SH-SY5Y细胞基因片段文库及其数据库的建立

目的　建立SH SY5Y细胞基因片段文库和一种对大量cDNA片段数据管理系统的方法。方法　采用RD PCR技术构建SH SY5Y细胞基因片段文库 ,并对每一个克隆进行测序。应用FOXPRO编制一个软件对其大量的信息进行系统化管理。结果　应用RD PCR技术建立了细胞的cDNA片段文库 ,由 12 0 0余个片段克隆组成 ;应用FOXPRO制作了基因片段数据信息管理系统的软件 ,对此文库片段的测序数据进行管理。结论　采用RD PCR技术是一个很好的建立基因片段文库的方法 ;建立了基因片段数据信息管理系统的软件进行这个文库数据的管理。     

新疆地区7个少数民族遗传分化及基因流动特征

目的基于9个CODIS STR位点分型数据,探寻新疆地区7个主要少数民族的遗传分化及基因流动特征。方法计算杂合度、Nei遗传分化系数、Nei遗传距离以及Wright F统计量,使用确切概率法对民族分化水平进行统计检验;通过Mega构建系统发生树,Arlequin进行分子方差分析;应用R矩阵模型分析基因流动形式。结果7个少数民族平均杂合度均大于0.7,遗传分化系数小于2%,群体分化检验显示多数位点都有显著性差异;系统发生树和分子方差分析表明7个民族分为三支;R矩阵分析结果显示维吾尔、柯尔克孜以及乌兹别克族具有较高的基因流动水平,而回族基因流动形式呈现一定隔离性。结论新疆7个少数民族属于独立民族,但分化程度一般;其进化关系上较近,存在广泛的基因交流。     

宁夏汉族人群甘露糖结合凝集素基因多态性与乙型肝炎的相关性

目的探讨宁夏汉族人群中甘露糖结合凝集素(MBL)基因多态性与乙型肝炎的相关性。方法应用PCR-RFLP方法检测111例宁夏汉族健康人、82例乙肝患者的MBL基因的多态性分布,并与其他汉族人群MBL基因多态性的分布进行比较。结果在宁夏汉族人群中,只检测出两种等位基因:野生型A和变异型B,未检出变异型C、D等位基因,发现健康人与乙型肝炎患者MBL基因多态性分布无显著性差异。结论MBL基因多态性与乙型肝炎不相关,但宁夏汉族MBL基因多态性与广东汉族相比有显著性差异。     

原发性支气管肺癌中PTEN基因的蛋白表达及意义

目的研究抑癌基因PTEN在原发性肺癌中的蛋白表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测56例手术切除的肺癌石蜡标本及3例正常肺组织中的PTEN基因的蛋白表达情况。结果①正常肺组织中PTEN蛋白表达的阳性率明显高于肺癌患者,而在小细胞肺癌中的阳性表达低于非小细胞肺癌;②在56例肺癌患者中,随着分化程度的降低,PTEN的蛋白阳性表达率也随之下降;③Ⅰ、Ⅱ期肺癌患者的PTEN蛋白阳性表达率高于Ⅲ、Ⅳ期患者;④在19例有转移的肺癌患者中,PTEN表达阳性率明显低于无转移的患者。结论PTEN基因的表达与肺癌的病理类型、组织的分化程度、临床分期以及有无淋巴结转移密切相关。     

CD40基因多态性与自身免疫性甲状腺病的相关性

目的了解CD40基因多态性在西北地区汉族人群中的分布及其与自身免疫性甲状腺病(AITD)的相关性。方法随机选取本院内分泌科门诊的165例Graves病(GD)患者、113例桥本甲状腺炎(HT)患者为研究对象,以94例健康体查者为对照。①应用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性技术检测CD40基因5′非翻译区-1位点C/T多态性(5′UTR C(-1)T)、第三外显子58038位点-/T多态性;②应用扩增受阻突变系统-聚合酶链反应检测第九外显子64610位点C/G多态性。结果①5′UTR C(-1)T位点中CC基因型、C等位基因在GD组和对照组间有显著差异(P<0.05);②58038位点在372例样本中均为TT型;③64610位点未发现GG基因型。结论①西北地区汉族人CD40基因5′UTR C(-1)T位点上C等位基因型与GD发病有相关性,CC基因型者患GD的危险性较TT高;②58038位点-/T在西北地区汉族人中无多态性;③64610位点C/G在西北地区汉族人中未发现GG基因型。     

