W基因组织表达的特异性

Ｗ基因是利用周转神经髓鞘蛋白ＰＭＰ－２２基因的编码区５’－及３’－序列引物，藉ＰＣＲ方法自人脑胶质瘤ｃＤＮＡ文库中扩增的一个基因片段，本实验研究Ｗ基因组织表达的特性性。方法搜集不同组织来源的肿瘤及正常脑组织标本，行ＲＴ－ＰＣＲ及ＲＮＡ斑点杂交检测。     

散发性帕金森病α—synuclein基因突变的检测

目的 探讨α－ｓｙｎｕｃｌｅｉｎ基因右突变与散发性帕金森病人的关系。方法 分离ＰＤ组和对照组的外围血基因组ＤＮＡ，采用α－ｓｙｎｕｃｌｅｉｎｘ基因特异引物对其第四外显子进行ＰＣＲ扩增，扩增产物用Ｔｓｐ４５Ⅰ酶切鉴定。结果 两组ＰＣＲ均可扩增出２１６ｂｐ的片段，ＰＣＲ产物不能被Ｔｓｐ４５Ⅰ酶切。结论α－ｓｙｎｕｃｌｅｉｎ基因已知点突变与散发性帕金森病可能无明确关系。     

自人脑胶质瘤cDNA文库克隆与鼠SH2—B同源基因片段

自人脑胶质瘤文库克隆新的表达序列标签。方法以人脑胶质瘤文库为模板,利用生长休止特异基因的５’特异引物与载体特异引物组合进行ＰＣＲ扩增,对目的片段进一步克隆,测序。结果扩增出一个３２８ｂｐ的片段,同源性分析发现该片段与鼠ＳＨ２－Ｂ有８６％的同源性。     

SSH法获取大鼠小脑特异表达cDNA片段

目的 获取大鼠小脑特异表达的ｃＤＮＡ序列,比较ＳＳＨ方法的特点。方法 以大鼠大脑和脑干ｍＲＮＡ逆转录ｃＤＮＡ作为ｄｒｉｖｅｒ（驱动）ｃＤＮＡ,大鼠小脑ｍＲＮＡ逆转录ｃＤＮＡ作为Ｔｅｓｔｅｒ（测试）ｃＤＮＡ,经抑制性消减杂交法,去除与大脑及脑干相同的ｃＤＮＡ,从而获得大鼠小脑特异表达基因。然后克隆制备成大鼠小脑特异表达ｃＤＮＡ文库。结果 经消减杂交、克隆,挑选出３２个阳性质粒。最后用反Ｎｏｒｔｈｅｒ