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大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及GFP转染标记 总被引：7，自引：0，他引：7
目的建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离和培养方法,检测绿色荧光蛋白基因转染MSCs的瞬时表达及转染效率。方法应用Percoll密度梯度离心法分离大鼠MSCs,贴壁法不断纯化,流式细胞仪检测2代细胞表面CD34、CD71和CD90的表达,然后用pEGFP-N3与Lipofectamine 2000不同浓度比例转染MSCs,荧光倒置显微镜下观察瞬时表达及转染效率。结果①原代MSCs多呈纺锤形或梭形,有聚集生长的倾向,多3~5个细胞成为一个集落。传代后,细胞变为形态均一的排列有序的成纤维细胞样,长梭形,胞浆突起较少,胞体轮廓不甚清晰,胞体也相对较大;②GFP转染后24 h即可见绿色荧光蛋白表达,72 h表达最强,此后逐渐减弱,到4周时仍可见少量表达;③转染效率与质粒和脂质体的浓度比例有关,1∶2到1∶3最高。结论利用Percoll密度梯度离心法结合贴壁法可以获得比较纯的MSCs;GFP转染是一种较好的MSCs标记方法。 相似文献
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本文通过理论推导和试验数据研究,对舰船主照明网络采用交流220伏和110伏电压制的合理性进行了探讨。提出了舰船电力网络采用三相三线中点不接地系统的现状下,主照明网络采用传统的220伏电压制存在明显的不合理性。同时,还提出在客观网络电路完全相同的情况下,将原来按相平衡分布的单相灯具重新组合成三相灯具,即可显出一系列的优点,从而为舰船主照明网络供电质量的提高,展示了切实可行的途径。 相似文献
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一、前言船舶电网的母线和电缆是船舶神经系统,它的工作必须高度可靠,即使在三相短路(最危险的短路)的热效应和电动力效应下也能保持稳定,不允许出现弯曲、变形、折断和烧毁.随着船舶电站容量增加,船舶电网的短路电流也大幅度增加,短路引起母线弯曲和电缆 相似文献
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