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Objective It was reported that p53 apoptotic peptide (N37) could inhibit p73 gene through being bound with iASPP, which could induce tumor cell apoptosis. To further explore the function of N37, we constructed the cloning plasmid of DNA fragment encoding p53 (N37) apoptotic peptide by using DNA synthesis and molecular biology methods. Methods According to human p53 sequence from the GenBank database, the primer of p53(N37) gene was designed using Primer V7.0 software. The DNA fragment encoding p53 (N37) apoptotic peptide was amplified by using self-complementation polymerase chain reaction (PCR) method and cloned into the pGEM-T Easy vector. The constructed plasmid was confirmed by endonuclease analysis and sequencing. Results The insertion of objective DNA fragment was confirmed by plasmid DNA enzyme spectrum analysis, p53 (N37) gene was successfully synthesized chemically in vitro. The sequencing result of positive clone was completely identical to the human p53(N37) sequence in GenBank using BLAST software (http://www. ncbi. him. nih. gov/cgi-bin /BLASTn). Conclusion The cloning of DNA fragment encoding p53(N37) apoptotic peptide was constructed by using DNA synthesis and pGEM-T Easy cloning methods. With the constructed plasmid, we could further investigate the function of N37 peptide. 相似文献
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抗人γ-精浆蛋白V_H单域抗体/人p53四价功能域融合基因的构建及空间构象分析 总被引:2,自引:2,他引:0
目的 构建抗人γ 精浆蛋白 (γ Sm)重链可变区 (VH)单域抗体 /人 p5 3四价功能域融合基因 ,并进行空间构象分析。方法 选用人IgG3上游铰链区作为抗体和人p5 3四价功能域之间连接的linker。利用回归PCR法扩增人IgG3上游铰链区与人p5 3四价功能域融合基因 ,并在融合基因 5’端和 3’端引入SalⅠ与HindⅢ酶切位点 ,将融合基因克隆入 pUC1 9载体中构建pUC1 9/IgG3 /p5 3克隆载体。将抗人γ SmVH 单域抗体克隆入 pUC1 9/IgG3 /p5 3载体中 ,构建抗人γ SmVH 单域抗体 /人 p5 3四价功能域融合基因。经酶切鉴定及序列测定证实后 ,利用计算机软件进行空间构象分析。结果 获得了抗人γ SmVH 单域抗体 /人 p5 3四价功能域融合基因 ,基因全长 5 2 8bp ,可编码 1 76个氨基酸 ,与已发表的抗人γ SmVH 单域抗体、人IgG3上游铰链区和人p5 3四价功能域基因cDNA序列一致。计算机软件分析结果显示 ,融合基因表达产物可自动装配成四聚体抗体 ,并具有四条长的、柔性好的多肽 ,可确保每个抗体空间构象的独立性。结论 构建成功四价抗人γ SmVH 单域抗体 ,为进一步临床应用奠定基础。 相似文献
25.
目的 探讨p1 6蛋白和p53蛋白在乳腺癌中的表达及意义。方法 应用免疫组化ABC法检测了 74例乳腺癌 p1 6蛋白和p53蛋白的表达情况。结果 74例乳腺癌 p1 6蛋白阳性表达率43 2 % ;在不同组织学分级的乳腺癌中p1 6蛋白阳性率分别为Ⅰ级 1 1 1 % ,Ⅱ级 50 % ,Ⅲ级 44 8% ,其各组间差异无统计学意义 (P >0 0 5)。 74例乳腺癌p53蛋白的阳性率为 44 6% ;p53蛋白阳性表达与乳腺癌组织学分级明显相关 ,其阳性率分别为Ⅰ级 2 2 2 % ,Ⅱ级 30 6% ,Ⅲ级 69 0 % ,Ⅲ级明显高于Ⅰ级 (P <0 0 1 )和Ⅱ级 (P <0 0 1 )。乳腺癌 p1 6蛋白与p53蛋白表达之间无明显相关。结论 p1 6蛋白的失表达 ,突变型p53蛋白的过表达均与乳腺癌发生发展有关 ,它们通过不同途径发挥生物学作用 ,p53蛋白表达对评估乳腺癌的分化程度和判断预后具有一定价值。 相似文献
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ABSTRACTThis paper aims to develop an adaptation of the Tobin Q investment model for the shipping asset management in order to monitor valuation mismatch and bubble pricing of shipping assets. In this circumstance, the market prices of various shipping assets (e.g., Capesize or Panamax dry bulk carriers in different age profiles) are compared to the measured long-term asset value with second-hand ship prices. The mark-to-market prices of shipping assets are led by current market trends and freight rates, while the long-term asset value is estimated by using past data under certain assumptions (mean reversion, trend reversion). The discrepancy between market prices and the long-term nominal value of a shipping asset reflects any mispricing, which in turn sheds light on investment timing and market entry-exit decision. 相似文献
27.
