CLONING AND SEQUENCING OF MATURE FRAGMENT OF HUMAN BMP4 GENE

Bone morphogenetic protein- 4(BMP- 4) is alow molecular weight glycoprotein ,classified as amorphogen.It is capable of inducing the formationof new cartilage and bone.This osteoinductiveability has led to the use of bone morphogeneticproteins as therapeutic agents for creation of newbone useful in treatment of skeletal injuries anddiseases,and in oral and maxillofacial applica-tions.Although many researchers have got the na-tive BMP from animal s demineralized bone by bio-chemical method,the…     

食管癌和宫颈癌组织中p53蛋白过度表达及其与放疗敏感性的关系

用免疫组化法对 52例宫颈癌和食管癌标本中 p53基因蛋白过度表达进行研究 ,并探讨其与近期放疗效果的关系。结果显示 ,p53蛋白在宫颈癌和食管癌中过度表达分别为 35.4 8%和 52 .38% ,p53蛋白过度表达率在高分化鳞癌中较中低分化者低 (P <0 .0 5) ,且与病期无关 (P >0 .0 5)。在宫颈鳞癌 ,p53蛋白过度表达者近期放疗效果较差 (P <0 .0 5) ,食管鳞癌 p53过度表达与放疗效果无明显关系。提示 p53基因与放射敏感性有关 ,但不是唯一因素。     

超声及超声微泡介导基因转染的可行性研究

目的探讨超声、超声造影剂微泡介导基因转染的可行性及所需超声照射时间。方法选择超声能量在MI=1.5、超声频率f=8MHz,向人脐静脉内皮细胞(HUVEC)悬液加入微泡后分别超声辐照20s、1、5、10、15、30min,继续培养24h。然后用台盼蓝拒染法计数活细胞,各组与对照组(无辐照)行统计学分析,选择超声辐照的最佳时长。然后,微泡与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒充分孵育后,采用该时长进行超声微泡介导基因转染试验,细胞继续培养48h后,通过荧光显微镜观察EGFP的表达。结果超声辐照10、15、30min组细胞计数比对照组降低,差异有统计学差异(P<0.05)。利用超声能量在MI=1.5、超声频率f=8MHz条件下辐照5min,继续培养48h后荧光显微镜观察,有EGFP表达,细胞生长良好。结论超声微泡能够促进质粒进入细胞并转染基因。超声能量MI=1.5、超声频率f=8MHz时,超声微泡介导基因转染的最佳辐照时长为5min。     

人PIF1及其截短体重组蛋白的真核表达及其细胞内定位

目的构建人PIF1及其C末端解螺旋酶模序(PIF1C)和N末端PINT结构域(PIF1N)截短体真核表达重组质粒,进行真核表达,并确定PIF1、PIF1C、PIF1N在细胞内定位。方法以HeLa cDNA为模板PCR获取PIF1、PIF1C、PIF1N编码区cDNA,将其插入pCMV-Tag 2B质粒中构建PIF1、PIF1C、PIF1N真核表达重组质粒;通过lipofectamine2000将重组质粒转染人293细胞中,Western blot方法检测其在真核细胞内的表达,用免疫荧光法检测其细胞内定位。结果成功构建了PIF1及其截短体真核表达重组体,并在真核细胞内成功表达。确定PIF1定位于核内,PIF1C定位于整个细胞,呈弥散分布,PIF1N主要定位于核内。结论在真核细胞中成功表达了PIF1、PIF1C、PIF1N,且发现PIF1N对PIF1的入核起重要作用,为进一步研究其PIF1及其各结构域奠定了实验基础。     

人胎脑额叶和海马中星形胶质细胞的发育性变化

目的探讨人类胚胎期大脑额叶、脑室区(ventricular zone,VZ)/脑室下区(subventricular zone,SVZ)以及海马内星形胶质细胞的分布规律及形态特征。方法将收集的引产胎儿按胎龄分为4组:9¹1周,1411周,14¹6周,2216周,22²4周和3224周和32³6周。切取额叶、VZ/SVZ和海马部位的脑组织,固定后制作冰冻切片,免疫组织化学染色后观察胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞的分布及形态。通过GFAP和nestin免疫荧光双标染色剔除GFAP阳性的神经干细胞。结果 1在皮质,936周。切取额叶、VZ/SVZ和海马部位的脑组织,固定后制作冰冻切片,免疫组织化学染色后观察胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞的分布及形态。通过GFAP和nestin免疫荧光双标染色剔除GFAP阳性的神经干细胞。结果 1在皮质,9¹1周时GFAP阳性细胞主要位于VZ、SVZ和中间带(intermediate zone,IZ)内;1411周时GFAP阳性细胞主要位于VZ、SVZ和中间带(intermediate zone,IZ)内;14¹6周时其位于VZ最内层、IZ和分子层(marginal zone,MZ)内;2216周时其位于VZ最内层、IZ和分子层(marginal zone,MZ)内;22²4周时皮层、髓质、IZ、SVZ和VZ最内层均有GFAP阳性细胞,髓质中的GFAP阳性细胞免疫反应强烈,胞体浓染,突起围绕胞体向四周伸展,具有典型纤维型星形胶质细胞的特征;3224周时皮层、髓质、IZ、SVZ和VZ最内层均有GFAP阳性细胞,髓质中的GFAP阳性细胞免疫反应强烈,胞体浓染,突起围绕胞体向四周伸展,具有典型纤维型星形胶质细胞的特征;32³6周时GFAP阳性细胞的分布模式类似于2236周时GFAP阳性细胞的分布模式类似于22²4周,髓质中的阳性细胞数量增加。2在海马,924周,髓质中的阳性细胞数量增加。2在海马,9¹6周期间GFAP免疫反应程度较弱,主要分布在海马伞、VZ和MZ;22周后GFAP免疫反应程度增强,数量增多,分布范围逐渐扩大。3实验各组额叶VZ、SVZ以及海马的海马伞、VZ均有GFAP和nestin免疫荧光双标阳性细胞存在。结论在人胚胎发育后期端脑星形胶质出现并逐渐增多、分布广泛并趋于成熟。     

