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传统的RT-PCR方法,要对模板RNA进行提取和纯化,以除去RNA酶和其它杂质,而且要对可能存在的RNA酶进行抑制,防止模板RNA被降解[1]。而在PCR扩增时,用一对引物反转录和扩增的特异性并不高,因此大都采用套式PCR,以获得特异性好的PCR产物。这就使得实验成本增高,耗费时间,同时也给SSCP分析带来很大不便。因为在进行PCR产物的SSCP分析时,产物的特异性要高,即电泳条带要窄、要亮,这样SSCP分析结果才可靠”’。我们采用改良的SIOZ吸附法从血清中提取HCVRNA,并用一对引物对HCVRNAC区进行RT-PCR扩增,获得了… 相似文献
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微量PCR法快速鉴定重组质粒郭晏海,赵君庸,苏成芝,闫小君,肖乐义(西安生物化学教研室西安710061)在分子生物学技术中,应用菌落原位杂交筛选目的基因的重组DNA,由于它敏感而且特异性较高,已逐渐成为一种较为普遍的方法。但是该方法费时而且步骤繁琐,... 相似文献
3.
本文应用反转录-聚合酶链反应成功的扩增了人谷胱甘肽过氧化物酶的互补脱氧核糖核酸(cDNA)。该法首先从人肝癌细胞中提取信使核糖核酸,在反转录酶的作用下生成cDNA,以此CDNA作为PCR的模板,利用人工合成的两个特异引物,进行35次循环的扩增。电泳结果表明,扩增片段的大小约为600 bp,与文献结果一致,为该酶基因的表达及生产奠定了基础。 相似文献
4.
建立了乙烷气相色谱测定法,并用该法检测了低硒大鼠胎肝细胞及肝组织体外培养液液面气体乙烷的含量,同时与加硒组作了比较。结果有显著差异,提示乙烷的含量是代表脂质过氧化的良好指标,有较高的推广应用价值。 相似文献
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传统的RT-PCR方法,要对模板RNA进行提取和纯化,以除去RNA酶和其它杂质,而且要对可能存在的RNA酶进行抑制,防止模板RNA被降解[1]。而在PCR扩增时,用一对引物反转录和扩增的特异性并不高,因此大都采用套式PCR,以获得特异性好的PCR产物。这就使得实验成本增高,耗费时间,同时也给SSCP分析带来很大不便。因为在进行PCR产物的SSCP分析时,产物的特异性要高,即电泳条带要窄、要亮,这样SSCP分析结果才可靠”’。我们采用改良的SIOZ吸附法从血清中提取HCVRNA,并用一对引物对HCVRNAC区进行RT-PCR扩增,获得了… 相似文献
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