抗鸭乙肝病毒core蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

目的制备抗鸭乙肝病毒core蛋白的单克隆抗体并进行鉴定。方法 PCR扩增鸭乙肝病毒(DHBV)core基因片段,构建表达载体pET28a(+)/DHBV core。转化诱导表达融合蛋白,用Ni 2+亲和柱纯化目的蛋白。免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选,采用有限稀释法筛选单克隆杂交瘤细胞并进行细胞克隆。体内诱生法大量制备单克隆抗体,进行抗体的特异性、效价和亚型的鉴定。结果成功构建表达载体pET28a(+)/DHBV core,并表达DHBV core蛋白。获得2株稳定分泌抗DHBV core抗体的杂交瘤细胞株,分别为2D7和5G10,细胞培养液抗体效价为1∶400和1∶800。选择5G10细胞株制备单克隆抗体,小鼠腹水抗体效价可达1∶320 000。鸭肝组织免疫组化结果显示,DHBV病毒载量>1010copies/mg的肝组织中DHBV core蛋白的表达明显高于病毒载量<105copies/mg的肝组织,而未感染DHBV的鸭肝细胞内不表达DHBV core蛋白。亚型鉴定结果为IgG2aκ链。结论制备并获得了抗DHBV core蛋白的单克隆抗体,为DHBV core蛋白的功能研究、诊断试剂的研制与抗病毒治疗研究奠定了基础。     

HBeAg特异免疫复合物检测及临床意义

采用单克隆抗－ＨＢｅ固相ＥＬＩＳＡ法检测１１８例ＨＢＶ感染者血清中ＨＢｅＡｇ特异免疫复合物（ＨＢｅＡｇ／ＩＣ），结果表明∶ＨＢｅＡｇ／ＩＣ与ＨＢＶ复制相关，可作为ＨＢＶ复制的一种血清学标志，ＨＢｅＡｇ阴性、ＨＢＶＤＮＡ阳性者中，６２．２％患者ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性，提示ＨＢｅＡｇ／ＩＣ的形成致使夹心法不能检出ＨＢｅＡｇ，这类患者仍可以是ＨＢＶ野毒株感染，并非均为ＨＢｅＡｇ缺陷变异株感染；ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性血清ＡＬＴ异常率明显高于ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阴性血清（Ｐ＜０．０１），提示ＨＢｅＡｇ／ＩＣ存在与肝损伤有关。     

河南某高职院校2007级新生HBsAg携带情况及心理护理

目的：研究某高职院校新生中乙肝病毒携带者（AsC）的阳性率、引起HBsAg阳性相关因素、乙肝病毒携带者（AsC）的心理健康状况，为制定相应的健康教育指导提供依据…，以便采取有效的心理护理措施，减轻HBAg携带者的心理负担。方法：采用酶联免疫试验对2007级康复校区696人检测HBsAg，对乙肝病毒携带者（AsC）进行心理恐惧情况及家长分布特点问卷调查。结果：2007级新生HBsAg阳性率9．48％；HBsAg携带率的高低与家长职业、性别无关，与家庭住址有关；AsC的心理健康状况较差。结论：2007级新生中HBsAg阳性率较高，AsC心理健康状况比较差。应加强乙肝疫苗的接种及对卫生医疗机构医疗器械消毒效果的管理，切断医源性传播，降低HBsAg阳性率；对学生进行乙肝防治知识宣教，消除对AsC的歧视，对AsC开展有针对性的心理健康指导，建立保健意识，促进身心健康[1]。     

138例重型乙型病毒性肝炎的临床特征分析

目的探讨重型乙型病毒性肝炎发生的相关影响因素。方法选择2008年1月至2010年7月我院收治的重型乙型肝炎患者138例,收集病历资料,统计分析其临床特征。结果在138例重型乙肝患者中,男性111例,占80.43%;26～45岁71例,占51.45%;慢性重型者132例,占95.65%,有肝硬化者97例,占70.29%;未曾进行过抗病毒治疗者103例,占74.64%,仅16例曾进行过规律的抗病毒治疗,占11.59%;HBV-DNA阳性(大于1×103 IU/mL)患者115例,占83.33%。结论积极规律的抗病毒治疗,有效地控制病毒,减少和避免乙型病毒性肝炎慢性化及肝硬化的发生是减少重型乙肝发生的关键。     