Union examination of AFP, AFU, AFPL3 and γ-GT in early diagnosis of primary liver cancer

Objective To explore the significance of union examination of blood serum liver cancer tracers in the early diagnosis of liver cancer. Methods We observed and compared the level of blood serum liver cancer tracers armor embryo protein (AFP), crag algae glycosidase (AFU), armor embryo protein heteroplasmon (AFPL3) andγ-Gu Anxian transferase (γ-GT) in early time for primary liver cancer patients and hepatitis liver cirrhosis patients and those chronic hepatitis B patients who had liver cancer family history. Results Finally among the 30 patients in the early liver cancer group, 23 were positive with AFP, 20 with AFU, 15 with AFPL3 and 21 with γ-GT. Five were found positive with blood serum AFP, AFPL3, AFU and γ-GT at the same time; 5 with AFP, AFPL3 and γ-GT; 5 with AFP, AFU and AFPL3; 7 with AFP, AFU andγ-GT. By contrast, in the control group, among the 30 hepatitis liver cirrhosis patients and those chronic hepatitis B patients with liver cancer family history, 11 were found positive with AFP, 3 with AFPL3, 12 with AFU and 14 with γ-GT. None of the patients were found positive with union examination of AFP, AFPL3, AFU and γ-GT in the blood serum at the same time. Conclusion The union examination of AFP, AFU, AFPL3 and γ-GT is significant to the early diagnosis of primary liver cancer.     

猪骨胶原蛋白降压成分的提取与生物活性的研究

目的　从猪骨胶原蛋白中提取小肽做为血管紧张素转换酶抑制剂。方法　猪骨胶原蛋白经胰蛋白酶水解 ,阳离子交换树脂层析 ,Sephadex G2 5凝胶过滤 ,反相高效液相层析 (HPLC) ,最终得到一种 9肽 ,其氨基酸组成 :Ile,Ser,His,Gly ,Ala,Pro ,Tyr,Leu ,Asp。结果　以马尿酰 甘氨酰 甘氨酸 (HGG)为底物 ,对从猪肺中提取的血管紧张素转换酶 (ACE)有明显的抑制作用 ,I50为 2 .6× 1 0 - 2 mmol/L。将含此肽 0 .0 1 %的混合物做静脉注射试验 ,对肾性高血压大鼠和自发性高血压大白鼠均有明显降压作用 ;口服给药 1 5d ,对自发性高血压有一定的降压作用。对离体豚鼠回肠平滑肌有收缩作用。结论　胶原蛋白酶解物 9肽的抗高血压效果 ,可能是通过对血管紧张素转换酶的抑制作用。     

乳腺癌p16和p53蛋白的表达及意义

目的　探讨p1 6蛋白和p53蛋白在乳腺癌中的表达及意义。方法　应用免疫组化ABC法检测了 74例乳腺癌 p1 6蛋白和p53蛋白的表达情况。结果　 74例乳腺癌 p1 6蛋白阳性表达率43 2 % ;在不同组织学分级的乳腺癌中p1 6蛋白阳性率分别为Ⅰ级 1 1 1 % ,Ⅱ级 50 % ,Ⅲ级 44 8% ,其各组间差异无统计学意义 (P >0 0 5)。 74例乳腺癌p53蛋白的阳性率为 44 6% ;p53蛋白阳性表达与乳腺癌组织学分级明显相关 ,其阳性率分别为Ⅰ级 2 2 2 % ,Ⅱ级 30 6% ,Ⅲ级 69 0 % ,Ⅲ级明显高于Ⅰ级 (P <0 0 1 )和Ⅱ级 (P <0 0 1 )。乳腺癌 p1 6蛋白与p53蛋白表达之间无明显相关。结论　p1 6蛋白的失表达 ,突变型p53蛋白的过表达均与乳腺癌发生发展有关 ,它们通过不同途径发挥生物学作用 ,p53蛋白表达对评估乳腺癌的分化程度和判断预后具有一定价值。     

SiC泡沫陶瓷用作柴油机尾气净化催化剂载体的研究

将具有三维连通网状结构的碳化硅(SiC)泡沫陶瓷作为柴油机尾气净化中HC和CO的催化剂载体,研究了SiC泡沫陶瓷的性能和电加热效果。结果表明:S iC泡沫陶瓷具有合适的电导率和良好的抗热震性能,适于用作电加热催化剂载体;可提高柴油机低温排气时HC和CO的转化效率。     

肺癌患者血浆中血小板GMP－140的测定

采用ＧＭＰ－１４０单抗ＳＺ－５１采用酶联免疫吸附试验检测了７４例肺癌患者ＧＭＰ－１４０含量并与４０例健康人作了对照，结果发现肺癌患者血浆ＧＭＰ－１４０均值高于正常人（Ｐ＜０．０１），尤其在肺癌伴转移患者更为明显，且亦高于肺癌未转移患者（Ｐ＜０．０５），为进一步探讨血小板在肿瘤增殖与转移中的作用及临床治疗提供了参考依据。