TGF-β1诱导的大鼠ASM细胞增殖的信号转导途径

目的　探求转化生长因子 β1(TGF β1)诱导的大鼠气道平滑肌 (ASM )细胞增殖的可能的分子信号转导途径。 方法　将体外培养的大鼠ASM细胞分为 3组 :对照组 (2 0mL·L-1FCS/DMEM) ,10 μg·L-1TGF β1组和 10 μg·L-1TGF β1/U 0 12 6 (1μmol·L-1)组 (U 0 12 6是特异性ERK1/ 2抑制剂 ) ,通过MTT法观察 3组ASM细胞增殖变化。免疫组化染色法观察 3组细胞磷酸化p4 4 / p4 2MAPK(pERK1/pERK2 )表达情况 ,并进行图像分析检测免疫组化染色灰度值。结果　细胞培养第 2天起 ,MTT法检测的 10 μg·L-1TGF β1组A值 (0 .36± 0 .0 4 3)明显高于对照组 (0 .12 6± 0 .0 5 2 ,t=5 .4 4 ,P <0 .0 5 )和 10 μg·L-1TGF β1/U 0 12 6组 (0 .175± 0 .0 5 0 ,t=6 .38,P <0 .0 5 )。免疫组化染色法观察 3组pERK1/ 2表达情况 ,10 μg·L-1TGF β1组灰度值 (6 6 .12± 6 .86 2 )明显高于对照组 (112 .4±11.82 ,t=3.89,P <0 .0 2 )和 10 μg·L-1TGF β1/U 0 12 6组 (14 8.4± 16 .97,t=10 .76 ,P <0 .0 0 1)。结论　特异性ERK1/2抑制剂U 0 12 6明显抑制TGF β1诱导的大鼠ASM细胞的增殖 ,TGF β1可能是通过MAPK信号转导途径促使大鼠ASM细胞的增殖 ,ERK1/ 2是这一过程中重要的信号分子。     

二酯酰甘油-蛋白激酶C信号传导系统和细胞因子与糖尿病肾病的关系

目的研究糖尿病大鼠肾小球中蛋白激酶C(PKC)的活性变化及转化生长因子-β1(TGF-β1)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况,探讨3者之间的相互关系及其与糖尿病肾病(DN)发生、发展的相关性。方法选用雄性SD大鼠,用链脲佐菌素制备大鼠糖尿病实验模型,随机分为正常对照组、糖尿病2周(DM2)组和糖尿病4周(DM4)组。大鼠断头处死,分离肾小球,提取纯化胞浆及胞膜蛋白。利用[r-32P]-ATP底物磷酸化的方法检测胞浆及胞膜PKC活性;用免疫组织化学法检测VEGF和TGF-β1在各组大鼠肾小球及肾小管中的表达。结果①DM2、DM4组肾小球细胞内总的PKC活性与对照组无显著性差异,胞浆PKC活性略有下降,但相差不显著(P>0.05);DM2、DM4组肾小球细胞膜PKC活性均明显高于正常对照组(P<0.05),且细胞膜PKC活性与肾脏肥大指数(肾重/体质量)和内生肌酐清除率(Ccr)呈正相关。②DM2、DM4组VEGF和TGF-β1的表达均高于正常对照组(P<0.01)。③肾小球细胞膜PKC活性与VEGF和TGF-β1的表达呈正相关。结论高血糖慢性刺激可引起肾小球PKC活性增高,并上调TGF-β1和VEGF的表达,进一步导致肾小球滤过膜通透性和滤过率增加,这在糖尿病早期肾内血流动力学改变中发挥着重要的调控作用。     

蛇床子素对大鼠离体子宫平滑肌收缩性能的影响

蛇床子素和维拉帕米对缩宫素、ＫＣｌ、高Ｋ＋除极化后Ｃａ２＋诱导大鼠离休子宫平滑肌收缩均产生抑制作用，对ＣａＣｌ２累积量效曲线均呈非竞争性拮抗效应，ｐＤ＇２（拮抗多数）分别为３．９±０．１５和７．４５±０．１；１００μｍｏｌ／Ｌ蛇床子素和０．０８μｍｏｌ／Ｌ维拉帕米显著抑制缩宫素诱导依赖细胞内Ｃａ２＋收缩反应，对依赖细胞外Ｃａ２＋的收缩均无明显影响。提示蛇床子素对子宫平滑肌的抑制作用类似维拉帕米，与拮抗Ｃａ２＋有关，且主要通过抑制平滑肌细胞膜上电位依赖性Ｃａ２＋通道和影响胞内Ｃａ２＋释放所致。     

EFFECTS OF TOTAL SAPONINS OF PANAX NOTOGINSENG AND LIGUSTRAZINE ON THE PROLIFERATION OF CEREBRAL MICROVASCULAR ENDOTHELIAL CELLS OF RATS

Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ (ＥＣｓ)ｆｕｎｃｔｉｏｎａｓｔｈｅｂａｒｒｉｅｒｏｆｔｈｅｂｒａｉｎａｎｄｒｅｌａｔｅｔｏｔｈｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆｓｏｍｅｅｎｄｏ ｃｒｉｎｅｓ.Ｔｈｅｉｒｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎｉｓｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｃｅｒｅｂｒａｌｖａｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｓｅｓ[1] .ＤａｍａｇｅｔｏＥＣｓｉｓｔｈｅｆｉｒｓｔｓｉｇｎａｎｄａｂａ ｓｉｃｆａｃｔｏｒｏｆｃｅｒｅｂｒａｌｉｓｃｈｅｍｉａ .Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ ,…     

白细胞介素2诱生和检测的实验条件分析

本文对人外周血单个核细胞(PBMC)诱生白细胞介素2(IL-2)及用ConA 激活的小鼠脾细胞检测IL-2活性过程中的几个实验条件进行了摸索,发现1×10~6 PBMC/ml 经10ug ConA/ml 刺激48h 为诱生IL-2的最佳条件,检测IL-2活性的最佳条件是:2.5×10~4每孔检测细胞/0.1ml/与等量样品共同培养24h.作者认为,小鼠脾细胞经10ug ConA/ml 剌激48h 后.大部分转化为淋巴母细胞,适用于IL-2活性的检测,并具有一定的特异性和重复性。     

TGF-β1对成人骨髓CD105~+间充质干细胞增殖与分化的影响

目的分离并鉴定成人骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs),研究TGFβ1对骨髓MSCs增殖与分化的影响。方法分离成人骨髓单个核细胞;MACS磁珠分选CD105+细胞;FACS检测其免疫表型;诱导分选的CD105+细胞向脂肪及成骨细胞分化,油红O染色、VonKossa染色及RTPCR检测脂肪细胞及成骨细胞;观察TGFβ1对分选出的CD105+细胞分化与增殖的影响;免疫荧光染色检测诱导后的脂肪细胞CD105的表达情况;MTT法检测TGFβ1对CD105+细胞增殖的影响。结果成人骨髓来源的CD105+细胞体外可向脂肪及成骨细胞分化;在向脂肪细胞分化过程中,加入1～50ng/mLTGFβ1后,成脂诱导体系中无脂肪细胞出现;在向成骨诱导过程中,加入20ng/mLTGFβ1后,钙化基质沉淀明显降低;在脂肪诱导体系中,MTT染色检测显示TGFβ1对CD105+细胞的增殖有明显促进作用(P<0.05)。结论TGFβ1抑制成人骨髓源CD105+MSCs向脂肪及成骨细胞分化,在向脂肪诱导过程中,TGFβ1促进MSCs的增殖。     

武广客运专线隧道光面爆破施工技术

通过武广客运专线软弱围岩浅埋隧道的施工,总结了施工方法及施工经验,探讨了有关大断面围岩隧道光面爆破技术。     

Instabilities in imperfect thick cones subjected to axial compression and external pressure

The paper presents results of a numerical study into the buckling resistance of geometrically imperfect mild steel cones subjected to: (a) axial compression only, (b) lateral external pressure only, and (c) axial compression and external pressure acting simultaneously.Initial geometric imperfections are taken in the form of the eigenmode, `a single wave' extracted from the eigenmode and localized smooth dimple modelled analytically. Load carrying capacity of imperfect models is computed using the Finite Element proprietory code.Buckling strength of axially compressed and imperfect cone is only 55% of geometrically perfect model. Buckling strength of a cone subjected to lateral pressure, on the other hand, amounts to 43% of the corresponding value of perfect model. But it is the shrinkage of stability plot of imperfect cone which was found to be significant. For imperfect cones subjected to combined axial compression and external pressure, the collapse envelope shrinks by 48% with the elastic sub-set being reduced by 51%.     

特大断面硬岩隧道爆破开挖技术研究——以丰宁隧道Ⅱ级围岩段为例

为验证特大断面硬岩隧道爆破空孔布置形式及爆破参数选取的合理性,并解决现场试爆造成的危险系数增加和费用增高等问题。对丰宁隧道Ⅱ级围岩段采用ANSYS/LS-DYNA有限元模拟软件,模拟了中间空孔和四周空孔2种布置形式的直眼掏槽方案,分析爆破应力波传播规律及岩石破坏情况,确定前者为优选方案;利用光面爆破技术,确定周边眼合理参数;结合现场观测数据,评价爆破效果。证明"中间空孔布置的直眼掏槽+合理的爆破参数"设计是合理的,且数值模拟技术可有效降低成本,其研究成果可为类似工程提供参考。     

岑溪大隧道光面爆破设计及其应用

隧道光面爆破的好坏,对施工进度、质量、安全、工程成本有直接影响,只有光面爆破做得好,新奥法的施工优势才能更好地体现,围岩自身的承载力才能充分发挥。结合岑溪大隧道Ⅱ、Ⅲ类围岩光面爆破施工实际,对其光面爆破技术参数及管理措施进行介绍。