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1.
《西安交通大学学报(医学版)》2019,(3):459-464
目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。 相似文献
2.
设计了由组合式运算放大器构成的PD调节器,该调节器结构简单,调试方便,较好地解决了系统的快速性与稳定性问题。 相似文献
3.
未确知数的概念,运算及应用 总被引:5,自引:0,他引:5
从分析用实验表达客观事物数量关系所产生的缺陷出发,引入了未确知有理数和一般未确知数的概念,进而给出了它们的运算及其应用实例。 相似文献
4.
5.
Hu Xiaoyan Xu Changsheng 《武汉理工大学学报(交通科学与工程版)》2007,31(4):753-756
By analyzing the features of integrated supply chain management (SCM) and its environment, this paper puts forward the types of outsourcing under this environment and their functions for different type of outsourcing models. This paper also expresses the outsourcing operation model in the case of integrated SCM environment and the outsourcing management model based on CSCW. Through an operational example analysis and comparison, it can be seen that the modeling that is set up in this paper is feasible and effective. 相似文献
6.
刘先方 《武汉汽车工业大学学报》1996,18(6):64-67
分析用运算放大器组成正纺纱皮振荡电路的起振条件和输出电压幅值的调节及选频网络构成。由此引伸到运算放大器组成的信号发生器的实际应用,详细分析稳幅电路的作用和特点。 相似文献
7.
常规的交会定点方法对交会图形有一定的要求。本文讨论了边角同测的后方交会观测方法、计算原理和点位精度分析,并通过理论和实例验证了该方法的可行性。本文所述方法具有操作简便、选点灵活和不受交会图形限制等优点。 相似文献
8.
汽车电控系统的检测方法 总被引:5,自引:0,他引:5
汽车电控系统的基本组成包括传感器、电脑和执行器。电脑接收传感器输入的信号,经运算、分析、判断后,向执行器输出控制信号。 相似文献
9.
集结模式决定了货车集结过程的结束条件,定点集结是一种高效率的集结方式,有利于提高运输质量.针对放宽条件定点集结模式下编组站车辆集结过程,建立离散时间批到达批服务排队模型,利用嵌入式马尔可夫链方法求得离去时刻瞬时系统集结车辆队长分布,并求得任意时刻车辆集结队长分布,在此基础上分别分析了最小编成辆数,车组大小分布,车流到达强度,服务时间间隔分布对车辆平均集结队长,集结延误时间,效率,一昼夜发送车流量等系统指标的影响.分析结果表明,各因素对车辆集结排队系统影响明显.因此,利用本文提出的模型能为编组站的精细化管理和车流组织优化提供决策参考. 相似文献
10.
MatLab具有强大的符号运算功能.以平面梁单元刚度矩阵为例,详细介绍MatLab在单元刚度矩阵推导中的具体应用,编写了平面梁单元刚度符号运算程序,运算结果与手工推导完全一致,该方法可进一步推广到其它单元甚至到更复杂非线性单元刚度矩阵推导中. 相似文献