒对大鼠心肌亚细胞结构过氧化体系作用的动态观察

用低硒饲料和其饲料补硒分别饲养大鼠1、2和3个月，动态观察了大鼠心肌抗氧化酶活性和亚细胞结构脂质过氧化物（LPO）水平的变化。结果：与同期补硒组比较，低硒组大鼠心肌胞液谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性显著降低；线粒体GPx活性饲养2个月后明显降低；两组大鼠心肌胞液超氧化物歧化酶（SOD）活性无显著差别；低硒组大鼠心肌亚细胞膜LPO水平在饲养1个月后显著升高。表明硒对心肌亚细胞膜结构有保护作用。     

DIG－DNA探针检测宫颈癌组织中HPV－16的E_7转化基因

应用地高辛配基（Ｄｉｇ－１１－ｄＵＴＰ）标记人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ－１６）Ｅ７转化基因作探针，分别检测了宫颈癌活检组织、宫颈炎及正常宫颈脱落细胞ＤＮＡ。其检出率为：宫颈癌中４２．１％（２４／５７）、宫颈炎中２．５％（１／３９）、正常宫颈中５．５％（１／１８）。宫颈组织中ＨＰＶ－１６Ｅ７转化基因的检出率较高，提示该转化基因与宫颈癌的发生可能密切相关。本研究也证实ＤＩＧ配基标记的Ｅ７基因探针具有特异、敏感、安全、稳定和能反复使用的优点，适合基层使用。     

THE TREATMENT OF HEPATIC CARCINOMA WITH HERPES SIMPLEX THYMIDINE KINASE GENE／ACYCLOVIR SYSTEM

ＴＨＥＴＲＥＡＴＭＥＮＴＯＦＨＥＰＡＴＩＣＣＡＲＣＩＮＯＭＡＷＩＴＨＨＥＲＰＥＳＳＩＭＰＬＥＸＴＨＹＭＩＤＩＮＥＫＩＮＡＳＥＧＥＮＥ／ＡＣＹＣＬＯＶＩＲＳＹＳＴＥＭＬｉＸｕ；，ＰａｎＣｈｅｎｇ＇ｅｎ；；，ＧｕｏＹｏｕｍｉｎ；，ＨｕＧｕｏｙｉｎｇ；Ｃｈ...     

双瓣叶型人造机械瓣膜替换135例报告

１９８９年２月至１９９４年１１月我们完成１３５例双瓣叶型人造机械瓣膜（简称双叶瓣）替换术，术后早期死亡１０例（死亡率７．４１％），晚期死亡４例。平均随访３４个月，生存者绝大多数均胜任轻、中度体力活动，心功能恢复至Ⅰ～Ⅱ级者１１９例（＞９８％），未发现血栓形成和栓塞并发症。