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71.
先天性长QT综合征相关人类HERG基因真核表达载体的构建及其功能表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的构建先天性长QT综合征相关HERG基因的真核表达载体,观察其在真核细胞中的表达,建立稳定的细胞系,探讨基因的功能。方法原核克隆载体pGEM-HERG经限制性内切酶获得HERG cDNA,将HERG cDNA亚克隆到真核表达载体pcDNA3中,用Lipofectamin2000转染试剂介导将pcDNA3-HERG及荧光真核表达载体pRK5-GFP共转染至HEK-293细胞,利用G-418进行细胞筛选,并用稀释法建立稳定的HEK-HERG细胞系。用全细胞膜片钳技术检测HERG基因的功能表达情况。结果在原核克隆载体pGEM-HERG的基础上构建了HERG的真核表达载体pcDNA3-HERG,并使其在HEK-293细胞中成功表达,建立的HEK-HERG细胞系稳定传代。膜片钳技术检测到了HERG通道电流的表达。结论该方法可成功构建及表达HERG的真核表达载体,为今后突变型HERG的研究奠定了基础。 相似文献
72.
目的构建可表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合蛋白的昆虫杆状病毒转移载体,利用Sf-9细胞表达、制备EGFP。方法用PCR法从pEGFP质粒中扩增EGFP基因,NcoⅠ/SalⅠ双酶切,克隆入杆状病毒转移载体NcoⅠ/SalⅠ酶切位点之间,获得pFB-EGFP质粒;转化E.coliDH10Bac,通过转座子Tn7的介导,获得重组杆状病毒Ac-EGFP;感染Sf-9昆虫细胞;利用激光共聚焦显微镜和SDS-PAGE观察并检测EGFP的表达。非变性法纯化EGFP。结果荧光显微镜和激光共聚焦显微镜证实感染的Sf-9细胞可表达EGFP;通过SDS-PAGE获得的EGFP,大小为27ku。结论重组pFB-EGFP载体具备表达EGFP的能力,为分子生物学研究提供了一种新型可表达EGFP融合蛋白的昆虫杆状病毒表达载体。 相似文献
73.
本文针对电气化铁道牵引供电运动监控系统中运方数据采集和控制单元,分析了目前影响RTU系统遥信采集实时性能的主要原因,指出了对大容量RTU系统,缩短遥信采集任务处理时间的必要。本文还提出了四种提高RTU系统实时性的改进方案,并对这些方案加以较详细的论述。 相似文献
74.
国家提出“实施卓越工程师人才教育培养计划”,为工程造价专业的发展创造了新的机遇。但在实施“卓越工程师”计划中如何开创新的教育模式,此文在基于工程建设的需求和培养卓越造价工程师的愿景,从强化执业能力训练的角度,对如何培养卓越造价工程师提出实施策略和几点设想。 相似文献
75.
杨建锋 《城市轨道交通研究》2016,(7):144-146
利用杭长高速铁路某段精调作业后的检测数据,分别利用轨道质量指数和工程能力指数两种方法对轨道精调质量进行了评价及对比分析。结果表明:两种方法对于各单项的精调质量评价结果基本一致;在对各单项指标的评价及提高精调效率方面,工程能力指数方法是对现有方法的一种补充和完善;精调作业时可重点关注有较大提升空间的轨向、高低和水平三个单项,以减少后期的重复作业。 相似文献
76.
介绍了大秦线HXD2电力机车风源及净化系统,重点分析和阐述了其结构组成、螺杆空气压缩机、自动除油/除水过滤装置、空气干燥器以及安全阀的技术参数、工作原理。并对HXD2电力机车风源及净化系统的测试方法以及供风能力进行了研究。 相似文献
77.
介绍了城市轨道列车使用的两种地板结构,说明了地板结构防火的试验方法,对比了两种结构的防火能力。两种地板结构均满足BS6853的防火要求,且乙种地板结构更胜一筹。 相似文献
78.
近年来,在国家优先发展公共交通政策的指导下,有条件的大城市和城市群地区把轨道交通作为公共交通的优先发展领域,取得了丰硕的成果.但是,由于我国城市轨道交通发展历史较短、经验不足等原因,使得我国的城市轨道交通建设在勘察设计、科技研究、标准体系、创新能力、风险控制、人才培养等方面存在一些亟待解决的问题.在今后的城市轨道交通建设中,要积极贯彻科学发展观,对相关问题展开有针对性的研究,提高创新能力,促进科学建设与管理,促进我国城市轨道交通又好又快地发展. 相似文献
80.
高校实验教学改革的初探 总被引:11,自引:0,他引:11
曾令美 《武汉船舶职业技术学院学报》2005,4(6):86-88
针对当前高校实验教学中存在的主要问题,从计算机硬件实验项目的设置到考试方法的改革等几个方面探讨了高校实验教学的改革与创新的几点措施,介绍了这些措施在计算机硬件实验中的实践和体会。 相似文献