芳香硫酸酯酶定点饱和突变方案的比较

目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。     

德国推出能发出“芳香警报”的摩托车头盔材料

<正>近日,德国弗劳恩霍夫协会的科研人员研制出一种新型摩托车头盔材料,它在受压产生肉眼无法观察到的细微裂纹后会散发出香味,提醒更换头盔。弗劳恩霍夫协会发表的公报显示,该协会旗下的材料力学研究所和环境、     

沥青结合料紫外老化机理

为了解决现有沥青结合料路用性能评价体系中,未考虑紫外线辐射对沥青的加速老化作用问题,对热老化和紫外老化后的5种沥青进行了对比试验、DSR和BBR试验以及红外光谱分析.试验结果表明:沥青对热老化和紫外线辐射的敏感度不同,2种老化后三大指标的排序并不一致;紫外老化和热老化对沥青的影响不相同,紫外老化后沥青的流变特性变化更为显著;沥青抗紫外老化性能不同的内在原因是老化反应程度不同,胶质和芳香分是影响沥青紫外老化的主要因素.因此,沥青的热老化评价结果不能反映其抗紫外老化性能的高低,在紫外线辐射强烈的西部地区开展紫外老化研究具有重要意义.     

四味芳香开窍药的挥发性成分对缺血缺氧PC12细胞及细胞内Ca2+的影响

目的研究四味芳香开窍药的挥发性成分对连二亚硫酸钠(Na2S2O4)致PC12细胞缺血缺氧损伤及细胞内Ca2+的影响。方法体外实验采用5mmol/L的Na2S2O4导致PC12细胞缺血缺氧性损伤,然后观测细胞形态;用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)比色法,考察水蒸汽蒸馏法提取的麝香、苏合香、安息香挥发性成分及冰片对缺血缺氧PC12细胞活性的影响;并按照试剂盒要求测定模型细胞内Ca2+的含量。结果麝香4、8、16μg/mL,冰片8、16μg/mL,苏合香20、40μg/mL及安息香16μg/mL组均能显著升高模型细胞的吸光度(A)值(P<0.05,P<0.01),显著抑制Na2S2O4对PC12细胞的损伤;苏合香40、80μg/mL,安息香4、8、16μg/mL组均能显著降低模型细胞内Ca2+含量(P<0.05,P<0.01);麝香、冰片有降低模型细胞内Ca2+含量的趋势。结论麝香、苏合香、安息香的挥发性成分及冰片均有保护缺血缺氧PC12细胞的作用,其机制可能与降低细胞内Ca2+的含量,防止钙超载有关。     

GWM HAVAL H6 陈酿

喜欢喝酒的人都知道,新酒有辛辣味,需要贮存才能使其醇厚芳香。造车也一样,需要经过长时间的经验积累,才能制造出质量可靠、值得信赖的产品,哈弗H6就是最好的例子。     

Preparation and characterization of polysulfonamide statistical copolymers from three aromatic diamines

Various polysulfonamide(PSA) statistical copolymers were synthesized by polycondensation of three aromatic diamines and terephthaloyl chloride.The inherent viscosities of the resulting PSA copolymers range from 1.54 to 1.66 dL/g.The precipitated PSA copolymers with feed content of p-phenylene diamine(PPD) being less than 50%(mole fraction) can be redissolved in N-methyl-2-pryrrolidone(NMP) or N,N-dimethylacetamide(DMAc) with lithium chloride of wLiCl=0.02.All of the PSA copolymers exhibit enhanced tensile s...     

闻香识轮胎

经过实际使用，世界首款芳香轮胎切实给人们带来了芳香的感受，并且展示出良好的使用性能[编者按]     

嗜酒误事车难安

关于酒的来源,一说始于夏初大禹时代的仪狄,有4000年的历史;一说始于周朝的杜康,也有3000年的历史了。因其有纯净透明、芳香浓郁、甘美醇和、落喉爽净、回味悠长等神奇功效,自古以来就倍受推崇。既有将士出征前的豪饮壮志,也有凯旋后的酒欢高歌;既有文人雅士的以酒论文、以文会友,也有月下花前的对酒当歌,共把衷肠倾诉。发展到今天,更是到了极致,不仅品种、数量繁多,而且把酒推向了更为广阔的天地:朋友聚会喝、红白喜事喝、迎来送往喝、托人办事喝、养生保健喝、自我烦闷喝,甚至开车的人也喝。酒的发明和它本身并没有什么过错,问题在于:酒有…     

动静两相宜

有人爱芳香四溢的春天,有人爱硕果累累的秋天,有人爱那雪花飞舞的冬天。我却独爱多姿多彩的夏天。虽然夏日是炎热的,天公好像发烧了,气温竟达35℃以上!太阳似火球一般,炙烤着大地,空气闷热,地面滚烫滚烫。都市里繁忙的车友们都想借着假日找个休闲的地方避暑,     

高芳香分含量沥青路面热再生剂再生效果评价研究

介绍了制备高芳香分含量的热再生剂,并通过新、旧集料区分拌和法研究了热再生剂对回收沥青路面材料中旧沥青的再生效果。试验结果表明,高芳香分含量再生剂的再生效果显著,在回收沥青路面材料中添加旧沥青数量的15%时能较好地恢复旧沥青的性能。添加再生剂区分拌和后,新集料表面转移得到较多的再生沥青,再生沥青在新、旧料表面分布均匀。首次对区分后的新、旧集料表面沥青采用四组分法进行分析,结果表明新、旧集料表面的四组分构成相近,说明在拌和过程中热再生剂充分发挥了再生、重新分布旧沥青的作用。