γ-射线诱导HL-60细胞凋亡相关基因的分离和鉴定

为明确参与γ 射线诱导ＨＬ ６０ 细胞凋亡的ｃａｓｐａｓｅ 家族成员,根据已知ｃａｓｐａｓｅ家族成员保守肽序列设计简并引物,经ＲＴ ＰＣＲ从凋亡ＨＬ ６０ 细胞ｍ ＲＮＡ扩增出一条带,通过基因克隆及序列测定进行鉴定。结果克隆出ｃａｓｐａｓｅ ３ ｃＤＮＡ的一段序列。说明ｃａｓｐａｓｅ ３ 参与了γ 射线诱导的ＨＬ ６０ 细胞凋亡,可能是该凋亡途径的枢纽元件     

雄黄治疗维甲酸耐药急性早幼粒细胞白血病-M_3及诱导凋亡的作用

目的　研究雄黄体外诱导人急性早幼粒细胞白血病 M3细胞凋亡的作用 ,并观察其对维甲酸耐药的急性早幼粒细胞白血病 M3的治疗效果。方法　用雄黄处理在体外培养耐维甲酸的人白血病细胞 ,电子显微镜观测白血病细胞凋亡过程 ,并前后对照观察应用雄黄治疗维甲酸耐药的急性早幼粒细胞白血病 M3的疗效。结果　在 1 .0～ 2 .0 μmol·L- 1 的浓度下 ,雄黄作用于白血病细胞 2 4h后 ,可见到较为典型的细胞凋亡形态学变化 :细胞核固缩 ,染色体凝集 ,呈新月型紧贴于核膜周边 ,核碎裂 ,染色质片断化 ,凋亡小体形成等。用雄黄治疗的 2 0例患者 ,完全缓解(CR) 1 7例 ,部分缓解 (PR) 1例 ,总有效率 (CR +PR) 90 %。结论　雄黄能够诱导耐维甲酸的白血病细胞凋亡 ,可用于维甲酸耐药的急性早幼粒细胞白血病 M3治疗 ,且缓解率及长期生存率高。     

THE PROTECTIVE EFFECTS OF THE TOTAL SAPONIN OF DIPSACUS ASPEROIDES ON THE APOPTOSIS OF HIPPOCAMPAL NEURONS INDUCED BY β-AMYLOID PROTEIN

Objective To investigate the effects of the total saponin of Dipsacus asperoides (tSDA) and ginsenoside Rb1 (GRb1) on the apoptosis of primary cultured hippocampal neurons induced by β-amyloid protein (Aβ). Methods Primary cultured hippocampal neurons, the cultures were pretreated with tSDA and GRb1 on 10d for 24 hours respectively. Then the cultures were treated with 35μmol·L-1 Aβ25-35 for 24 hours, observed the changing of survival rate of neurons and the apoptosis of neurons with biochemical analysis combining immunofluorescent cytochemical double-staining technique. Results Hippocampal neurons were treated with 35μmol*L-1 Aβ for 24 hours, and survival rate of neurons downed to 52.6%. When neurons were pretreated by tSDA and GRb1, survival rate of neurons increased 11% to 15%. The findings of immunofluorescent cytochemical double-staining indicated that apoptotic neurons were obviously more than that of the blank group, reaching 43.9%.When neurons were pretreated by tSDA and GRb1, apoptotic neurons were downed to 16.6%, 10.8% respectively. Conclusion tSDA had the same effects as GRb1, protecting the neurons, antagonizing neurotoxicity of Aβ, increasing survival rate of neurons, and reducing apoptotic neurons induced by Aβ.     

生长抑素受体家族介导的子宫内膜癌细胞系HEC-1A的生长抑制作用

目的研究生长抑素受体家族在子宫内膜癌细胞系HEC1A上的表达,并应用生长抑素类似物RC160活化生长抑素受体,观察子宫内膜癌细胞系HEC1A的生长及凋亡。方法利用RTPCR检测HEC1A细胞上的生长抑素受体。BrdU整合试验测定RC160对HEC1A细胞的抗增殖作用。TUNEL染色检测是否存在细胞凋亡。结果所有5种生长抑素受体亚型在HEC1A细胞中均有表达。RC160可抑制HEC1A细胞的生长,并具有剂量依赖性特点。在处理48h后,10-5mol/L浓度的RC160达到最大抑制效应。未检测到明显的细胞凋亡。结论生长抑素类似物RC160通过结合HEC1A生长抑素受体而抑制细胞增殖。细胞凋亡在此抑制过程中不起主要作用。     

蛋氨酸—脑啡肽改变缺锌小鼠脾淋巴细胞的增殖反应

本试验检测蛋氨酸—脑啡肽(M—EnK)在缺锌(Zn)组、配对组和对照组小鼠脾细胞对促细胞分裂原和混合淋巴细胞培养(MLC)反应上的效应。试验数据显示M—EnK能抑制以上3组淋巴细胞对ConA的反应,但对缺Zn组的抑制作用较小。M—EnK也能增进所有各组对美洲商陆(PWM)以及减少对脂多糖(LPS)的反应。对ConA、PWM和LPS增殖反应的改变可以被10μmol/L纳络酮所逆转。提示M—EnK在细胞增殖反应上的效应是通过阿片受体介导而实现的。在MLC增殖反应中,在缺少M—EnK时,缺Zn小鼠淋巴细胞的反应增加,M—EnK能抑制这种增加的反应。试验结果表明M—EnK能改变有丝分裂反应方式,Zn缺乏又能影响这种改变。     

