高效液相层析法测定人体血浆组胺水平

为了快速，敏感和特异地检测人体血浆组胺水平。方法应用高效液相层析技术探索Ｈｉ定量分析的最佳工作条件，并测定２２例正常人血浆Ｈｉ水平。流动相中甲醇与ＮａＨ２ＰＯ４比例为６０／４０，ｐＨ为５．１，层析柱温度为２０－３０℃时，Ｈｉ时０．５－５ｎｍ半，含量与峰面积呈正比，于９ｍｉｎ左右出峰。     

~(131)I-OIH肾图计算机处理计算分肾ERPF

采用核多功能仪及相应软件,在进行~(131)I—OIH肾图时直接计算分肾ERPF,并与心前区法所测总肾ERPF值对照分析。结果表明。在肾炎、泌尿系结石等疾患时,两种方法计算的总肾ERPF值基本一致,无明显差异(P>0.5)。肾图法计算分肾ERPF,简便、经济、不用抽血,并能在功能仪上一次完成常规肾图、总肾和分肾ERPF检测,易于临床推广应用。     

结肠癌血管的肾上腺素受体和内皮素受体

目的研究结肠癌患者癌动脉的收缩功能。方法取结肠癌癌患部位动脉、癌旁10 cm处动脉、非癌患者动脉,用动脉张力描记法记录血管活性物质收缩血管的量效曲线。结果去甲肾上腺素(NA)引起正常人结肠动脉的最大收缩(Emax)和最大收缩浓度的负对数(pD2)分别为(97±19)%和5.94±0.17;结肠癌动脉NA收缩的Emax和pD2明显低于癌旁动脉(P<0.01)和正常人结肠动脉(P<0.05)。ETB受体激动剂S6c在结肠动脉不引起收缩。ET-1对正常人结肠动脉收缩的Emax和pD2分别为(106±7)%和8.85±0.17;ET-1引起结肠癌动脉的Emax明显低于癌旁动脉(P<0.01);引起结肠癌动脉的pD2与癌旁动脉无明显差异(P>0.05)。结论α受体和ETA受体是结肠癌动脉的主要缩血管受体。     

创伤性脑血管痉挛与内皮素-1水平变化的关系

目的　探讨创伤性脑血管痉挛与内皮素 1 (ET 1 )水平变化的关系。方法　颅脑外伤患者于伤后不同时期 (伤后第 1d ,第 5d和第 1 4d)分别采集静脉血、脑脊液 ,采用放射免疫法测定ET - 1浓度 ,伤后第 5d用经颅多普勒超声 (TCD)观察脑血管痉挛发生与否。结果　血浆与脑脊液ET 1水平变化呈平行关系。脑血管痉挛患者血浆、脑脊液ET 1水平明显高于脑血管无痉挛者 ,脑血管痉挛程度越重 ,ET 1水平越高。结论　血浆与脑脊液中ET 1水平升高可引起脑血管痉挛     

高能冲击波致肾损伤的实验研究

目的　探讨高能冲击波致肾脏损伤的作用机制。方法　对 15只家兔进行体外冲击波碎石术 (ESWL) ,观察ESWL前后不同时间血和肾组织匀浆中内皮素 1(ET 1)、超氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛 (MDA)变化及肾组织病理学改变。结果　ESWL后血和肾组织匀浆中ET 1、MDA显著性升高 (P <0 .0 5 ) ,升高持续 1周。而血浆和肾组织匀浆中SOD显著性降低 (P <0 .0 5 )。病理检查出现不同程度肾损伤。结论　高能冲击波致肾脏损伤与自由基形成、内皮素升高引起肾血流下降有关。     

经皮冠状动脉成形术对冠状动脉内皮功能的影响

目的　了解冠心病患者冠状动脉血管内皮的功能状态以及普伐他汀对经皮冠状动脉成形术 (PTCA)术后血管内皮功能的影响。方法　冠心病患者 30例均经冠状动脉造影证实冠状动脉有单支或二支以上≥ 70 %狭窄。随机分成普伐他汀组和非普伐他汀组 ,测定其PTCA术后即刻、5、10、15、2 0min冠状静脉窦血以及同时相外周血中内皮素 (ET)及一氧化氮 (NO)含量并进行比较。结果　PTCA术后即刻、5、10、15、2 0min冠状静脉窦血中ET含量较同时相外周血中高 (P <0 .0 1) ;NO含量较同时相外周血中低 (P <0 .0 1)。PTCA术后普伐他汀组冠状静脉窦血及外周血中ET含量较非普伐他汀组同时相低 (P <0 .0 1) ;NO含量较非普伐他汀组同时相高 (P <0 .0 1)。结论　PTCA术后应用普伐他汀可改善冠状动脉内皮功能。     

