慢病毒转染荧光蛋白EYFP-H148Q/I152L细胞模型的构建

目的构建稳定表达EYFP荧光蛋白的HeLa细胞作为阴离子(卤素)通道阻断剂筛选的细胞模型,为高通量筛选阴离子(卤素)通道阻断剂提供条件。方法通过基因重组技术构建表达YFP突变蛋白(EYFP-H148Q/I152L)和puromycin抗性的慢病毒载体。将慢病毒载体和包装质粒混合物转染包装细胞293T细胞产生慢病毒颗粒,感染HeLa细胞,进一步利用抗性基因对细胞进行puromycin筛选,纯化细胞并扩增至所需细胞量。采用实时定量PCR和Western blot方法检测目的基因EYFP-H148Q/I152L的表达效率。并验证EYFP-HeLa稳转细胞系作为卤族离子通道阻断剂筛选模型的活性。结果基因测序验证了目的基因成功插入慢病毒载体。RT-PCR和Western blot检测结果显示,目的基因在HeLa细胞中实现了过表达。荧光显微镜下观察到EYFP-HeLa稳转细胞株能够表达特有的EYFP黄色荧光,效率接近100%。碘离子(I-)(低渗)溶液刺激细胞阴离子(卤素)通道的开放,内流的I-能够使黄色荧光淬灭。结论构建的EYFP-HeLa细胞系能够稳定表达EYFP黄色荧光蛋白,对内流入细胞的I-敏感,可以作为理想的阴离子(卤素)通道阻断剂的筛选模型。     

基于修正引力模型的陇南市区域经济联系研究

陇南市作为陇东南区域经济、文化、商贸中心，是联结“丝绸之路经济带”与“长江经济带”战略新通道兰渝铁路经济带上的重要交通枢纽和节点城市。为了陇南市主动承接四大经济圈的辐射带动作用和甘肃省实现多级突破和向南开放提供理论研究，选取陇南周边24个城市作为研究区域，使用修正后的引力模型和断裂点模型，探讨高速公路、普速铁路、高速铁路综合交通方式影响下区域经济联系格局。得出结论：广元、成都、重庆对陇南市的吸引力最强，无论是引力模型方面还是断裂点模型方面，与陇南经济联系最紧密的是四川省。因此陇南市的首要发展方向是南方，首先应借助兰渝铁路开通带来的契机，积极参与共建南向通道；其次将兰州-重庆作为发展主轴，成都-西安作为发展次轴，向南开拓，向东前进，充分利用周边现有资源，深度融合发展，提高经济实力；再次陇东南地区应深度融合，确保要素资源顺畅流动和优化配置；同时完善区域内交通基础设施，推进武九高速、康望高速、天陇铁路的建设，确保南向通道货运班列常态化运行。     

水下航行器小通道内蒸汽冷凝换热计算分析

针对水下航行器用冷凝器的结构特性和使用环境,建立冷凝器中小通道内蒸汽冷凝换热过程的焓值模型,对流换热系数模型和压力模型。根据4种不同的换热系数计算式,求解对应关系式下的焓值、温度、压力和干度仿真值,并结合实验数据进行对比分析,得到在单相区采用D-B关联式,在两相区采用A-R关联式,计算的结果误差最小。并以此为基础,对小通道的截面尺寸进行计算分析,计算结果表明:当通道截面宽度为6 mm时,小通道具有较好的流动换热能力,为水下航行器的工程设计提供重要参考。     

上海沿江通道建设期间交通组织研究

沿江通道工程(江杨北路—牡丹江路)是上海市高速公路改扩建项目,将给大流量高负荷城市主通道交通运行带来较大影响.为了最大限度地保障高速公路快速通行能力,兼顾施工推进以及宝山区市民、企业出行和经济活动的正常进行,施工期间采取全过程多维度多方案的交通疏导措施,从项目规划阶段、工程设计阶段以及施工建设阶段全过程融入交通组织研究,通过改进施工流程和作业方法、优化货车出行路径和时序、改建高速公路出入口匝道等手段提高施工区域交通通行效率,并运用交通分析仿真软件辅助研究工作,使交通组织方案更合理、更高效.     

北方国际集装箱运价指数走势分新（2012年9月）

2012年9月天津航运指数下设的北方国际集装箱运价指数共发布21次（见图1）。受欧洲、地中海等航线运价大幅回落的影响，9月初至9月11日指数下跌幅度明显；9月12—17日，美西、南美西等航线运价略有上调，其他航线运价跌势依旧，指数整体跌幅收窄；9月24日，日本航线再次上调运价，带动指数微幅走高；此后，其他航线运价继续下行，指数回归下行通道。9月29日指数收于700．79点，比8月31日下跌78．32点，累计跌幅为10．05％。     

美国对中国太平洋航线安全的影响及中国的应对策略

国际上影响海上交通线安全的因素很多,如国际法因素、地区冲突因素、大国因素、海盗和海上恐怖主义等、非传统安全因素都会给中国和平利用海上航线和海上咽喉要道带来威胁和挑战。其中大国因素是指主要海洋国家对海上航线和战略通道实行垄断性和排他性控制,近年来对中国海上交通线特别是太平洋航线安全构成最大威胁的就是美国。     

深中通道沉管隧道沿线水沙环境特征研究

文章基于深中通道隧道沿线定点连续水流、含沙量同步监测资料,对隧道基槽沿线的水沙环境特征进行了研究。研究结果表明:(1)隧道基槽沿线潮流均呈往复运动,大潮流速较大、小潮流速较小,各站大小潮表层落潮流均较强,挖沙坑水域底部涨潮流较强,东滩及试挖槽水域底部落潮流较强;(2)隧道基槽沿线水域底部含沙量变化与流速变化密切相关,最大含沙量出现在涨、落急前后时刻,大潮时含沙量较高而小潮时含沙量较低。隧道基槽沿线底部含沙量,以挖沙坑水域最大,东滩水域次之,试挖槽水域最小;(3)隧道基槽沿线挖沙坑水域和东滩水域底部含沙量大于试挖槽附近,基槽开挖后挖沙坑水域和东滩水域的回淤强度会大于试挖槽附近。     

秦皇岛煤炭网开启煤炭电子商务新篇章

秦皇岛煤炭网（www．cqcoal．com）是秦皇岛海运煤炭交易市场信息咨询服务产品的发布载体和在线交易服务的交互通道,在同内外煤炭行业中已经形成了非常广泛的影响力。目前,河北港口集团已委托海运煤炭交易市场主导集团下属各港口网七营业厅规划、开发、运营维护工作。