Preparation of recombinant firefly luciferase by a simple and rapid expression and purification method and its application in bacterial detection

A simple and rapid expression and purification method of recombinant firefly luciferase was developed for bacteria detection. A modified luciferase gene from North American firefly Photinus pyralis was cloned into pET28a expression vector and the recombinant protein was produced in Escherichia coli BL21. The recombinant luciferase, equipped with a polyhistidine affinity tag, was purified by immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC). The approach generated an abundant expression and an efficient purification of a recombinant luciferase with final yield 1.995mg/L of cell culture. Experiments on the recombinant luciferase also showed that the relative light units (RUL) of the enzyme were 5.8×108, and the specific activity was 2.9×1010 RLU/mg. By applying adenosine triphosphate (ATP) bioluminescence to detection of the coin bacteria using the recombinant protein, the ATP content of bacteria was 9.48×10-16mol/mL, and was identical to the bacteria counts (4500CFU/mL) in order of magnitude. Taken together, our results provided a simple and efficacious method of the preparation of recombinant luciferase, which could be applied in the determination of bacteria via ATP bioluminescence.     

熟悉的陌生人

俄国伟大的批评家别林斯基曾提出了创作上的一个境界追求——"熟悉的陌生人"。"熟悉的陌生人",化用在此,一言以蔽之:常谈常新。以常谈见新意,从浅处看奇崛,纵平实亦犀利,虽嬉笑也深邃,这就是我们所执迷的"熟悉的陌生人"——鲜明、独特、丰富、开放。惟有"熟悉的陌生人"一语,方能表达我们如此之多追求之万一。这里云集了业内高人的独家创见,处处进发出睿智的思想火花,传     

2013第11届中国（广州）国际汽车展览会

2013年是“新十年”的起点，中国汽车工业的发展正迎来新的转折点。不同以往汽车产销量的井喷式增长，我国汽车市场将进入缓速增长期，这将促使汽车工业的变革更加集中于行业资源的优化重组，产业整体质量的创新升级。     

浅论中国汽车企业的重组战略

本文通过对国内汽车企业环境和现状的分析 ,提出了汽车企业重组的五大战略     

浅谈“网运分离”铁路运输体制改革

本文分析了铁路现行管理体制的弊端，阐述了铁路运输体制改革的特点和难点，指出了“网运分离”是铁路运输管理体制改革的必然选择。以及需要把握的重点和关键。     

加强行业管理繁荣水运事业

在新世纪来临之际,我们迎来了共和国五十一周年华诞,衷心祝愿伟大的祖国在新世纪繁荣昌盛,人民生活幸福安康,也希望和广大航运界人士一道,把健康、繁荣、发展的航运事业带入二十一世纪,共同建设统一开放、竞争有序的航运市场。 建国五十年来,特别是实行改革开放,围绕以经济建设为中心以来,我国的经济建设和社会发展取得了世人瞩目的成就,水运基础设施建设和航运事     

中铁建电气化局集团第五工程有限公司

中铁建电气化局集团第五工程有限公司地处广西柳州市，于2005年12月15日成立，由原中铁二十五局柳州电务工程公司与中铁十五局电务工程公司六分公司重组而成。公司具有铁路电务工程专业承包一级、电信工程专业承包一级、铁路电气化工程专业承包二级、送变电工程专业承包二级、机电设备安装专业承包三级施工资质。主要从事铁路电气化、电力、通信信号、     

改革重组 转型发展推动中国铁物尽快走上健康发展道路

1 关于2013年总体评价和董事会工作情况2013年，公司认真贯彻党的十八大、中央经济工作会议精神以及国务院国资委各项决策部署，积极应对复杂多变的国内外经济形势，稳定拓展业务经营，提升夯实管理基础，探索谋划改革创新，保持了公司生产经营的稳定发展。     

悬崖勒马:日本三菱公司起死回生(一)

2007年10月,三菱公司宣布,连续第七个月在全球的产量增加,销售和利润进一步上升,意义重大,超过了2007/2008全部财政年度的预期.随着数年的剧变,三菱公司发出了明显的信号,最近三年结构重组计划进展良好;不过在全球化的现代汽车工业中是否可行尚属未知.三菱公司的第二个中期计划,由于要到2008年3月才宣布,是否能在未来持续发展呢?