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目的构建含人谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)基因的重组腺病毒载体,为基因治疗提供一种新的方法。方法从人血中分离出白细胞,提取总RNA,采用RT-PCR法获得人GPx-1和人GPx-2的全长cDNA,克隆到pcD-NA3.1+中,构建pcDNA3.1+GPx-1和pcDNA3.1+GPx-2载体,酶切和基因测序鉴定阳性克隆;采用酶切法把GPx-1和GPx-2基因克隆至入门载体pENTR1A中,构建pENTR1A-GPx-1和pENTR1A-GPx-2载体。采用LR反应,体外重组pENTR1A-GPx-1或pENTR1A-GPx-2和pAd/CMV/V5-DEST,得重组腺病毒表达载体pAd/CMV/V5-DEST-GPx-1和pAd/CMV/V5-DEST-GPx-2。PCR和序列测定鉴定重组腺病毒载体。293A细胞中包装和扩增GSH-Px-1和GSH-Px-2的重组腺病毒。结果获得GSH-Px-1和GSH-Px-2的重组腺病毒载体和重组腺病毒。结论成功构建了pAd/CMV/V5-DEST-GPx-1和pAd/CMV/V5-DEST-GPx-2重组腺病毒载体,并在293A中获得该重组腺病毒,为进一步研究人GSH-Px基因在基因治疗中的作用奠定了基础。 相似文献
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正"这次与领导的近距离对话,让我真真正正地看到了公交公司未来的希望。"这是唐山公交三公司一名理事代表在听了总经理刘东占在民主理事会上发言后发出的感慨。推行民主理事会制度是唐山公交推进基层民主协商的创新举措,也是监督基层管理工作的重要途径。通过民主理事会,建立基层职工与领导者的交流对话平台,了解职工需求,解决聚焦问题,促进企业发展。为此,唐山公交工会在2018年开始全面深入推行职工民主理事会工作。 相似文献
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通过实验介绍了一种基于神经网络的在线签名认证系统,总结了一组能够表现签名特征的特征向量,基于BP神经网络通建立模板,利用特征值进行笔迹识别,通过确定个性化阈值降低FR、FA错误率,并通过实验验证了本系统的可行性. 相似文献
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