氟对体外器官培养人牙胚骨形成蛋白表达的影响

目的　通过研究氟对牙胚发育早期骨形成蛋白 (BMP)表达的影响 ,初步探讨氟在早期牙胚发育中的可能作用机制。方法　 4个月的人胚胎 ,取乳牙胚用RPMI16 4 0培养液进行器官培养 8d。免疫组化法研究 2 5mg·L-1和 5 0mg·L-1的氟对分泌前期牙胚的影响 ,观察培养第 2、4、6、8天时BMP表达的变化。采用图像分析仪对免疫组化染色结果进行灰度分析。结果　BMP的表达主要在造釉器。成釉细胞 ,中间层细胞和星网状层细胞均有BMP表达 ,牙乳头细胞或成牙本质细胞不表达BMP。 2 5mg·L-1氟时从培养第 6天开始BMP表达增强 ;5 0mg·L-1氟时从培养第 2天到第 6天BMP的表达增强 ,培养第 8天时BMP的表达降低。结论　氟可能通过促进BMP某一亚型或某几个亚型的表达而在牙胚发育中起作用     

β淀粉样肽1～42单克隆抗体的制备

目的　制备稳定分泌β -淀粉样肽 1～ 4 2 (Aβ1-42 )单克隆抗体的杂交瘤细胞 ,产生高效价抗体。方法　通过基因工程技术 ,将Aβ1-42 基因融合于乙肝核心抗原 (HBcAg)的主要免疫优势区 (MIR) ,制备Aβ和HBcAg的融合蛋白 ,免疫BALB/c小鼠 ,取脾细胞与SP2 / 0细胞融合 ,筛选能稳定分泌Aβ1-42 单克隆抗体的杂交瘤细胞。结果　得到两株能稳定分泌Aβ1-42 单克隆抗体的杂交瘤细胞 ,Aβ1-42 单克隆抗体的Ig亚类为IgG3 。结论　制备得到的Aβ1-42 单克隆抗体特异性强 ,效价高     

尿毒症及肾病综合征患者血清蛋白电泳的变化

本文对50例尿毒症患者血清进行聚丙酰胺凝胶电泳,结果表明其α~-脂蛋白、部分α_1~-和α_2~-球蛋白明显下降,触珠蛋白、β-脂蛋白明显上升。同时对50例肾病综合征患者血清进行上述电泳,结果表明其白蛋白、部分α_1~-和α_2~-球蛋白明显下降,部分β_2-球蛋白及β-脂蛋白明显上升。对上述变化的机理及临床意义也进行了探讨。     

P53基因产物在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 研究P53基因产物在肝细胞癌中的表达及与肝细胞癌临床病理学特征的关系。方法 应用免疫组织化学技术,检测50例肝癌及癌旁组织中P53蛋白的表达。结果 肝癌突变型P53蛋白表达阳性率为32%(16/50),癌旁组织均为阴性;有门静脉癌栓31例,P53蛋白阳性率为45%(14/31),而无门静脉癌栓19例仅2例为阳性(P＜0..05);血清甲胎蛋白(AFP)≥400μg/L 36例,P53蛋白阳性率为41%(15/36),AFP＜400μg/L 14例仅1例阳性(P＜0..05)。结论 P53基因的突变发生在肝癌启动阶段之后;P53基因突变与AFP关系密切;P53蛋白对判断肝癌预后有重要意义。     

EXPRESSIONS OF P53, PROLIFERATING CELL NUCLEAR ANITIGEN, BCL-2 PROTEIN AND THEIR SIGNIFICANCE IN SALIVARY ADENOID CYSTIC CARCINOMA

Studiesonthecarcinomasshowedthatthespeedofcarcinomadevelopmentisdependentonthebalanceofcellproliferatingandapoptosis.Soitisveryimportanttostudythemechanismbywhichoncogenescontrolproliferationandapoptosisoftu-morcell.Moststudiesonsalivaryglandtumorshavelaidemphsisontheproliferatingfunctionofonco-genesathomeandabroad,andignoranteditsfunc-tiononapoptosis,especially,thestudieswerefew-.erincombiningtwokindsoffunction.Helen's[13studyonACCindicatedthatmutationofP,3doesn'tplayimportantroleincarcinog…     

CLONING AND SEQUENCING OF MATURE FRAGMENT OF HUMAN BMP4 GENE

Bone morphogenetic protein- 4(BMP- 4) is alow molecular weight glycoprotein ,classified as amorphogen.It is capable of inducing the formationof new cartilage and bone.This osteoinductiveability has led to the use of bone morphogeneticproteins as therapeutic agents for creation of newbone useful in treatment of skeletal injuries anddiseases,and in oral and maxillofacial applica-tions.Although many researchers have got the na-tive BMP from animal s demineralized bone by bio-chemical method,the…     