肿瘤组织中淋巴细胞与瘤细胞相互关系的电镜研究

对12例不同部位癌组织中浸润淋巴细胞与瘤细胞的相互关系进行了电镜研究。发现有少数淋巴细胞以多种方式和瘤细胞相接触。与淋巴细胞接触的瘤细胞有些出现了破坏性改变,这些改变符合细胞自谢(Apoptosis)变化。此等结果表明,有些浸润淋巴细胞在体內对瘤细胞具有杀伤作用,被杀伤瘤细胞的主要死亡形式为自谢。然而由于和瘤细胞接触的淋巴细胞极少,浸润淋巴细胞在肿瘤局部的杀伤作用是非常有限的。     

人工冬虫夏草菌粉提高大鼠肝脏保存质量的实验研究

目的　探讨人工冬虫夏草菌粉提取液对大鼠肝脏低温保存损伤的保护作用。方法　将一定剂量的虫草提取液加入乳酸林格液内,分别低温保存大鼠肝脏6、12 h后,再灌注30 min。通过高压液相色谱法(HPLC)检测肝脏组织内的ATP、ADP、AMP含量,测定再灌注流出液内的AST、ALT、MDA及ET含量。并切取肝脏标本,光镜及电镜观察肝组织损伤情况。结果　于保存6 h后,实验组AST、ALT、MDA和ET均低于对照组,但无统计学显著差异(P>0.05)。光镜下除轻度细胞水肿外,无其他明显病理改变;保存12 h后,实验组流出液ALT、MDA及ET含量明显低于对照组(P<0.05),肝脏组织内ATP、TAN及AEC显著高于对照组(P<0.01)。实验组细胞凋亡指数显著低于对照组(P<0.01)。实验组和对照组在光镜及电镜下的超微结构改变亦有明显差异。结论　人工冬虫夏草菌粉提取液可以显著提高保存肝脏的质量。     

地塞米松对重症急性胰腺炎胰腺细胞凋亡的影响

目的　探讨地塞米松对大鼠重症急性胰腺炎胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因bax蛋白表达的影响。方法　 3 2只SD大鼠以 40g·L-1牛磺胆酸钠诱导建立急性胰腺炎模型 ,随机分为治疗组和非治疗组各 16只 ,对照组 6只。各组术后 6h、12h分别行TUNEL法染色检测胰腺细胞凋亡 ,免疫组化SP法检测胰腺组织中bax蛋白的表达。结果　治疗组大鼠 12h生存率明显高于非治疗组。HE染色显示治疗组胰腺组织炎症较非治疗组明显减轻。TUNEL染色显示治疗组 6h、12h胰腺细胞凋亡指数明显高于非治疗组 (P <0 .0 1)。免疫组化显示bax基因蛋白表达治疗组 6h、12h表达阳性率显著高于非治疗组 (P <0 .0 1) ,正常胰腺组织未见bax基因蛋白表达。结论　地塞米松治疗急性胰腺炎的机制可能与通过诱导胰腺细胞凋亡有关。     

慢性粒细胞白血病树突状细胞的体外无血清培养及杀瘤效应

目的　建立慢性粒细胞白血病 (CML)树突状细胞 (DCs)体外无血清培养体系。方法　小牛血清 (FCS)、无血清 (SFM)及自体血清分别培养CML病人CD34 + 细胞或单个核细胞 (MNCs) ,以SCF、GM CSF、TNF α、IL 4 (A)与GM CSF、TNF α、IL 4 (B)两组不同的细胞因子作对照。结果　CML DCsHLA DR高表达 ,CD80、CD83和CD86表达比例不高 ,异体混合淋巴细胞反应能力不强。SFM同FCS体系相比无显著差异。 5例CML DCsPh染色体比例与培养前MNCsPh染色体比例基本吻合 ;同时以CML DCs同自身T细胞、自体Ph+ MNCs共孵育 ,测其杀伤率为 (38.5± 6 .5 ) %。结论　CML DCs携带Ph染色体 ,能刺激自体T细胞杀伤自身白血病细胞 ,但需进一步改善其功能。     

小儿T淋巴细胞亚群的正常值的探讨

本文采用抗人T淋巴细胞单克隆抗体免疫荧光技术,对35例健康小儿的T细胞亚群进行了初步探讨。检验结果7岁～11岁健康小儿的CD_366～70%,CD_436～40%,CD_827～32%,CD_4/CD_8 0.86～1.76。本组资料的测定值与武汉、上海的类似研究进行了初步比较,对有关T细胞亚群的临床应用情况进行了初步讨论。鉴于健康小儿的T细胞亚群值报道甚少,建议本组测定值可作为类似研究时之参考值。