人PIF1及其截短体重组蛋白的真核表达及其细胞内定位

目的构建人PIF1及其C末端解螺旋酶模序(PIF1C)和N末端PINT结构域(PIF1N)截短体真核表达重组质粒,进行真核表达,并确定PIF1、PIF1C、PIF1N在细胞内定位。方法以HeLa cDNA为模板PCR获取PIF1、PIF1C、PIF1N编码区cDNA,将其插入pCMV-Tag 2B质粒中构建PIF1、PIF1C、PIF1N真核表达重组质粒;通过lipofectamine2000将重组质粒转染人293细胞中,Western blot方法检测其在真核细胞内的表达,用免疫荧光法检测其细胞内定位。结果成功构建了PIF1及其截短体真核表达重组体,并在真核细胞内成功表达。确定PIF1定位于核内,PIF1C定位于整个细胞,呈弥散分布,PIF1N主要定位于核内。结论在真核细胞中成功表达了PIF1、PIF1C、PIF1N,且发现PIF1N对PIF1的入核起重要作用,为进一步研究其PIF1及其各结构域奠定了实验基础。     

他克莫司对黑素细胞ICAM-1、MMP-2、MMP-9表达的影响

目的评价他克莫司对人表皮黑素细胞细胞间粘附分子-1(ICAM-1)及基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2、MMP-9)表达的影响。方法实验分为正常对照组和他克莫司(10、102、103、104 nmol/L)处理组,采用Q-RT-PCR和Western blotting方法检测不同浓度他克莫司对10ng/mL肿瘤坏死因子-α(TNF-α)预处理后黑素细胞ICAM-1表达的影响,及他克莫司对黑素细胞MMP-2、MMP-9表达的影响。结果与对照组相比,他克莫司(10、102、103、104 nmol/L)可抑制TNF-α诱导的黑素细胞ICAM-1的表达(P<0.05,P<0.01);他克莫司(10、102、103、104 nmol/L)可以促进黑素细胞MMP-2、MMP-9的表达(P<0.05,P<0.01)。结论他克莫司可能通过抑制ICAM-1表达及促进MMP-2、MMP-9的表达,减少免疫损伤及促进黑素细胞迁移,这可能是其临床有效治疗白癜风的机制之一。     

乳腺恶性肿瘤组织中Cyclin D_1的表达与临床病理相关性

目的　探讨细胞周期素D1 (CyclinD1 )在乳腺肿瘤组织中的表达及临床病理相关性。方法　采用免疫组化SP法检测 78例乳腺恶性肿瘤及 1 7例乳腺良性病变石蜡包埋标本CyclinD1 表达。结果　CyclinD1 在乳腺恶性肿瘤细胞核中呈棕黄色染色 ,于核边缘近核膜处浓集 ,阳性表达率 44.87% ,其中在导管内原位癌 (DCIS) 5 /7例及叶状囊肉瘤 1 /1例中阳性表达。CyclinD1 表达与患者雌激素受体 (ER)显著相关 (P <0 .0 5 ) ,而与年龄、病理类型、组织学分级、淋巴结状态、肿瘤大小等无关 (P >0 .0 5 )。生存分析资料显示CyclinD1 (+)、(- )两组 5年相对复发危险度 (RRR)u =1 .95 9(P >0 .0 5 ) ,Kaplan Meier生存曲线示两组 5年累积无复发生存期 (RFS)无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论　①CyclinD1 在乳腺癌发展初期即异常表达 ,有助于从分子水平鉴别原位癌与非典型增生 ,但其表达与肿瘤分化及恶性进展无关。②CyclinD1 表达与ER相关 ,可能有助于判断内分泌治疗敏感性。③CyclinD1 的表达与预后无关。     

