芳香硫酸酯酶定点饱和突变方案的比较

目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。     

道路中线坐标测设计算方法分析

本文着重就坐标法测设道路中心线的计算方法进行分析，优化PC—E500计算机配合全站仪在道路中线测设中的计算方法及计算程序。     

差分GPS在港口疏浚工程中的应用

差分GPS(DGPS)在港口疏浚工程中的应用,满足了疏浚施工动态定位、自动化、高精度和高质量的要求,为施工提供精确的坐标数据,从而降低施工中人力、物力的消耗,增加工程建设的经济效益.     

WGS—84转换为国家实用坐标的研究

对于小区域的工程测量的ＧＰＳ坐标转换，若仍沿用传统的几何法（公共点法），势必增加额外的联测工作量，这将降低ＧＰＳ的使用效益，据此，本文提出一种不需联测公共点可将ＷＧＳ－８４转换至实用国家坐标的物理法，并经工程验证，可以满足隧道和其他工程测量的精度要求。     

北京54坐标系中的坐标计算

在施工中，施工放样的准确性对整个工程质量起着关键性作用，施工图纸中，并不一定给出每点的坐标，还需要经过施工人员计算才能得出，介绍北京54坐标系的公式推导及计算实例。     

无定向线形锁和导线从标求解的简便方法

本文介绍了无定向线形锁和导线坐标求解的一种简便方法。     

高等级公路曲线路面边桩测设新法

导出带缓和曲线主点、曲线外任意点及曲线路面边桩的坐标计算公式,介绍在直缓点,缓直点或曲线外任意点设站,应用角度交会、角度与距离交会或极坐标法一次定出全部边桩的方法。进行了精度分析,给出了算例。     

LJG极柱坐标测量机

文章主要对LJG极柱坐标测量机的原理结构及技术性能等做了较为详细的介绍，该测量机主要具有可对大型回转及螺旋曲面体部件进行形位公差检测，反求设计和轮廓度分析评估等功能。     

测定球面多点坐标计算球面参数的方法

无协作目标电子全站仪无需安置棱镜和反射片作为反射目标而能测定待定点的空间位置。采用无协作目标电子全站仪这一特性,可以方便地测定球面上多于4个点的三维坐标。以球心坐标和半径为未知数列出误差方程式,平差计算球心坐标和半径,并评定球心点位精度,实例证明该方法是可行和可靠的。