K562细胞cDNA表达文库的构建和鉴定

目的　构建K5 6 2细胞表达型cDNA文库。方法　提取K5 6 2细胞总RNA ,分离mRNA ,反转录合成双链cDNA ,消平cDNA末端 ,连接EcoRⅠ适配子 ,磷酸化EcoRⅠ适配子 5’端 ,Sephacryl S4 0 0柱除去小于 4 0 0bpcDNA片段 ,与去磷酸化的λgt11噬菌体连接 ,体外包装后建成cDNA文库。取出 1μL倍比稀释感染E .coliY10 90 ,测定文库大小、重组率 ,并以PCR鉴定cDNA插入片段的大小。结果　构建成含 1.0 2× 10 6重组子的K5 6 2细胞cDNA文库 ,重组子平均插入外源片段长约 1.3kb。结论　所建文库合格 ,适合用于筛选目的cDNA克隆。     

益气养血保元方中微量元素对肝癌细胞的影响

本实验通过益气养血保元方(OQP)对肝癌SMMC-7721细胞的作用,看到OQP可抑制肝癌细胞~3H-TdR和~(14)C-UR的掺入率,二者间有随OQP剂量增大而抑制率升高的剂量效应关系,提示OQP影响了肝癌SMMC-7721细胞的DNA、RNA合成,直接影响了癌细胞的生长分化,这些作用,可能是通过OQP中低Cu/Zn比值,高硒含量而达到的。临床证实OQP可改善中、晚期肝癌病人一般状况,恢复放疗、化疗病人白血球外,可能对肝癌细胞还有直接抑制生长分化的作用。     

MCFC GENERATING SYSTEM BY MEANS OF COAL IN CHINA

IntroductionTo generate electricity from the fuel cell is bymeans of utilizing the electrochemistry reaction ofthe combustible gas ( H2 ,CH4etc.) in the fuel cellstack. The coal in solid state can't be directlyused. All the combined cycle generating systemcomposed of the coal as fuel and the fuel cell de-mands to realize the gasification of coal. This pa-per studied the possibility of utilization and devel-opment of the combined cycle generating systemthatis composed of the coal and the molt…     

ISOLATION AND INDUCTION OF RABBIT BONE MARROW MESENCHYMAL STEM CELLS TO EXPRESS CHONDROCYTIC PHENOTYPE

Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ(ＭＳＣｓ)ｗｅｒｅｍｕｌｔｉｐｏ ｔｅｎｔｉａｌｃｅｌｌｓ ,ｌｏｃａｔｅｄｉｎｂｏｎｅｍａｒｒｏｗ ,ｓｋｅｌｅｔａｌｍｕｓ ｃｌｅａｎｄｓｙｎｏｖｉａｌｍｅｍｂｒａｎｅ ,ｗｈｉｃｈｃｏｕｌｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉ ａｔｅｉｎｔｏｓｅｖｅｒａｌｔｙｐｅｓｏｆｃｅｌｌｓ,ｓｕｃｈａｓｏｓｔｅｏｃｙｔｅ ,ｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅａｎｄａｄｉｐｏｃｙｔｅ[1,2 ] .ＳｅｐｅｒａｔｉｏｎｏｆＭＳＣｓｆｒｏｍｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｗａｓｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｃｏｎｖｅｎｉｅｔ ,ａｕｔ…     

干扰素α预防实验大鼠肝纤维化的作用机制

目的　探讨干扰素α(IFNα)预防肝纤维化的作用机制。方法　雄性SD大鼠 36只随机分成A组 (对照组 ) 12只 ,正常饮水 ,皮下注射花生油 ;B组 (模型组 ) 12只 ,复合因素制成肝纤维化模型 ;C组 (IFNα预防组 ) 12只 ,造模方法同B组 ,干扰素α 1× 10 5U肌注 ,1次·d-1。 6周后处死观察肝内纤维组织、肝星状细胞 (HSC)、α 平滑肌动蛋白 (α SMA)及肝功能变化。结果　与B组相比 ,C组肝内Ⅰ、Ⅲ型胶原、血清Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )、透明质酸 (HA)及层黏蛋白 (LN)明显降低 (P <0 .0 1) ,活化的HSC数目减少 ,凋亡数目增多 ,肝功损伤减轻。结论　IFNα通过减轻肝组织炎症和抑制HSC活化、诱导其凋亡预防肝纤维化。     

