用改良的荧光探针法测定外周血淋巴细胞膜流动性及其临床应用

用改良的荧光探针法测定外周血淋巴细胞膜流动性，此方法不需分离细胞膜，操作简便，灵敏度高，批内变异系数CV为0．9％。采用该方法对41例心力衰竭患者及20例正常人外周淋巴细胞膜流动性进行了测定，结果显示：心力衰竭患者外周淋巴细胞膜流动性P值为0．345±0．021，正常人为0．259±0．019，二者有显著差异（P＜0．05）；且发现外周淋巴细胞膜流动性改变与红细胞的改变一致，相关分析表明二者呈正相关（r=0．937，P＜0．05）。     

淫羊藿总黄酮对荷瘤小鼠细胞免疫及红细胞免疫功能的影响

为研究淫羊藿总黄酮对荷瘤小鼠细胞免疫及红细胞免疫功能的影响,检测了腹腔巨噬细胞吞噬功能、淋巴细胞转化率、红细胞Ｃ３ｂ受体花环率和免疫复合物花环率。结果表明,ＥＦＴ能显著增加荷瘤小鼠巨噬细胞吞噬功能、淋巴细胞转化率和脾体比值,能显著增加红细胞Ｃ３ｂ受体花环率并降低红细胞免疫复合物花环率。提示ＥＦＴ能增加荷瘤小鼠的细胞免疫功能和红细胞免疫功能,在一定程度上可以抑制肿瘤细胞的生长     

1,25-(OH)2D3及复方丹参对大鼠异基因骨髓移植后造血重建及T细胞亚群的影响

目的 观察1,25-(OH)2D3及丹参对异基因骨髓移植(Allo-BMT)后造血重建和T细胞亚群的影响.方法 受鼠随机分成4组:A组(急性移植物抗宿主病,即aGVHD组),B组(1,25-(OH)2D3组),C组(丹参组),D组(两药联合组).观察大鼠生存期、外周血象、aGVHD的临床表现及T细胞亚群.结果各药物干预组与aGVHD组相比,其aGVHD的发病时间延迟、aGVHD评分降低、平均生存时间明显延长,差异均有统计学意义(P<0.05);各药物干预组外周血象恢复较快,在各不同时间点的变化均高于aGVHD组,差异亦有统计学意义(P<0.05);经干预方案处理后,CD4+、CD8+的数值明显较aGVHD降低,以CD4+细胞下降明显,而aGVHD时二者均明显增加,CD4+/CD8+的比值增大,结论 1,25-(OH)2D3及复方丹参在异基因骨髓移植后对减轻aGVHD、促进造血重建及发挥免疫耐受有积极的作用.     

人骨髓间充质干细胞生物学特性及腺病毒介导的GFP标记

目的建立人骨髓间充质干细胞(hMSCs)分离、培养以及鉴定的方法,同时应用腺病毒介导的绿色荧光蛋白(Ad-GFP)检测细胞转染的效率。方法应用人淋巴细胞分离液(Ficoll)对hMSCs进行分离,经贴壁纯化后用MTT法检测增殖能力;并对其成骨、成脂、成平滑肌诱导分别进行碱性磷酸酶(ALP)、油红O染色及α-SMA免疫细胞化学检测;采用流式细胞仪(FCM)检测细胞表面标志的表达。用Ad-GFP转染,并应用荧光显微镜与FCM检测转染效率。结果 hMSCs镜下为成纤维样形态,约在第4天进入对数增长期;分化诱导后ALP染色、Von kossa银染、油红O染色以及α-SMA均为阳性;FCM检测CD14、CD31、CD45表达阴性,CD44、CD73、CD106及PDGFRβ表达阳性;当感染复数MOI=200,细胞培养48h时感染效率较高,FCM检测显示为99.81%。结论经过对增殖、分化能力以及表面标志的分析,证明用Ficoll可以分离得到较纯的hMSCs,Ad-GFP可以很好地感染细胞,为组织工程种子细胞的体内示踪提供了途径。     

巨噬细胞亚型在动脉粥样硬化过程中的作用及淋巴细胞对其亚型分化作用的影响

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发病机制一直是血管生物学研究领域的热点问题,在众多试图解释AS发病机制的学说中,"免疫炎症学说"受到了多数学者的肯定。免疫系统分为先天性和适应性免疫系统,二者都在动脉粥样硬化的形成和发展过程中发挥重要作用。巨噬细胞属于先天性免疫系统,其可塑性及多能性成为近期研究的热点。在不同环境影响下,巨噬细胞可分为M1型和M2型,一般认为M1型(经典活化型)为促炎亚型,分泌促炎因子,因此促进AS的进展;而M2型(替代活化型)为抗炎亚型,可以抑制促炎因子的产生,有可能延缓AS发展进程。不同亚型巨噬细胞作用不同,并且在一定条件下可以相互转化。B淋巴细胞和T淋巴细胞属于适应性免疫系统。实验已证实,先天性免疫细胞和适应性免疫细胞之间是可以相互作用的。本文主要介绍巨噬细胞不同亚型在动脉粥样硬化过程中发挥的不同作用,并着重介绍适应性免疫系统也即B淋巴细胞和T淋巴细胞对巨噬细胞亚型分化及转化的影响。     