超声及超声微泡介导基因转染的可行性研究

目的探讨超声、超声造影剂微泡介导基因转染的可行性及所需超声照射时间。方法选择超声能量在MI=1.5、超声频率f=8MHz,向人脐静脉内皮细胞(HUVEC)悬液加入微泡后分别超声辐照20s、1、5、10、15、30min,继续培养24h。然后用台盼蓝拒染法计数活细胞,各组与对照组(无辐照)行统计学分析,选择超声辐照的最佳时长。然后,微泡与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒充分孵育后,采用该时长进行超声微泡介导基因转染试验,细胞继续培养48h后,通过荧光显微镜观察EGFP的表达。结果超声辐照10、15、30min组细胞计数比对照组降低,差异有统计学差异(P<0.05)。利用超声能量在MI=1.5、超声频率f=8MHz条件下辐照5min,继续培养48h后荧光显微镜观察,有EGFP表达,细胞生长良好。结论超声微泡能够促进质粒进入细胞并转染基因。超声能量MI=1.5、超声频率f=8MHz时,超声微泡介导基因转染的最佳辐照时长为5min。     

人PIF1及其截短体重组蛋白的真核表达及其细胞内定位

目的构建人PIF1及其C末端解螺旋酶模序(PIF1C)和N末端PINT结构域(PIF1N)截短体真核表达重组质粒,进行真核表达,并确定PIF1、PIF1C、PIF1N在细胞内定位。方法以HeLa cDNA为模板PCR获取PIF1、PIF1C、PIF1N编码区cDNA,将其插入pCMV-Tag 2B质粒中构建PIF1、PIF1C、PIF1N真核表达重组质粒;通过lipofectamine2000将重组质粒转染人293细胞中,Western blot方法检测其在真核细胞内的表达,用免疫荧光法检测其细胞内定位。结果成功构建了PIF1及其截短体真核表达重组体,并在真核细胞内成功表达。确定PIF1定位于核内,PIF1C定位于整个细胞,呈弥散分布,PIF1N主要定位于核内。结论在真核细胞中成功表达了PIF1、PIF1C、PIF1N,且发现PIF1N对PIF1的入核起重要作用,为进一步研究其PIF1及其各结构域奠定了实验基础。     

Union examination of AFP, AFU, AFPL3 and γ-GT in early diagnosis of primary liver cancer

Objective To explore the significance of union examination of blood serum liver cancer tracers in the early diagnosis of liver cancer. Methods We observed and compared the level of blood serum liver cancer tracers armor embryo protein (AFP), crag algae glycosidase (AFU), armor embryo protein heteroplasmon (AFPL3) andγ-Gu Anxian transferase (γ-GT) in early time for primary liver cancer patients and hepatitis liver cirrhosis patients and those chronic hepatitis B patients who had liver cancer family history. Results Finally among the 30 patients in the early liver cancer group, 23 were positive with AFP, 20 with AFU, 15 with AFPL3 and 21 with γ-GT. Five were found positive with blood serum AFP, AFPL3, AFU and γ-GT at the same time; 5 with AFP, AFPL3 and γ-GT; 5 with AFP, AFU and AFPL3; 7 with AFP, AFU andγ-GT. By contrast, in the control group, among the 30 hepatitis liver cirrhosis patients and those chronic hepatitis B patients with liver cancer family history, 11 were found positive with AFP, 3 with AFPL3, 12 with AFU and 14 with γ-GT. None of the patients were found positive with union examination of AFP, AFPL3, AFU and γ-GT in the blood serum at the same time. Conclusion The union examination of AFP, AFU, AFPL3 and γ-GT is significant to the early diagnosis of primary liver cancer.     

急性白血病患儿血清IL-10、IFN-γ的检测及其相关性

目的　了解小儿急性白血病的免疫病理机制 ,探讨TH1 /TH2型细胞因子平衡性在发病中的作用 ,为临床免疫防治白血病提供理论依据。方法　应用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测了 39例急性白血病患儿化疗前后血清IL 1 0和IFN γ水平 ,并进行相关性分析。结果　白血病患儿治疗前或复发时血清IL 1 0明显升高 ,IFN γ明显降低 ,治疗后病情缓解时IL 1 0水平下降而IFN γ水平升高 ,两者呈负相关关系。结论　小儿白血病的免疫病理机制与TH1 /TH2细胞功能紊乱有密切关系 ,血清IL 1 0、IFN γ水平变化可作为监测小儿白血病治疗反应的一种手段。