Graves病自身免疫单链抗体库的构建及抗甲状腺单抗的筛选

目的　Graves病属于甲状腺自身免疫性疾病 (AITD) ,其患者血中存在多种抗甲状腺自身抗体 ,其中包括TGAb、TPOAb以及TRAb。单链抗体 (ScFv)是以连接肽将重链可变区基因 (VH)和轻链可变区基因 (VL)连接起来形成的单链小分子抗体。为了获得人源性抗甲状腺抗体 ,分析其基因结构 ,进一步研究AITD的发病机理 ,我们构建了人源性噬菌体ScFv库。方法　采取Graves病人静脉血 ,用淋巴细胞分层液按常规分离单个核细胞。提取淋巴细胞总RNA逆转录合成cDNA。分别扩增出全套的免疫球蛋白VL 链和VH 链基因 ,利用重叠PCR方法 ,构建ScFv基因。重组到 p3SCMH嗜菌粒中 ,电穿孔转化XL1 Blue大肠杆菌。经适当培养后 ,加入约 10 12 空斑形成单位 (PFU)的辅助噬菌体VCSM13,构建噬菌体抗体库。测定库容 ,鉴定重组率。以固相化的抗原对噬菌体ScFv库进行了 4轮“吸附 洗脱 扩增”的筛选 ,富集特异性噬菌体抗体。用ELISA竞争抑制实验检测富集的噬菌体抗体。结果　以单链cDNA为模板 ,用PCR方法分别扩增VL 链和VH 链的DNA。PCR产物经 15g·L-1琼脂糖电泳检测 ,分别在 380bp和 4 2 0bp左右见到扩增带。将VL 和VH 进行重叠PCR制备ScFv ,琼脂糖电泳显示PCR产物在 80 0bp左右有扩增带。将ScFv基因纯化 ,用SacⅠ+SpeⅠ双酶消化后 ,重组到 p3     

耒阳：资源枯竭型城市转型的样本

上世纪六十年代，已是制成品出口主要国家的荷兰发现天然气，于是政府大力发展天然气业，出口剧增，经济立现繁荣。可是，蓬勃发展的天然气业却严重打击了其他工业。十年后，当天然气开采接近尾声，政府不得不面对出口下滑，收入降低，失业人口陡升的局面。这种资源产业短期繁荣的后遗症，在国际上称之为“荷兰病”。     

不是汽车多了 而是城市病了

<正>在居民汽车保有量持续快速增长的情况下,我国能源、交通和空气质量压力不断加大,汽车成为解决环境和城市压力的重要应对之策。工业和信息化部去年年底发布的《2013年中国工业通信业运行报告》分析认为,2014年采取限购政策的城市恐将进一步增多。我们看到,城市人口正在膨胀、原油价格不断上涨以及气候变化问题在全球商业领袖们的议事日程上占据     

胎儿微嵌合体对Graves病动物模型制备的影响

目的 通过分析胎儿微嵌合体对Graves病(GD)动物模型制备的影响,探讨胎儿微嵌合体在产后GD发病中的机制.方法 应用重组人Ad-TSHR289免疫BABL/c小鼠制备GD模型,随机分组分别配对致妊娠中期或分娩结束后2周.HE 染色行甲状腺组织的病理学检查,Real-time PCR测定甲状腺内Y染色体特异性基因序列SRY.结果 GD动物模型的成功率在单纯免疫组为61.5%,免疫妊娠组为38.5%,免疫生育组为76.9%,三组间存在显著性差异(P<0.05).SRY基因的检出率在GD妊娠组中为84.6%,在妊娠对照组中为62.5%,两组间存在显著性差异(P<0.05).分娩结束后2周,SRY在GD生育组中仍有53.8%的检出率,显著高于生育对照组中的12.5%(P<0.05).并且,甲状腺内SRY基因的相对表达量在GD成模小鼠中较未成模小鼠显著升高(妊娠组:0.82±0.07 vs. 0.34±0.16;生育组:0.58±0.12 vs. 0,P<0.05).结论 胎儿微嵌合体在BABL/c雌鼠GD成功模型中检出几率较GD未成模者更高,SRY基因的相对表达量更高,提示胎儿微嵌合体可能参与了产后GD的发病.     

