先天性长QT综合征相关人类HERG基因真核表达载体的构建及其功能表达

目的构建先天性长QT综合征相关HERG基因的真核表达载体,观察其在真核细胞中的表达,建立稳定的细胞系,探讨基因的功能。方法原核克隆载体pGEM-HERG经限制性内切酶获得HERG cDNA,将HERG cDNA亚克隆到真核表达载体pcDNA3中,用Lipofectamin2000转染试剂介导将pcDNA3-HERG及荧光真核表达载体pRK5-GFP共转染至HEK-293细胞,利用G-418进行细胞筛选,并用稀释法建立稳定的HEK-HERG细胞系。用全细胞膜片钳技术检测HERG基因的功能表达情况。结果在原核克隆载体pGEM-HERG的基础上构建了HERG的真核表达载体pcDNA3-HERG,并使其在HEK-293细胞中成功表达,建立的HEK-HERG细胞系稳定传代。膜片钳技术检测到了HERG通道电流的表达。结论该方法可成功构建及表达HERG的真核表达载体,为今后突变型HERG的研究奠定了基础。     

龙舟史话

龙舟这一古老的为人们所喜闻乐见的交通工具，有其发展演变的历史，文章系统的揭示了这一过程。龙舟文化在新的历史时期，已经被赋予了新的内涵，成为发掘、弘扬中华优秀传统文化不可分割的重要的组成部分。     

通用腺伴随病毒载体的构建及表达报告基因GFP的实验研究

目的构建基因治疗通用型腺伴随病毒(AAV)载体并检测其转染外源基因作用。方法使用限制性内切酶切除pSSV9int质粒中的AAV病毒Rep和Cap基因元件后,插入了重组腺病毒专用穿梭质粒-pACCMVpLpA的含有CMV启动子、多克隆位点(MCS)和多聚腺苷酸信号(PolyA)的表达盒,构建了重组AAV通用载体质粒pSSHG-CMV。在该质粒MCS插入绿色荧光蛋白(GFP)基因后,使用pSSHG-CMV-GFP、GFP140和pAAV/Ad三种质粒共转染293包装细胞,制备GFP重组AAV。应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度,并将该病毒感染新生大鼠NIH3T3细胞,荧光显微镜观察GFP表达。结果重组AAV的滴度在浓缩前可达2×1011cfu/mL,浓缩后可达2×1013cfu/mL,表明成功地构建了重组AAV载体。插入外源基因GFP后,在包装病毒和辅助质粒的联合作用下,能产生具有感染性的重组AAV。感染了重组GFP-AAV的大鼠NIH3T3细胞表达了明显的GFP荧光。结论构建的重组AAV通用载体pSSHG-CMV可转染外源基因,这为进一步的基因治疗奠定了基础。     

浅析跨国营销环境中的社会文化因素

社会化环境中的教育水平、语言字、风俗习惯、价值观念、审美观念和宗教信仰等因素，在跨国营销活动中占有非常重要的地位。本从社会化因素方面入手，分析跨国市场营销中的常见现象，力求说明跨国营销企业只有科学、全面地分析掌握，使用决策中的可控因素去适应客观环境中的不可控因素．才能达到理想的营销目标。     

金龙客车捷冠3T 为旅游客运新时代而来

山东有美丽的自然景观、丰富的历史文化和鲜明的地方特色。这里历史文化厚重,自然山水奇绝,有东岳独秀的泰山,有天下第一的趵突泉,有风光独好的沂蒙山,还有景色迷人的浪漫海滨和水浒好汉的英雄传奇。绚丽多姿的山东,正吸引着越来越多中外游客。     

管理创新铸就企业未来——访华荣科技股份有限公司执行总裁李妙华

<正>2010年,华荣中标京沪高铁车站照明……2012年,华荣中标哈大高铁车站照明……2013年,华荣中标大西高铁车站照明……2014年,华荣中标沪昆铁路隧道照明……伴随着中国高速铁路建设的步伐,华荣以锐意进取的姿态,进入了高铁车站和站台照明领域,华荣照明在明亮高铁车站的同时,也照亮了自己。是什么让这样一家民营企业获得了高铁市场的入场券?华荣照明这颗伴随中国高铁飞速发展冉冉升起的新星,引起《中国铁路》杂志的关     

“心理契约”理论在和谐工会建设中的探索性应用

阐述了心理契约理论的内容,分析了心理契约理论的特点,提出了心理契约理论在工会活动中的应用方式.     

论中国传统文化对高职大学生人文素质教育的影响

对于加强大学生文化素质教育的必要性和紧迫性,社会各界已取得共识。在探寻开展大学生文化素质教育的方法与途径时,不少有识之士把目光投向了传统文化。中国传统文化源远流长,博大精深,是中华民族长期历史发展积淀的产物。通过中国传统文化的学习,能够增强大学生的民族自信心和自豪感,提高他们的审美情趣、塑造健康的人格和增强他们的创新思维能力,使其更好地适应社会发展的需要。     

京沪高速铁路济南西客站工程项目文化建设

针对京沪高速铁路济南西客站大型工程建设实际,通过大量调查研究,从项目文化研究的指导思想和总体目标入手,在确定项目文化研究方法及路径的基础上,系统地提出项目文化的主要内容,并对项目文化的特点进行阐述,对项目文化的实践和落实进行周密规划。     

体现我国铁路文化之"魂"的精神财富

“立足岗位、尽职尽责、无私奉献、勇于争先”的“毛泽东号”精神,“一点不差,差一点也不行”小东站精神,“一心扑在线路上,一丝不苟严要求,一分钱掰成两瓣花”的孙家工区精神,“为有牺牲多壮志、敢叫日月换新天”的成昆铁路精神,“挑战极限,勇创一流”的青藏铁路精神,折射出“自强不息,厚德载物”的大无畏气概,是我国铁路文化之“魂”,是广大铁路职工宝贵的精神财富。