Q460C高强钢材对接焊缝的低温力学性能试验 总被引:1,自引:0,他引:1
对我国目前研制的Q460C建筑高强钢材的焊接钢板进行低温拉伸试验,得到屈服强度fy、抗拉强度fu、断面收缩率ψ、断后伸长率δ、屈强比等力学性能随温度的变化规律,同时计算了Q460C焊接接头的温度敏感系数,并对断口进行了扫描电镜分析。研究结果表明:随温度下降,其抗拉强度和屈服强度均有所提高,但ψ和δ都有不同程度下降,并与其母材进行比较分析,表现出其力学性能低于母材,表明Q460C焊接钢材有较大的低温冷脆倾向;得到预测其低温下屈服强度、抗拉强度和屈强比的公式;在低温地区中使用高强结构钢材Q460C时要考虑低温冷脆。 相似文献
28.
应用抗P53单克隆抗体DO-1,采用免疫组化ABC法对50例肺癌组织中P53蛋白的表达进行检测并取25例远癌肺组织作为对照。结果显示肺癌组织中P53蛋白的表达明显高于对照组;P53蛋白的表达与肺癌的分级、分期无关而与淋巴结转移及预后显著相关。提示P53蛋白的异常表达与肿瘤的恶性转化有关,P53蛋白可作为肺癌预后估计的指标。 相似文献
29.
妊娠滋养细胞疾病P16和P53蛋白表达及意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨P1 6、P5 3基因产物在正常绒毛组织、葡萄胎、恶性葡萄胎 (恶葡 )、绒毛膜上皮癌 (绒癌 )中的表达与恶性程度及预后的关系。方法 采用SP免疫组织化学技术对正常绒毛组织、葡萄胎、恶葡、绒癌组织中的肿瘤抑制基因P1 6、P5 3蛋白表达进行检测。结果 正常绒毛组织、葡萄胎、恶葡、绒癌组织中P1 6蛋白阳性率分别为 1 0 0 % (1 0 /1 0 )、75 % (3 0 /40 )、41 .7% (5 /1 2 )、2 2 .2 % (2 /9)呈递减趋势。正常绒毛组织与葡萄胎之间以及葡萄胎、恶葡、绒癌之间差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;正常绒毛组织P5 3蛋白不表达 ,葡萄胎表达呈弱阳性 3 0 % (1 2 /40 ) ,恶葡为83 .3 % (1 0 /2 0 ) ,绒癌为 88.9% (8/9) ,显著高于正常绒毛组织和葡萄胎 (P <0 .0 5 )。正常绒毛、葡萄胎、恶葡和绒癌中P1 6和P5 3蛋白表达之间未见明显相关。结论 恶葡及绒癌组织中P1 6蛋白低表达和P5 3蛋白过表达均有促进肿瘤细胞增殖作用 ,与滋养叶细胞肿瘤恶性程度及预后有关 相似文献
30.
为准确掌握恶劣环境和列车荷载的共同作用下,青藏铁路混凝土桥梁的服役状态和病害发展,同时为类似条件下进行桥梁监测提供借鉴,针对青藏铁路沿线K973石灰沟特大桥的墩梁振动特性和既有病害的发展展开了长期监测。实践证明:现场太阳能供电和GSM/GPRS无线网络传输条件,基本可以支撑监测系统的正常工作;专门研发的现场数据采集分析设备和软件调控平台,能够适应高原高寒地区混凝土桥梁长期监测的需要,系统稳定、数据可靠。监测结果显示,石灰沟特大桥既有桥台前倾的病害发生并稳定后,对相邻梁体及桥墩的工作状态暂无不利影响。 相似文献