芳香硫酸酯酶定点饱和突变方案的比较

目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。     

石墨钢纤维碳纤维导电沥青混合料配合比优化

寒冷地区路面积雪结冰为公路安全运营构成极大威胁。研究以最佳方式快速、高效、无污染的方式清除路面冰雪,在沥青混合料中以一定比例掺入石墨、钢纤维及碳纤维等导电材料,通过室内对比试验确定各材料的最佳掺入量,实现提升沥青混合料导电性能,通过导电路面升温清除路表冰雪,在我国北方公路绿色环保清冰除雪、延长路面使用寿命方面具有一定参考意义。     

寒区冷补沥青混合料的制备与性能研究

冷补沥青混合料作为一种新型的路面修补材料,具有不受天气季节的限制、可随取随用、使用方法简单等特点。以东北地区养护工程为依托,用柴油、冷补填加剂、基质沥青制备冷补液,并将其与骨料拌和得到冷补沥青混合料。进行了不同配比的冷补沥青混合料粘附性、浸水马歇尔试验及冻融劈裂试验,结果表明:由74%基质沥青、24%柴油、2%添加剂组成的冷补液所制备的冷补沥青混合料具有较好的路用性能。     

半刚性基层沥青路面反射裂缝足尺试验研究

通过反射裂缝足尺试验来评价纤维增强沥青混合料和玻璃纤维土工格栅对抑制反射裂缝的效果，对抑制机理作了分析。试验证明，在普通沥青混合料中加入聚酯纤维以及使用改性沥青可使脆化点温度降低，增强低温抗裂性，加入聚酯纤维和在基层与面层之间铺设玻璃纤维格栅可有效抑制反射裂缝。     

沥青混合料的配合比设计

结合海南地区气候特点，通过对海南环岛高速公路进行的各种试验，详细介绍了沥青混合料级配的设计。     

旧水泥混凝土路面加铺沥青混凝土面层勘测设计

旧水泥混凝土路面加铺沥青混凝土面层，当没有路线设计资料时，需对旧有路线进行拟合，重新进行勘测设计，以获得与旧有路线一致的路线设计资料，为旧水泥混凝土路面加铺沥青混凝土面层提供设计依据。结合工程实践，介绍了拟合旧有路线时勘测设计的内容和方法。     

给自卸汽车车槽内自动喷油的装置

在公路工程施工中 ,需要用自卸车把沥青混凝土拌和站生产的沥青混凝土运输至摊铺现场。在自卸车装沥青混凝土前 ,需用柴油和水的混合液或肥皂水把图 1　原理图自卸车的车槽内壁润滑一遍 ,以便在自卸车向摊铺机内卸料时沥青混凝土不至于粘在车槽内壁上。以往需用民工爬上爬下用拖把醮柴油和水的混合液把车槽内壁擦一遍 ,劳动强度很大。为了解决这个问题 ,我们设计制作了一种装置 ,其原理见图 1。它的两个喷油嘴安装在沥青混凝土拌和站主机楼一层下面如图 2所示 ,两个喷油嘴之间的图 2　安装位置距离可以根据车槽的宽度进行调整。该装置的使用…     

沥青混凝土质量的生产控制—太祁高速公路路面工程体会

从原材料进场控制，生产设备的选择，拌合站生产控制以及沥青混凝土的运输等作了较详细介绍。