新型冠状病毒肺炎的病理机制及治疗药物研究进展

新型冠状病毒肺炎已构成全球大流行.其病原体严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)传播力强,人群普遍易感.病毒通过细胞受体血管紧张素转换酶2进入靶细胞,经跨膜丝氨酸蛋白酶2激活棘突蛋白,可引起多器官损害.目前尚无特异性治疗药物,但已开展多项评估与研究.当前我国疫情得到有效控制,但境外感染人数迅速增加,境外疫...     

套式RT-PCR检测肾综合征出血热病毒方法的建立及应用

针对汉坦病毒（Ｈａｎｔａｎｖｉｒｕｓ,ＨＶ）中国代表株（Ａ９、Ｒ２２）Ｍ基因片段设计分型引物（Ⅰ、Ⅱ型）,采用改进的异硫氰酸胍酚一步法（胍酚法）提取汉坦病毒ＲＮＡ,套式ＲＴ－ＰＣＲ检测稀释病毒上清,模拟病人血清和２０例急性期（１～７ｄ）血清样本。结果：能检测到模拟血清中少至几个ＰＦＵ病毒ＲＮＡ,敏感性５～１０ｆｇ。检测过程可在５ｈ内完成。２０例急性期患者血清检测阳性率为１００％,并能进行临床分型。扩增产物经打点杂交证实其特异性。而正常及非ＨＦＲＳ患者血清结果均为阴性。提示：套式ＲＴ－ＰＣＲ基因诊断技术优于传统的ＭａｃＥＬＩＳＡ、ＩＦＡＴ和ＲＰＨＩ诊断法。     

哇巴因多克隆抗体对两肾一夹肾血管性高血压大鼠血流动力学的影响

为探讨哇巴因多克隆抗体的降压作用及哇巴因与高血压发病的关系 ,给“两肾一夹 +盐 ( 2 k1 c+盐 )”、“两肾一夹 ( 2 k1 c)”肾血管性高血压大鼠随机静注哇巴因多克隆抗体、硝普钠、正常兔免疫球蛋白 ( Ig G)及生理盐水 ,颈动脉插管观察注射后 3h内血压动态变化。结果表明 :哇巴因多克隆抗体对“两肾一夹 +盐”肾血管型高血压大鼠具有明显的降压作用 ,而对“两肾一夹”高血压模型降压作用不明显。正常兔免疫球蛋白对各种高血压模型均无降压作用。提示内源性哇巴因 ( EO)升高可能是高血压的发病因素之一 ;高盐引起血压升高的机制之一可能是通过刺激 EO的分泌增加。     

抗线粒体抗体在MELAS综合征患者骨骼肌中的表达及相关凋亡因子的作用

目的探讨线粒体脑肌病伴高乳酸血症和脑卒中样发作(MELAS)综合征患者骨骼肌中抗线粒体抗体(AMA)的表达情况及凋亡因子Bcl-2、Bax、P53的作用。方法收集经临床、肌肉病理活检确诊的MELAS患者10例,正常健康者3例及非线粒体相关肌病(进行性肌营养不良)患者5例作为对照组。所有肌肉组织活检标本均行AMA、Bcl-2、Bax、P53免疫组织化学染色。结果光镜下AMA免疫组化染色可见,MELAS综合征患者骨骼肌中有大量棕褐色肌纤维,与Gomori染色下的不整红边纤维(ragged red fibers,RRF)形态类似。Bcl-2在3组患者的小血管中均有表达,在MELAS组的RRF下表达明显。Bax和P53在3组患者中均未见表达。结论 AMA在MELAS患者骨骼肌中的阳性表达可作为诊断MELAS综合征的一个病理指标,且其表达可能与患者的病情轻重有关系;MELAS中存在凋亡相关因素的调节,Bcl-2起到保护作用。     

经熟地鳖甲煎剂含药血清培养的肾系膜细胞对成骨细胞增殖和分化的影响

目的研究经熟地鳖甲煎剂含药血清培养的肾小球系膜细胞培养上清液对成骨细胞的影响。方法采用细胞培养的方法,将成骨细胞分为正常血清组、系膜上清组、含药系膜上清组,分别在培养24、48、72、120h后应用MTT法检测各组成骨细胞的增殖情况;在72h后应用ELISA法检测上清液碱性磷酸酶(AKP)和骨桥蛋白(OPN)浓度。结果系膜上清组和含药系膜上清组的成骨细胞增殖显著高于正常血清组(P<0.05),而含药系膜上清组又高于系膜上清组(P<0.05)。系膜上清组和含药系膜上清组的AKP浓度显著高于正常血清组(P<0.05),含药系膜上清组又显著高于系膜上清组(P<0.05)。含药系膜上清组的OPN浓度要显著高于正常血清组(P<0.05)。结论肾系膜细胞可促进成骨细胞的增殖及功能,而熟地鳖甲煎剂能促进这一作用。本研究为中医"肾主骨"理论体系提供了新的实验方法及科学依据。     