干扰素治疗乙型肝炎对照研究

采用精制人白细胞干扰素治疗乙型肝炎进行对照研究，结果表明，治疗组ＨＢｓＡｇ清除率（１０．５２％，４／３９），ＨＢＶＤＮＡ转阴率（４１．９３％，１３／３１）、ＨＢｅＡｇ转阴率（４５．９４％、１７／３７）明显高于对照组（３．６０％，９．９０％１６．００％），Ｐ＜０．０５，证实干扰素具有清除乙肝病毒，抑制其复制活性作用。     

HGV与HBV、HCA重叠感染病例的研究

探讨庚肝病毒 ( HGV)与 HBV、HCV重叠感染状况。方法　采用套式逆转录聚合酶链反应 ( RT- n PCR)技术检测了 2 2例乙肝病毒感染者及 48例丙肝病毒感染者血清 HGVRNA。结果　 HGV与 HBV、HCV重叠感染率分别为 31 .8% ( 7/ 2 2 )、31 .3% ( 1 5/ 48) ,重叠感染病例与单纯 HBV、HCV感染者在 ALT、SBIL水平及疾病的临床分型上无统计学差异。结论　HGV与 HBV、HCV重叠感染的几率均等 ,HGV似不加重乙肝及丙肝患者的病情     

HBV preS1基因酵母表达载体的构建及表达

目的 构建HBV preS1基因的酵母表达载体,探讨HBV preS1蛋白的功能.方法 以HBV ayw亚型全长质粒PCP10为模板,聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增HBV preS1基因,克隆到pGEM-T载体中命名为T-preS1,以NcoⅠ和MluⅠ双酶切T-preS1后回收与酵母表达载体pSos连接,对重组质粒进行序列测定后命名为pSos-preS1,经醋酸锂法将其转化酵母菌cdc25(a),提取酵母蛋白质进行Western免疫印迹分析.结果 成功构建了HBV preS1基因的酵母表达载体,Western免疫印迹分析显示HBV preS1基因在酵母细胞中正确表达.结论 pSos-preS1的构建为通过SOS招募系统(sos-recruitment system, SRS)筛选与HBV preS1蛋白相互作用的蛋白和进一步探讨HBV preS1蛋白在HBV致病中的作用奠定了基础.     

筛选天然药物

探索生物学作用机制和小分子物质药理学活性的范例己经在过去的10到15年之间发生了重大的改变。以往采用动物模型评价几十种或几百种化合物的方法，已经疲针对祷定靶点或细胞的模型，来筛选成千乃至上百万种化合物的方法所替代。美国大型制药企业．生物技术公司和公共基金资助的国立卫生研究院都在高通量筛选技术（HTS）上投入大量资金用于鉴定与蛋白质、受体、脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）相互作用的分子。     

200例国人DNA纹印基因频率分布—D2S44及D17S79位点的DNA多态性

DNA 纹印具有高度多态性,是解决个体识别及亲子鉴定等问题的最新技术.本文利用此项技术,研究了200名国人的D2S44及D17S79二位点的等位基因频率分布.结果发现D2S44位点片段带大小变异数为29,其中可检出两个等位基因团.一在7.7和9.1kb 之间,最常见于8.0kb,另一在9.8和14.1kb 之间,最大频率在11.1kb,占17.25%。D17S79位点片段带大小变异数为27,等位基因团在约4kb大小的范围内,最大频率在3.4kb,占29.55%.与国外报道结果相比,显示种族差异.     

母亲HBsAg／抗－HBs状态与新生儿先天畸形关系的前瞻性研究

关于乙肝病毒感染与先天畸形关系的研究多着眼于病毒本身及其抗原。作者在回顾性研究中发现抗－ＨＢｓ可能与先天畸形发生有关。本文前瞻性队列研究结果表明，抗－ＨＢｓ阳性母亲的新生儿畸形发生率（３．１６％）显著高于抗－ＨＢｓ阴性母亲（１．３５％），Ｐ＝０．０１４１，再次证实抗－ＨＢｓ可能有致畸作用。随乙肝疫苗广泛接种，育龄妇女抗－ＨＢｓ阳性率越来越高，因此进一步探讨抗－ＨＢｓ致畸作用十分重要。