扁桃酸治疗小鼠急性弓形虫病后肝细胞超微结构的变化

目的　观察扁桃酸对急性弓形虫病小鼠肝细胞超微结构的影响。方法　扁桃酸 2 0 0mg/kg ,2次 /d,经口灌服或尾静脉注射治疗感染小鼠 ,于感染后 2 4h、72h和死亡后分别解剖小鼠 ,取肝脏制作电镜标本 ,设立扁桃酸阴性对照和乙胺嘧啶药物对照组。结果　弓形虫阳性对照组小鼠肝细胞肿胀 ,线粒体和内质网肿胀破裂 ,核膜迂曲 ,核固缩裂解 ,且破坏程度随感染时间延长而明显加重。扁桃酸两治疗组肝细胞破坏程度均明显轻于相应时期的阳性对照组。扁桃酸对肝细胞内弓形虫速殖子也有明显的杀伤作用。乙胺嘧啶虽能有效杀灭虫体 ,但同时破坏大量肝细胞。结论　扁桃酸能减轻弓形虫对肝细胞的破坏 ,且副作用少 ,优于乙胺嘧啶。扁桃酸是高效低毒的抗弓形虫药物     

胸壁刺激试验的临床应用价值

用胸壁刺激（ＣＷＳ）检查对１７０例永久性人工心脏起搏治疗患者进行了随访。结果：检出起搏器功能障碍者１１例（６．５％）。起搏治疗后自身心律改善者３２例（１８．８％）、恶化者１３例（７．９％）、稳定者１２５例（７３．５％）。检出起搏器依赖者２５例（１４．７％），属高危病人，随访的重点。表明ＣＷＳ检查是评价起搏器功能、揭示自身心律，筛选高危病人一项重要、甚至是唯一的方法，具有重要的实用价值。     

子宫腺肌病误诊原因分析

作者分析了７０例已确诊的子宫腺肌病的临床特点及误诊原因。认为过于重视典型的痛经症状及子宫均匀增大的体征，不进行经前经后对照的妇科检查是临床误诊的重要原因。提高＂Ｂ超＂的诊断水平也有助于提高诊断率。     

肺吸虫病神经系统损害的临床及脑电图

作者总结了20例肺吸虫病神经系统损害的临床及其脑电图变化,神经系统受损者占同期肺吸虫病的30.3%。同时具有肺部、及皮下或肌肉的结节,临床表现有头痛、偏瘫、失语、癫痫发作,蛛网膜下腔出血,多颅神经损害,截瘫等。脑损害者脑电图异常率高达95.45%,病变范围及异常程度不一,以脑实质受损者重,脑膜受损者较轻。局限性肉芽肿形成的脑电图显示局灶性异常,动态观察脑电图变化可推测其病变的转归,对判断病情及有无脑损害有一定价值。     

汽车节能减排要靠“两条腿走路”

汽车节能减排水平的背后,其实是在衡量产业竞争力的高低。美国汽车业为何衰退?我最近向欧盟汽车协会的专家请教,他用了大量的数据来对比欧盟国家汽车产业和美国汽车产业在竞争力的核心环节方面的差异,这个核心环节的差异在于节能减排的技术。他分析的结果是美国汽车产业的衰落不完全在于大企业病及成本高这些问题,而在于没有进行技术转型,没有抓住转型中带来的技术发展的机会,进而形成产业和企业的核心竞争力。     

21例Castleman病的临床病理特点

目的探讨Castleman病的临床表现、病理特点、治疗方法及转归。方法回顾性分析2001年1月～2012年10月在北京大学肿瘤医院诊断的21例Castleman病患者的临床与病理资料。结果患者中位年龄为38(16～68)岁。12例单中心型Castleman病中11例(91.7%)以透明血管型为病理类型;而9例多中心型Castleman病中5例(55.6%)表现为浆细胞型或混合型。单中心型患者中无1例有发热症状,而多中心型患者中4例(44.4%)有发热症状。21例患者均给予手术切除。12例单中心型患者术后均达到持续完全缓解。9例多中心型患者中仅有1例术后达到完全缓解,其余8例均接受了化疗,1例联合放疗。接受化疗的8例患者中1例完全缓解,2例疾病稳定,5例疾病进展。2例多中心型患者转化为淋巴瘤。中位随访46.2(12.2～138.7)个月,20例患者存活,1例转化为淋巴瘤的多中心型患者死亡。结论单中心型患者的手术治疗效果好,预后佳;多中心型患者可转化为淋巴瘤,预后差。