基于数据库分析肾透明细胞癌中DLG5的表达及预后判定作用

目的通过研究DLG5(discs large homolog 5)在肾透明细胞癌(ccRCC)临床组织中的表达,阐明其对ccRCC诊断与预后的作用。方法结合癌症基因组图谱(TCGA)数据库与基因表达综合(GEO)数据库、免疫组织化学法分析DLG5在ccRCC组织与正常肾组织中的表达差异,运用LinkedOmics、GEPIA、String-DB等分析DLG5表达与ccRCC临床病理指标、预后的关系及与其可能发生相互作用的蛋白网络。结果 ccRCC中DLG5 mRNA表达高于正常组织,LinkedOmics网站分析发现,其高表达患者总生存率低于低表达者(P=2.997×10~(-5));DLG5表达随TNM分期等级升高而增加;DLG5与增殖细胞核抗原(PCNA)表达的相关系数R=0.19(P=1.1×10~(-6)),与RAD1表达的相关系数R=0.18(P=5.7×10~(-6)),均呈正相关。结论 DLG5高表达是ccRCC不良预后的指标,有望作为预测患者转移、复发、预后等的分子靶标。     

自拟归丹芪甲汤治疗内科杂病的临床体会

目的:总结归丹芪甲汤治疗内科杂病的经验.方法:运用归丹芪甲汤治疗下肢静脉血栓,肝硬化,布加综合症等病,每日1剂,水煎温服.结果:归丹芪甲汤对内科杂病治疗能改善症状,患者机体恢较快.结论:运用归丹芪甲汤治疗内科杂病有较好的疗效,可使患者免于手术之苦.     

MMP-9联合NT-proBNP在非ST段抬高急性冠脉综合征危险分层的研究

目的探讨N末端脑钠肽(NT-proBNP)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在非ST段抬高急性冠脉综合征(NSTEACS)危险分层、预后评估中的作用及相互关系。方法连续收入因胸闷、胸痛至我院心内科住院的NSTE-ACS患者共114例,按照GRACE评分分为高危、中危、低危组,另设正常对照组58例,酶联免疫吸附法测定MMP-9浓度,电化学发光法测定NT-proBNP浓度,Gensini积分表示冠脉病变程度,并对主要不良心脏事件(MACE)的发生情况进行随访6个月。结果 1MMP-9、lgNT-proBNP水平在各组间具有显著性差异(P<0.05);2ROC曲线分析显示lgNTproBNP水平可预测NSTE-ACS随访期MACE,其曲线下面积为0.795,截断值2.069,相应NT-proBNP值为116.56ng/L;MMP-9水平可预测NSTE-ACS随访期MACE,其曲线下面积为0.696,截断值32.49ng/mL;2项指标均异常预测MACE的灵敏度为80.41%,特异度为82.19%,正确诊断指数为0.63。3Cox回归分析显示,MMP-9及NTproBNP均异常与随访期MACE发生率独立相关,OR值为3.751。结论 MMP-9与NT-proBNP可以作为NSTEACS危险分层的血清学指标,二者联合应用可显著提高MACE的风险预测水平。     

PPAR-γ通过活化PTEN抑制肾间质成纤维细胞MMP2的活化

目的探讨激活的PPAR-γ是否通过活化PTEN抑制血小板源性生长因子(PDGF)刺激的肾间质成纤维细胞MMP2活化,从而介导肾间质纤维化的发生。方法以原代分离培养的小鼠肾间质成纤维细胞为研究对象,以肾间质纤维化的主要刺激因子PDGF-AA刺激细胞。于PDGF-AA刺激细胞前,分别予以罗格列酮激活PPAR-γ,PI3K、PTEN、PPAR-γ特异性抑制剂LY294002、bpV(Pic)、GW9662预处理细胞,检测AKT、PTEN、PPAR-γ、MMP2的活化水平。结果成功分离并培养小鼠肾间质成纤维细胞,并证实PDGF-AA可剂量依赖性激活MMP2,而对MMP9、TIMPs无影响。特异性抑制PI3K/AKT信号通路或激活PPAR-γ显著抑制PDGF-AA刺激的AKT、MMP2活性;抑制PTEN可逆转PPAR-γ激活对PDGF-AA诱导的AKT磷酸化及MMP2活性的影响。结论 PI3K/AKT信号通路特异性介导PDGF-AA诱导的肾间质成纤维细胞MMP2的活化;激活的PPAR-γ通过活化PTEN抑制PI3K/AKT信号通路进而抑制MMP2活化。     

肾综合征出血热患者血小板的超微结构与功能的关系

目的　探讨肾综合征出血热 (HFRS)患者早期循环中血小板超微结构与功能变化的关系。方法　动态检测 5 0例HFRS患者的血小板计数 (BPC ,直接试管法 )、血小板黏附率 (PAdT ,玻珠柱法 )、血小板聚集率 (PAgT ,比浊法 ) ,并运用透射电镜技术对 8例早期患者循环中血小板的超微结构进行观察。结果　HFRS患者早期即有大量血小板变性、空泡化、膜裂解、颗粒物质减少 ,在异常的血小板内可见到特征性的汉坦病毒颗粒 ;此外 ,HFRS病程各期血小板的数量和功能均有规律性的改变 ;自发热期 ,HFRS患者BPC、PAdT、PAgT逐渐降低 ,至低血压休克、少尿期 ,以上改变达顶峰 ,从多尿期开始逐渐恢复 ,至恢复期接近正常。对不同病型的患者 ,以上各指标有显著差异 (P <0 .0 1)。结论　HFRS早期病毒侵入与血小板超微结构、功能改变有其相关性。