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幽门螺杆菌尿素通道蛋白基因UreI载体的构建、融合表达及纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
目的构建幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)尿素通道蛋白基因UreI的融合表达载体,并在E.coliBL21中表达,为进一步研究UreI的功能奠定基础。方法利用分子克隆技术以Hp DNA染色体为模板,扩增Hp UreI基因片段,将目的基因UreI与载体pET32a( )分别经kpnⅠ和HindⅢ双酶切,纯化,连接。筛选阳性重组载体,转化大肠杆菌BL21,以IPTG诱导表达pET32a( )/UreI融合蛋白。表达产物经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化后,用SDS-PAGE及Western blot分析。结果经酶切、测序分析表明,插入的基因片段为Hp UreI编码基因,由585 bp组成,与GenBank相应菌株HP AM417 609序列完全一致,无碱基突变。经SDS-PAGE分析显示重组质粒pET32a( )/UreI在原核细胞中得到了高效融合表达,其重组融合蛋白分子量为130 ku,经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化后,其纯度达95%以上,Western blot分析显示,该重组融合蛋白可被6-His鼠抗单克隆抗体所识别,具有良好的反应原性。结论成功地克隆和构建了原核表达载体pET32a( )/UreI,并在原核细胞中得到了高效融合表达。 相似文献
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基于MATLAB基础上的发动机万有特性曲线的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
发动机性能的好坏直接影响着整车运行的平顺性、安全性、稳定性等,要全面评价发动机性能,万有特性曲线则是一个很好的工具。万有特性曲线是以发动机转速为横坐标,以扭矩或平均有效压力为纵坐标,在坐标系内画出等燃油消耗率曲线和等功率曲线[1]。绘制万有特性曲线的方法有很多种,MATLAB语言是其中之一。本文利用强大的MATLAB绘图工具,绘制了发动机的万有特性曲线,经分析,该方法是一个有效的精确度较高的方法。 相似文献
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随着人们生活水平的提高,对住宅楼工程的质量要求越来越高。住宅楼工程的质量是个系统工程,其中成品防护是最后一道,也是最关键一道工序。目前,虽然人们已经认识到成品防护的重要性,但缺乏一整套成品防护办法和理念,急需从措施、制度和人员安排等多个方面齐抓共管,把工作落到实处。 相似文献
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随着社会的进步和经济的发展,人们越来越重视对资源环境的保护,环保节能理念逐渐深入人心,在建筑给排水设计领域亦不例外。在这样的大环境下,建筑给排水设计的专家学者们都在积极探索环保节能理念在该领域的应用。从环保节能理念应用于给排水设计中的必要性入手,详细阐述了节能环保理念在建筑给排水设计中的应用,并结合时代特点,对建筑给排水设计未来发展方向做出预测,以期为建筑给排水设计的快速健康发展做出贡献。 相似文献
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公交优先是城市公共交通的战略方针 总被引:8,自引:1,他引:8
经济的发展刺激了城市交通的发展,同时也给城市交通带来了巨大压力.交通拥堵日益严重,道路供需矛盾日益尖锐.在"人、车、路"交通管理三要素中,要想在有限的道路空间解决好车辆增加与道路畅通问题,仅靠传统的修路、扩路方法已不可能.交通的目的是实现人和物的移动,而不是车辆的移动,应当根据各种交通方式运送人和物的效率来分配道路空间的优先使用权.在解决人的出行问题上,无疑应大力发展大运量、高效率的交通方式,实行"公交优先". 相似文献
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为保证船用通信网络的安全,设计基于深度数据挖掘的船用通信网络异常行为分类和识别方法。该方法数据处理模块采用全局信息数据融合策略,融合网络的原始采集数据,特征选择模块通过平均不纯度减少特征重要度计算方法,选择有效特征并计算该特征重要度后,形成特征集,将其输入分类识别模块的内外卷积网络深度学习网络模型中,通过模型的学习和训练,获取船用通信网络异常行为分类识别结果。测试结果显示:该方法可有效删除其中的无效特征,保留有效特征结果;可获取不同类别有效特征标签的重要度评分结果;分类识别的平均绝对误差均低于0.18,可完成不同流量变化下异常行为分类识别。 相似文献
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3月12日,大连东北亚国际航运中心研究院在大连海事大学挂牌成立.此举对促进大连港航和现代物流业高质量发展,打造东北亚国际航运中心、国际物流中心,进一步提升城市功能具有重要意义. 相似文献
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采用盐硝混酸溶解试样,在适当的钼酸盐浓度下,磷、砷形成相应的杂多酸,用乙酸丁酯将磷钼酸选择性萃取后,再用甲基异丁酮萃取水相中的砷钼酸,并于有机相中以氯化亚锡—抗坏血酸将其还原为砷钼蓝。通过对试剂用量、干扰元素、加标回收、线性范围和准确度考察等试验,建立了铜合金中砷的测定分析方法。 相似文献