K-ras基因点突变的反义寡脱氧核苷酸对人胰腺癌靶基因表达的抑制作用

目的　观察针对于胰腺癌K ras基因点突变的反义寡核苷酸对靶基因表达的抑制作用。方法　脂质体将人工合成的针对于K ras基因第 12位密码子点突变的反义寡核苷酸转染体外培养的人胰腺癌细胞株PC 2 ,用免疫组化和原位杂交技术检测靶基因的表达。结果　转染 4 8h后 ,反义寡核苷酸作用组胰腺癌细胞株PC 2的ras蛋白和K rasmRNA的表达程度较正义组和对照组均明显降低 (P <0 .0 5 )。结论　针对于K ras基因点突变的反义寡核苷酸作用于体外培养的胰腺癌细胞 ,对靶基因的表达有明显的抑制作用     

带修复因子的遗传算法在道路工程多资源平衡优化中的应用

利用带修复因子的遗传算法对道路工程多资源均衡优化问题进行了探讨,给出了带修复因子的遗传算法对整个问题的求解设计思路,对道路工程多种资源均衡优化中利用遗传算法优化时染色体设计、优秀个体的充分利用以及遗传操作后不合理结果的处理提出了解决方法,为今后遗传算法在道路工程进度优化中的应用提供了有益的思路.     

p16INK4/CDKN2在胆囊癌中的表达及临床意义

为明确p16基因及其产物在胆囊恶性肿瘤中表达的意义，用免疫组化ABC法对46例胆囊癌p16INK4／CDKN2表达进行检测，结果表明：p16INK4／CDKN2在良性病变中的阳性率高于胆囊癌（P＜0．05）。该蛋白的失活或缺失主要见于肿瘤的中、晚阶段，与胆囊外浸润和淋巴转移密切相关（P＜0．01），与肿瘤的病理类型及分化程度无关（P＞0．05）。检测p16INK4／CDKN2对临床正确地估计肿瘤的侵袭性、淋巴转移潜能及判断预后具有重要价值。     

先天性长QT综合征相关人类HERG基因真核表达载体的构建及其功能表达

目的构建先天性长QT综合征相关HERG基因的真核表达载体,观察其在真核细胞中的表达,建立稳定的细胞系,探讨基因的功能。方法原核克隆载体pGEM-HERG经限制性内切酶获得HERG cDNA,将HERG cDNA亚克隆到真核表达载体pcDNA3中,用Lipofectamin2000转染试剂介导将pcDNA3-HERG及荧光真核表达载体pRK5-GFP共转染至HEK-293细胞,利用G-418进行细胞筛选,并用稀释法建立稳定的HEK-HERG细胞系。用全细胞膜片钳技术检测HERG基因的功能表达情况。结果在原核克隆载体pGEM-HERG的基础上构建了HERG的真核表达载体pcDNA3-HERG,并使其在HEK-293细胞中成功表达,建立的HEK-HERG细胞系稳定传代。膜片钳技术检测到了HERG通道电流的表达。结论该方法可成功构建及表达HERG的真核表达载体,为今后突变型HERG的研究奠定了基础。     

THE GENE EXPRESSION OF BDNF IN NORMAL RABBIT RETINA

Objective To investigate the distribution of brain-derived neurotrophic factor(BDNF) protein in the rabbit retina. Methods Immune response material in the retina was observed using BDNF antibody by the method of immunohistochemistry. Results BDNF gene expression was mainly found in the RGCs, also in innernuclei cells and outernuclei cells in rabbit retina. Conclusion RGC is not only the target cell of BDNF, but also express the BDNF protein. BDNF from multi-sources participates in the regulation of RGCs.     

男性不育机制部分研究热点的探讨

半个世纪以来,男性不育患者的比例有升高趋势,但其病因和发病机制仍未完全阐明。本文结合我们的部分研究成果,概括介绍男性不育机制的部分研究热点,着重介绍精索静脉曲张、甲醛及男性不育相关基因与男性不育的可能关系。     

NM_(23)蛋白产物在膀胱癌组织中的表达

应用免疫组化SABC法研究了NM23／NDPK在正常膀胱、膀胱癌及癌旁组织中的表达。结果显示：NM23在正常膀胱中表达阴性，而癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为83．3％和87．5％。鳞癌、腺癌的NM23表达与诸临床病理因素无关，而移行细胞癌NM23表达强度与肿瘤病理分级和临床分期正相关。有淋巴结或远处转移肿瘤的NM23阳性表达率较未转移者低，阳性表达组术后3、5年生存率明显高于阴性组。提示NM23可能参与了膀胱癌的发生，并对移行细胞癌的浸润、转移和预后起负调控作用。     

IS导管血管壁内局部导入c-myc反义寡核苷酸预防PTCA术后再狭窄的实验研究

目的　探讨IS导管局部导入c myc反义寡核苷酸及c myc反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞的抑制作用。方法　 2 1只家兔 ,对照组 6只 ,反义寡核苷酸治疗组 15只。用IS导管导入c myc反义寡核苷酸 (1mg)于球囊损伤的髂动脉后 ,动脉血管造影。病理切片 ,图象分析测定新生内膜、中膜、面积和厚度 ,c myc蛋白免疫组化染色。 结果　动脉造影对照组 5 0 %～ 80 %局限狭窄 ,给药组 10 %～ 30 %局限狭窄。光镜观察结果显示 :血管内膜增生面积给药组为 (4.0 4± 1.0 2 )× 10 5μm2 ,对照组为 (7.6 6± 3.7)× 10 5μm ,(P <0 .0 5 ) ;对照组c myc免疫组织化学染色阳性 ,给药组血管c myc免疫组织化学染色显示弱阳性或阴性。结论　IS导管可在体局部导入反义寡核苷酸于动脉损伤靶点 ;c myc反义寡核苷酸可抑制SMCs迁移、增生及新生内膜的形成     

兔髂动脉内膜受损后增生和c-myc基因的表达

研究兔髂动脉内皮剥脱时血管壁细胞的反应特点和 c- myc基因的表达规律。用标准血管成形导管髂动脉球囊损伤 1 2只家兔的右髂总动脉后 ,分别于 3、7、40 d处死动物 ,用透射电镜观察术后 3d平滑肌细胞 ( SMC)超微结构的变化 ,光镜观察术后血管壁细胞的反应特点和 c- myc蛋白表达规律 ,同时对术后 40 d动物行血管造影。结果发现 :术后 3d兔髂总动脉中层 SMC由收缩型转变为分泌型 ,并向内膜下迁移 ,可见管腔内有血栓形成 ,1周时弹力板不完整 ,中膜 SMC排列紊乱 ,术后 40 d增生的 SMC和细胞外基质形成新生内膜 ,血管造影显示管腔狭窄 5 0 %～ 80 % ;球囊损伤段髂总动脉新生内膜 c- myc蛋白免疫组化染色为阳性 ,而对照组为阴性。结论 :球囊损伤髂动脉后可引起 SMC迁移、增生 ,其和细胞外基质一起形成新生内膜 ,管腔狭窄 ;SMC增生和 c- myc基因表达密切相关。