pSVL/GM-CSF真核表达质粒的构建及其表达活性观察

以真核瞬时表达质粒ｐＳＶＬ为载体构建ｐＳＶＬ／ＧＭ－ＣＳＦ真核表达质粒，用电穿孔法导入Ｃｏｓ－７细胞，以ＧＭ－ＣＳＦ依赖株ＴＦ１为靶细胞，检测其生物学活性；将不同剂量的ＰＳＶＬ／ＧＭ－ＣＳＦ质粒直接注射Ｂａ１ｂ／Ｃ小鼠股四头肌，动态观察小鼠血清中ＧＭ－ＣＳＦ的表达；将ｐＳＶＬ／ＧＭ－ＣＳＦ质粒导入Ｋ５６２细胞，观察ＧＭ－ＣＳＦ对瘤细胞生长状态的影响。结果表明：构建的ｐＳＶＬ／ＧＭ－ＣＳＦ真核表达质粒可在Ｃｏｓ－７细胞中有效表达ＧＭ－ＣＳＦ；小鼠骨骼肌直接注射ｐＳＶＬ／ＧＭ－ＣＳＦ（１００μｇ／及２００μｇ），在血清中可检出ＧＭ－ＣＳＦ，在１０～１５ｄ达高峰（８Ｕ／ｍｌ），为临床应用提供了实验基础；导入ＧＭ－ＣＳＦ基因的Ｋ５６２细胞可表达ＧＭ－ＣＳＦ，且经ＧＭ－ＣＳＦ基因修饰的Ｋ５６２细胞增殖状态明显优于对照组，提示对造血细胞肿瘤单用ＧＭ－ＣＳＦ应慎重，而与其它细胞因子联合应用可能是一个合理的方案。     

增殖抑制基因和血管内皮生长因子在胃癌中的表达及其意义

目的探讨增殖抑制基因(HSG)以及血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化法检测HSG和VEGF在胃正常黏膜、癌旁组织及胃癌组织中的表达。结果胃正常黏膜、癌旁组织及胃癌组织HSG的阳性表达率分别为66.7%、58.0%和38.3%,正常黏膜组到胃癌组HSG表达率呈递减趋势,差异有统计学意义(P<0.05);VEGF在3组中的阳性表达率分别为13.3%、20.0%和68.3%,正常黏膜组到胃癌组的表达率呈递增趋势,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman等级相关分析显示,HSG与VEGF表达呈负相关(r=-0.847,P<0.05)。结论 HSG与VEGF的过表达可能是胃癌发生发展以及转移的重要原因之一。     

内脂素基因多态性与2型糖尿病的关系

目的探讨内脂素(visfatin)rs11977021、rs12537455、rs2110385位点单核苷酸多态性与2型糖尿病易感性的关系。方法收集陕西西安地区汉族人群192例受试对象,其中106例单纯2型糖尿病(T2DM)患者和86例健康对照者,采用标准化的聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RLFP)方法,分别检测内脂素(visfatin)rs11977021/DdeⅠ、rs12537455/AluⅠ和rs2110385/AluⅠ基因型并进行比较。结果 rs2110385位点的T等位基因频率和GT基因型频率在T2DM组均高于健康对照组(分别为28.3、14.0和14.2、7.0,P均<0.05);两组的rs11977021位点和rs12537455位点C、T等位基因及基因型频率分布均无统计学差异(P>0.05);单倍型分析显示T-C-T和T-T-T单倍型在T2DM组均显著高于健康对照组(分别为0.066、0.026和0.029、0.012,P均<0.05)。结论 Visfatin基因rs2110385位点在陕西西安汉族地区人群中存在遗传变异,其rs2110385多态性位点的T等位基因可能与T2DM的发病风险有一定的关系。     

西安地区汉人GPT遗传多态性研究

用琼脂糖－淀粉混合凝胶电泳法结合特异组织酶染色技术，对汉族人群红细胞谷氨酸转氨酶（ＧＰＴ）的遗传多态性进行研究。结果表明：该方法灵敏快速，分辨率高。ＧＰＴ可分为ＧＰＴ１－１型；ＧＰＴ２－２型；ＧＰＴ２－１型。基因频率ＧＰＴ１为０．５３６８，ＧＰＴ２为０．４６３２，符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｒｉｎｂｅｒｇ平衡定律。ＧＰＴ分型在人群个体间的识别ＤＰ值为０．６２４９，是法医个人识别和亲权鉴定非常有用的遗传标记，也可作为异体骨髓移植成功在接的诊断指标。     

A VNTR ELEMENT ASSOCIATED WITH STEROID SULFATAES GENE DELETIONS STIMULATES RECOMBINATIONIN CULTURED CELLS

ＡＶＮＴＲＥＬＥＭＥＮＴＡＳＳＯＣＩＡＴＥＤＷＩＴＨＳＴＥＲＯＩＤＳＵＬＦＡＴＡＥＳＧＥＮＥＤＥＬＥＴＩＯＮＳＳＴＩＭＵＬＡＴＥＳ　ＲＥＣＯＭＢＩＮＡＴＩＯＮＩＮ　ＣＵＬＴＵＲＥＤ　ＣＥＬＬＳＧｏｎｇＹａｎ；Ｘ．Ｍ．Ｌｉ，Ｌ．Ｊ．Ｓｈａｐｉｒｏ（Ｄｅ...