人促甲状腺激素受体A亚单位蛋白在昆虫细胞体系中的分泌性表达

目的 拟构建昆虫细胞分泌表达体系,在草地夜蛾卵巢细胞分泌性促甲状腺激素受体(thyroid stimulating hormone receptor, TSHR) A亚单位蛋白。方法 将TSHR A亚单位蛋白(22-289)和绿色荧光蛋白(green fluorescence protein, GFP)基因连接到质粒,并通过转化、蓝白斑筛选获得重组杆粒,将其转染入sf9昆虫细胞收获重组杆状病毒,扩增并测定滴度。最终通过蛋白印迹实验鉴定重组蛋白的表达并优化表达条件。结果 在蛋白表达体系的构建过程中,PCR鉴定和测序均证实了重组质粒和重组杆粒序列的正确性。将重组杆粒转染入细胞后观察到病毒出芽迹象,空斑实验鉴定P1代病毒的滴度为2×10⁷pfu/m。蛋白印迹显示重组蛋白分子质量为55 ku,主要在培养基中。蛋白表达的最佳感染复数(multiplicity of infection, MOI)为1,最佳感染时程为72 h。结论 本研究构建了TSHR A亚单位的昆虫细胞杆状病毒表达体系,该体系能够外泌性表达分子质量为55 ku左右的蛋白TSHR 22-289,且蛋白能够成功...     

TRPC6参与内质网应激诱导的肾小球系膜细胞凋亡

目的 探讨TRPC6离子通道在内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)诱导的肾小球系膜细胞(HBZY-1)凋亡中的作用及机制。方法 实验分为正常对照组(NC)、thapsigargin(TG)、TG+SKF96365和TG+TRPC6siRNA组。qRT-PCR和Western blot技术检测TRPC6和ERS相关蛋白(GRP78和Caspase12)的mRNA和蛋白表达。流式细胞术和Hoechst33258方法检测细胞凋亡。Fluo-4AM Ca²⁺成像技术测定细胞内Ca²⁺内流(intracellular calcium,[Ca²⁺]i)的变化情况。结果 TG组细胞出现核浓缩或核碎裂为特征的凋亡形态变化,细胞凋亡率增加。TRPC6和ERS相关蛋白(GRP78和Caspase12)的表达明显高于NC组(P<0.05)。SKF96365和TRPC6 siRNA预孵育HBZY-1细胞可减轻细胞凋亡(P<0.05)。TG刺激后[Ca²⁺]i也增加(P...     

克莱斯勒300C轿车动力传动系控制电路(一)

克莱斯勒300C轿车燃油和点火系统电路如图1-图11所示（图9-图11见下期）。     

制动系动态特性研究及仿真计算模型的辨识

以台架试验为基础,讨论了气液混合型制动系的动态特性,分析了其执行机构制动液压力建立随制动初始状态变化这一重要特征。根据系统辨识理论和制动系工作原理,建立了车辆制动系的仿真计算模型。试验数据与模型计算结果的分析对比表明,系统辨识是分析制动系动态特性的一种有效方法。     

纯电动汽车传动系参数匹配的研究

分析了纯电动汽车传动系参数的选择对电动汽车性能的影响,指出电动机额定功率/转矩必须与传动系参数相匹配,对电动汽车传动系传动比与挡位数的确定原则进行了探讨。以某一型号纯电动汽车为研究对象,分析了采用手动五挡变速器时两个挡位的驱动力图,提出去掉机械齿轮变速器而代之以固定速比的传动系是行之有效的,理论上可以提高传动系效率,减小能量消耗。     

R6汽油发动机的新技术

“高效动力”是宝马公司传动系研发部的开发目标。降低油耗、排放的同时又要提高动力性和行驶灵活性这是一对显而易见的矛盾．因此开发工作非常繁重。确定了开发目标．宝马公司着手开发研制一款全新的3.0L直列6缸汽油机-R6．目前为止．它是综合性最强的一款发动机。研究人员没有采用传统的增加发动机缸数的设计方法,而是重新开发．只保留了原来直列6缸的布置。     

奔驰车系技术通报

说明：到目前为止．奔驰轿车的行驶授权系统分六类：DAS1、DAS1a、DAS2（1995年起）、DAS2a（1996年起）、DAS2b（1996～1997年）、DAS3（1998年起）,其中1和1a是控制汽车的启动机,其他的是控制喷油器。除1外其他的都带有红外线接收装置（IFZ）,1a在门把手及后备箱,其他的接收器均在车内后视镜上,且有红绿两个指示灯,这两个灯有如下含义：     

多跨连续长系杆拱桥临时系杆设计及施工

绍兴市曹娥江袍江大桥是一座多跨连续长系杆中承式钢管混凝土拱桥,在施工阶段,须设置临时系杆平衡拱肋对各主墩的不平衡水平推力,整个上部结构加载程序复杂,施工难度大,应力控制困难。文章对大桥施工阶段的临时系杆设计及施工进行了较为详细的介绍,对今后同类桥梁施工可提供良好的经验参考。     

基于AM软件二次开发的船舶管系一体化设计

在现代船舶设计流程中,船舶管路设计主要分为初步设计、详细设计和生产设计等3个阶段,其中详细设计和生产设计是船舶管路设计中最重要的环节。基于对AM(Aveva Marine)软件的二次开发,对船舶管路系统详细设计阶段的二维原理图与生产设计阶段的三维模型之间的信息传递和空间转换进行研究。在船上的广泛区域内实现从“二维”到“三维”的信息传递和空间转换;在船舶设计过程中实现对船舶管路系统原理图和船舶管路系统设备信息的实时更新,并将其传递给三维模型。     

小整怡容广州本田思迪City

思迪City是泰国版的飞度Fit Saloon,相比广州本田早期在中国推出的版本要成熟了许多,工艺和用料都较上一代车型有明显进步。同时我们也再一次看到日系车在降成本上的超高水准。[编者按]