氧化修饰的低密度脂蛋白对内皮细胞功能的影响

目的　观察OX LDL对内皮细胞NO、ET 1合成及细胞表面细胞间粘附分子 1(ICAM 1)表达的影响。方法　采用培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) ,在分别加入不同浓度OX LDL(5 0、10 0、15 0mg·L-1)孵育 2 4h ,或浓度为 10 0mg·L-1于不同时间 (12、2 4、36h)孵育后观察培养液中NO及ET 1水平及细胞表面ICAM 1的表达。结果　OX LDL可显著抑制NO的合成 (P <0 .0 5 ) ,但各时间段培养液中NO含量无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;OX LDL还可明显增加ET 1的分泌及诱导细胞表面ICAM 1的表达。结论　OX LDL对内皮细胞具有明显的细胞毒作用 ,它对NO、ET 1释放及ICAM 1表达的影响可能是其致动脉粥样硬化发生的重要机制。     

Rapid quantification of the metabolite of valacyclovir hydrochloride in human plasma by liquid chromatography-tandem mass spectrometry

Objective To establish a rapid, sensitive and selective liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method for the determination of acyclovir (the metabolite of valacyclovir hydrochloride) in human plasma. Methods After addition of ganciclovir as internal standard (IS), plasma samples were prepared by one-step protein precipitation using acetonitrile as precipitant, followed by an isocratic elution with 0.1% formic acid 3.5μm) column. Detection was performed on a triple-quadrupole mass spectrometer utilizing electrospray ionization (ESI) interface operating in positive ion and selected reaction monitoring (SRM) mode with the precursor to product ion transitions m/z 226.2→152.1 for acyclovir and m/z 256.2→152.1 for the IS. Results The analytical results demonstrated a good linearity over the ranges from 0.005 to 4μg/mL (r=0.9999) for valacyclovir hydrochloride. The relative standard deviations (RSD) of intra-batch and inter-batch were less than 4.06% and 9.23%, respectively. The limit of detection and lower limit of quantification in human plasma were 2ng/mL and 5ng/mL, respectively. Conclusion The method was simple, sensitive, accurate and reproducible and has been successfully applied to a bioequivalence study of valacyclovir hydrochloride capsules in Chinese healthy male volunteers.     

两种实时定量RT-PCR方法检测miRNAs表达的技术分析

目的比较两种实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测microRNAs(miRNAs)表达含量的技术差异,优化不同实验目的和条件下研究miRNAs表达的技术方法。方法取21d和42d两个时间点的SD大鼠关节软骨组织,采用Trizol法提取总RNA备用。选取rno-miR-15b、rno-miR-16、rno-miR-195、rno-miR-497作为研究对象,分别用茎环引物和试剂公司提供的试剂盒方法反转录总RNA,并应用实时定量PCR方法检测这些miRNAs的表达量。提取人血浆中总RNA,用上述两种RT-qPCR方法实时定量检测has-miR-16的表达量。结果两种方法检测这些miRNAs表达量,在大鼠21d和42d这两个时间点其表达量变化趋势相同,都呈现增高的趋势,这与我们前期Solexa测序结果相同。在血浆中的结果显示,其中茎环引物反转录方法灵敏度相对较高。结论茎环引物法在少量几个重要的miRNAs检测中具有优势,而试剂盒方法适用于大量miRNAs的筛查。     

血浆代用品——海脉素在骨科手术中的应用

目的 为证明海脉素在应用是一血浆代用品。方法 观察骨科择期手术中需要输血的大中手术２０例，出血量在１０００ｍｌ以下，术中静滴海脉素５００－１０００ｍｌ，均未予输血，结果 输入海脉素后能维持患者的血流动力学的基本稳定，手术前后血常规，血生化测定比较常虽有差异性，但各值均在正常范围之内，患者出现不良反应。结论 海脉素是一种安全、有铲、便利、快速的较理想的血浆代用品。