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目的通过菲律宾菌素III染色和脂质测定法,对胰岛素分泌囊泡双层脂膜中胆固醇的分布进行可视化与定量研究。方法利用胆固醇荧光探针菲律宾菌素Ⅲ标记稳定表达phogrin-GFP的MIN6细胞,对比细胞内游离胆固醇与胰岛素分泌囊泡的分布情况。通过连续蔗糖密度梯度离心法分离MIN6细胞中的胰岛素分泌囊泡,应用钼酸铵分光光度法和薄层分析法分别测定生物脂膜中磷脂和游离胆固醇含量,从而得到胆固醇所占比例。结果 MIN6细胞内菲律宾菌素III标记的游离胆固醇与胰岛素分泌囊泡在胞浆中的分布一致,主要聚集在核周及细胞膜下。此外,连续蔗糖密度梯度离心法分离胰岛素分泌囊泡层中富含胆固醇,该层游离胆固醇摩尔百分比为(48.62±3.28)mol%,高于其余各层的细胞器。结论本研究首次进行了胰岛素分泌囊泡双层脂膜中胆固醇的可视化与定量测定,发现胰岛素分泌囊泡富含胆固醇,为进一步研究胆固醇对胰岛素分泌囊泡形成的影响提供了理论基础和方法学依据。 相似文献
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悬臂施工时占用的空间较小,利于节省施工费用,降低工程造价,便于施工作业。闸墩上凸出的牛腿主要用来支撑弧形闸门,牛腿的施工一般是水闸工程中的一个十分关键的阶段,其拉筋计算也是个难题,计算的方法也较为复杂。该文主要基于某水库排淤泄洪闸工程,原定施工方案为在枯水期搭设钢管脚手架进行牛腿部位的施工,由于工程的设计变更,新的方案拟定在牛腿的下方预埋工字钢,从而保证在汛期闸室牛腿能继续施工,并且可以安全度汛。为此,针对该工程在设计变更后,对该排淤泄洪闸上的牛腿施工进行施工计算分析,可供同行参考。 相似文献
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针对京秦线181#桥上新型提速支座——YZM系列圆柱面钢支座由于施工原因造成的支座下摆严重倾斜,详细介绍了顶梁垫钢板以及捣垫干硬砂浆的施工方法。 相似文献
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