鞘氨醇激酶1抑制剂联合5-FU对胃癌MGC-803细胞的作用及其机制

目的探讨鞘氨醇激酶1(SphK1)抑制剂二甲基鞘氨醇(DMS)与5-FU联用对胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法体外常规培养胃癌MGC-803细胞,采用MTT法检测不同浓度DMS和5-FU单药及两药联合对MGC-803细胞增殖的抑制情况;流式细胞术检测其细胞周期分布和凋亡率;Western blot法检测药物作用后MGC-803细胞中SphK1、TS、DPD、NF-κB p65和bcl-2蛋白表达的变化。结果不同浓度DMS和5-FU单药对MGC-803细胞的增殖均有抑制作用(P<0.05),且呈浓度和时间依赖性;两药联合对MGC-803细胞的增殖抑制作用显著高于DMS和5-FU单药组,差异具有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,DMS单药作用MGC-803细胞后其细胞周期的各期比例无明显变化(P>0.05);而不同浓度DMS和5-FU单药作用后MGC-803细胞的凋亡率显著增加(P<0.05),且两药联合凋亡率明显高于DMS和5-FU单药组(P<0.05)。DMS单药组和联合组SphK1、NF-κB p65和Bcl-2蛋白表达量均明显下调,而TS和DPD蛋白表达量无明显变化。结论 DMS能够抑制胃癌MGC-803细胞的增殖并诱导凋亡,与5-FU联用表现出良好的协同作用,其机制可能与SphK1、NF-κB p65、bcl-2蛋白表达下调相关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对乳腺癌MDA-MB-435s雌激素受体α的去甲基化作用

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)诱导人乳腺癌MDA-MB-435s细胞雌激素受体α(estrogen receptor,ERα)重新表达的可能性及机制。方法用EGCG诱导ERα阴性的人乳腺癌MDA-MB-435s细胞,应用Western blot法检测ERα蛋白表达情况,应用甲基化特异性PCR(MSP)法检测ERα基因启动子CpG岛的甲基化水平。以ERα阳性的人乳腺癌MCF-7细胞为阳性对照。结果 MDA-MB-435s细胞ERα基因启动子CpG岛处于高甲基化水平,经过EGCG诱导后,CpG岛高甲基化水平降低,出现去甲基化,ERα蛋白重新表达。结论 EGCG可能通过去甲基化作用逆转雌激素受体阴性的乳腺癌细胞雌激素受体的表达。