油酸对胰岛素或瘦素刺激的培养内皮细胞分泌功能的影响

目的　研究油酸直接对培养人脐静脉内皮细胞形态的影响 ,对内皮细胞与胰岛素或瘦素刺激的内皮细胞分泌一氧化氮 (nitricoxide ,NO)及内皮素 (endothelin 1,ET 1)的影响。方法　应用倒置显微镜观察油酸预处理的活细胞形态的变化 ;以酶法和放免法测定细胞上清液NO及ET 1浓度 ,观察无或有油酸预处理的内皮细胞 ,在胰岛素或瘦素刺激下的分泌功能变化。结果　应用油酸预处理后 ,内皮细胞发生轮廓模糊、核色变淡等变化 ;随着刺激的胰岛素浓度增加 ,内皮细胞释放NO逐渐增加而分泌ET 1逐渐降低 ,并呈剂量依赖性相关 ;随着预处理的油酸浓度增加 ,内皮细胞与胰岛素或瘦素刺激的内皮细胞分泌NO浓度逐渐下降 ,呈剂量依赖性相关 ;预处理油酸浓度在 5 0～ 10 0 μmolo·L-1的范围增加时 ,内皮细胞与瘦素刺激的内皮细胞分泌ET 1浓度明显降低 ;在不同浓度油酸预处理下 ,胰岛素刺激的内皮细胞分泌ET 1浓度无明显变化。结论　油酸具有对内皮细胞的直接损伤作用和抑制胰岛素或瘦素刺激的内皮细胞分泌NO的作用 ,油酸或胰岛素可直接抑制内皮细胞释放ET 1。     

川芎嗪对成体大鼠脑缺血再灌注损伤后海马齿状回细胞增殖的影响

目的研究川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对大鼠脑缺血再灌注损伤后海马齿状回(dentate gyrus,DG)细胞增殖的影响。方法成年雄性SD大鼠行2 h大脑中动脉阻塞手术,术后2 h开始腹腔注射TMP[40 mg/(kg.d)]。手术后腹腔注射5-溴脱氧尿核苷(5-bromodeoxyuridine,BrdU),末次注射24 h后处死动物,免疫组化染色观察TMP对脑缺血再灌注损伤后DG细胞增殖的作用。结果正常组和假手术组在DG有少量BrdU阳性细胞,对照组缺血后1 d阳性细胞开始增加,14 d达到高峰(P<0.05),TMP治疗组缺血后1 d损伤侧BrdU阳性细胞数开始增加,7 d达高峰(P<0.05)。结论TMP能促进缺血再灌注损伤大鼠海马齿状回内源性神经干细胞增殖。     

论神经元再生现象的科学认识论意蕴

本从神经元再生这一新的医学发现出发，阐述了神经元再生现象对以稳定神经结构为基础的科学认识论带来的挑战，并就它对人的大脑可塑性、人工智能的拓展及传统认知观念的更新所具有的意义进行了多角度的分析。论力图表明：神经科学的新发现必然会不断地粉碎陈旧的思维定势所设置的障碍，改变我们对世界的看法，推动哲学观念的变革。     

ARTIFICIAL IMMUNE ALGORITHM OF MULTICELLULAR GROUP AND ITS CONVERGENCE

Objective To find out more extrema simultaneously including global optimum and multiple local optima existed in multi-modal functions. Methods Germinal center is the generator and selector of high-affinity B cells, a multicellular group＇s artificial immune algorithm was proposed based on the germinal center reaction mechanism of natural immune systems. Main steps of the algorithm were given, including hyper-mutation, selection, memory, similarity suppression and recruitment of B cells and the convergence of it was proved. Results The algorithm has been tested to optimize various multi-modal functions, and the simulation results show that the artificial immune algorithm proposed here can find multiple extremum of these functions with lower computational cost. Conclusion The algorithm is valid and can converge on the satisfactory solution set D with probability 1 and approach to global solution and many local optimal solutions existed.     

α-干扰素对慢性髓细胞白血病来源的树突状细胞的免疫调节作用(Ⅱ)

目的　于慢性髓细胞白血病 (CML)来源的树突状细胞 (DCs)的无血清培养基中 ,加入α 干扰素 (IFN α) ,观察IFN α对CML DCs表达Fas/FasL的影响 ,以及体外IFN α合并DCs瘤苗对CML祖细胞的抑制作用。方法　CML DCs的培养基中除加入SCF、GM CSF、TNF α及IL 4外 ,还加入IFN α。培养 10～ 14d ,鉴定细胞免疫表型、Ph1染色体比例和混合淋巴细胞反应 ,流式细胞仪检测细胞表达Fas/FasL比例 ,碘化丙锭 (PI)染色分析细胞凋亡 ,ELISA法测上清液sFas含量 ,甲基纤维素半固体集落培养法鉴定IFN α加DCs瘤苗对CML的CFU GEMM的体外抑制作用。结果　加入IFN α后 ,CML DC免疫表型及刺激T细胞增殖能力均显著改善 ;CML DCsFas的表达上调 ,sFas含量却下降 ,FasL表达阴性 ;PI染色显示亚二倍体峰的数值升高 ,即凋亡比增加。IFN α合并DCs瘤苗组对CML的CFU GEMM体外抑制作用优于IFN α组或DCs瘤苗组。结论　IFN α在改善CML DCs免疫表型及功能的同时 ,亦可通过Fas途径促进Ph1阳性细胞凋亡。IFN α与DCs瘤苗有协同作用 ,体外二者联合应用对CML祖细胞有明显的抑制作用。