慢性乙型肝炎患者外周血IL-17细胞因子水平及其临床意义

目的探讨外周血Th17的细胞因子IL-17在不同临床分型慢乙肝患者中的水平及临床意义。方法选取慢乙肝患者轻度30例、中度34例、重度29例、乙肝肝硬化38例、慢加急性肝衰竭21例,另外选取30例同期健康体检者为对照。检测各组外周血IL-17水平,同时检测肝功能及HBV DNA载量(对照组除外),并对各检测结果进行统计学分析。结果 1外周血IL-17水平在健康对照组及慢乙肝轻度、中度、重度和慢加急性肝衰竭组分别为(8.103±2.061)ng/mL、(25.551±7.078)ng/mL、(45.442±18.358)ng/mL、(75.378±19.05)ng/mL、(97.16±17.066)ng/mL,5组间及每两两比较差异有统计学意义(P<0.01);2健康对照组、乙肝肝硬化代偿组、乙肝肝硬化失代偿组外周血IL-17水平分别为(8.103±2.061)ng/mL、(34.517±8.905)ng/mL、(45.615±15.623)ng/mL,3组间及每两两比较差异均有统计学意义(P<0.01),且失代偿期组较代偿期组有所增高;3152例试验对象的外周血IL-17水平与ALT、AST、TBIL、HBV-DNA正相关;与血清PTA、ALB负相关;421例慢加急性肝衰竭患者e抗原阳性组与阴性组中外周血IL-17水平比较差异无统计学意义(P=0.654);5慢加急性肝衰竭患者外周血IL-17水平与MELD评分呈正相关(r=0.533,P=0.013)。结论慢性乙型肝炎患者外周血IL-17水平随炎症加重而升高,且可能对肝硬化、慢加急性肝衰竭的疾病进展有促进作用。     

萘乙酸对K562细胞和正常人外周血淋巴细胞遗传物质损伤效应的比较

目的比较萘乙酸(naphthalene acetic acid,NAA)对K562细胞和正常人外周血淋巴细胞染色体损伤效应的差异。方法常规方法制备姐妹染色单体互换(SCE)和微核,检测NAA对K562细胞与正常人外周血淋巴细胞SCE、微核形成率以及细胞分裂指数的影响。结果NAA可诱导K562细胞和人正常淋巴细胞微核形成和提高SCE频率,与对照组相比均存在显著性差异;NAA诱导K562细胞微核形成率和SCE频率绝对增长值高于正常淋巴细胞组。NAA显著抑制K562细胞和人正常淋巴细胞分裂指数,绝对抑制率也表现为K562细胞高于正常淋巴细胞。结论NAA具有诱导细胞染色体损伤的作用。     

ROLE OF PERIPHERAL LYMPHOCYTES SIALYL LEWIS（X） （CD15s） ANTIGEN BEFORE AND AFTER KIDNEY TRANSPLANTATION

Objective To investigate the role of peripheral lymphocytes Sialyl Lewis（x） （CD15s） antigen before and after kidney transplantation. Methods Flow cytometry technique was applied to examine the expression of peripheral lymphoid cell surface CD15s antigen after renal transplantation, and to evaluate various therapeutic regimen. Results The statistic analysis results of peripheral lymphoid cell surface CD15s antigen expression level showed that there was significant difference among the patients with acute rejection, long-term dialysis and with normal renal function post-transplant; significant difference of CD15s expression level between group of rejection and infection; no significant difference of CD15s expression among the different groups treated by various therapeutic regimens. Conclusion The different therapeutic regimen has no influence to CD15s expression; Detection of peripheral lymphoid cell surface CD15s antigen expression periodically, intelligently make convenience to understand suitable status of immunosuppression.     

扩张型心肌病外周血淋巴细胞亚群测定

为探讨扩张型心肌病（DCM）有无免疫调节缺陷，用准确可靠的流式细胞计数仅测定了20例DCM患者及24例冠心病（CHD）患者外周血CD4及CD8淋巴细胞。结果发现两组患者心功能相似，CD4淋巴细胞比较亦无显著差别，而DCM患者CD8细胞百分比明显低于CHD患者。认为CD8淋巴细胞可能在DCM发病中起一定作用。