RSV下呼吸道感染患儿辅助性T细胞亚群Th1/Th2及相关因子的研究

目的　探讨辅助性T淋巴细胞Th1 /Th2亚群及其相关细胞因子IFN γ、IL 4在呼吸道合胞病毒 (RSV)下呼吸道感染患儿发病机制中的作用。方法　用单克隆抗体双色免疫荧光FITC/PE双标记 ,流式细胞仪检测 3 0例RSV下呼吸道感染患儿急性期外周血单个核细胞(PBMCs)辅助性T淋巴细胞CD+4及其Th1亚群CD+4CD45RA+,Th2亚群CD+4CD45RO+的表达 ,并用ELISA方法同时检测患儿血清中细胞因子IFN γ、IL 4水平。同期检测 1 5例年龄、性别无差异的健康婴儿为对照。结果　RSV下呼吸道感染组患儿外周血辅助性T淋巴细胞CD+4明显低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,Th1细胞CD+4CD45RA+明显下降 (P <0 .0 5 ) ,Th2细胞CD+4CD45RO+虽有下降 ,但与对照组相比无统计学差异 (P >0 .0 5 )。Th1 /Th2比值与对照组相比明显降低 (P <0 .0 5 )。RSV下呼吸道感染组患儿血清中IFN γ、IL 4水平均有降低 ,以IFN γ水平下降最为明显 (P <0 .0 1 ) ,IFN γ/IL 4比值降低 (P <0 .0 5 )。结论　婴幼儿RSV下呼吸道感染急性期的免疫功能紊乱主要表现为Th1及其功能下降 ;Th2及其功能相对增强 ,Th1 /Th2的失衡是导致该病发生Th2样反应的重要免疫机制。     

IL-1β、TNF-α和NO水平变化在某些神经系统疾病中的意义

目的　探讨在高原条件下IL 1 β、TNF α及NO水平变化在某些神经系统疾病中的意义。方法　以多发性硬化 (MS)、格林 巴利综合症 (GBS)和帕金森氏病 (PD)患者为对象 ,用ELISA法测定血清及脑脊液中IL 1 β、TNF α和NO水平。结果　MS和GBS患者血清及脑脊液中的IL 1 β、TNF α及NO水平与对照组相比显著升高 (P <0 0 1 ) ;PD患者血清中该三种物质与对照组相比无明显变化 ,但脑脊液中的TNF α和NO明显高于对照组 (P <0 0 1 )。结论　提示IL 1 β、TNF α及NO在MS、GBS和PD发病机制中可能起着重要作用 ,它们之间也许存在一种网络调节关系。     

线性0—1规划模型的排序解法

针对0－1规划模型提出了一种新的解法,即排序法。它利用目标函数变量系数绝对值大小的相对关系,对无约束条件解进行排序,在最小解集中寻找最优解,以加快收敛速度。     

新能源汽车技术专业“1+X”课证融合思考

在《国家职业教育改革实施方案》当中,明确提出了开启"1+X"的证书制度,其主要目的是要利用把学历教育和技能培训进行有效融合,培养出符合时代需求的高素质技术技能人才。以新能源车技术专业作为实例,对"1+X"制度进行积极地探索,找到培养高品质应用型技术人才的新方式,从新能源汽车技术专业的课程内容、考核方式、师资力量等各方面进行探索,为"1+X"课证融合的有效开展寻找高效途径,从而提高人才的质量。     

基于G1法的海外铁路项目风险评价方法研究

为了提高海外铁路项目风险评估和项目管理水平,解决"一带一路"倡议下铁路"走出去"的技术难题,建立了海外铁路项目风险评价指标体系和多级评价模型.首先,根据层次分析法的原理,按照项目风险来源性质的不同,建立了由5个1级指标和15个2级指标组成的海外铁路项目风险评价指标体系;其次,利用G1法对专家关于指标重要程度的排序意见进...     

正紧算子刻划Banach格l_1

本文证明了Banach格E的一个正规化基{x_n}是格等价于l_1的自然基{e_n}的充要条件是每一Banach格F到E内的正紧算子T都有形如 Tx=∑x_n的表达式,其中∑a_n是F’中w~*-无条件收敛级数,且a_n≥0。一些相关的结果也略加讨论。     

DC1500V三轨工程应用关键技术探讨

广州地铁四号线正线采用DC1500V第三轨供电方式,车辆段采用DC1500V架空接触网供电方式,在车辆段出入段线设置网轨转换段。本文阐述了DC1500V第三轨供电系统安全性设计、跨距布置原则、端部弯头技术、网轨转换技术等工程应用关键问题,与国内同行共同探讨及研究。