用HPV L_1区共有引物及PCR技术检查人尖锐湿疣和子宫颈癌中的HPV

根据HPV6、11、16、18、31、33型L1ORF高度保守区的基因序列设计合成了一对HPVL1区共有引物。该引物除与上述六型有很高的同源性外还可覆盖其它已知的20多型与女性肛生殖区感染有关的HPV。用该引物及PCR技术对一组计144例活检标本进行检测，结果显示：病理确诊的尖锐湿疣、子宫颈癌及外阴癌组织、正常宫颈标本中HPVDNA序列检出率分别为100％（55／55）、70％（28／40）和13．3％（2／15）。另外，34例临床诊断而未被病理证实的尖锐湿疣HPV－DNA亦呈阳性，说明在对这类病变进行病理诊断时有必要进行病原学检测。     

REAL-TIME DETECTION OF SURVIVIN mRNA EXPRESSION IN CERVICAL CANCER CELL LINES USING MOLECULAR BEACON IMAGING

Objective To detect the expression of survivin mRNA in cervical cancer cell lines using molecular beacon imaging technology. Methods Human cervical cancer cells （HeLa and SiHa） and human fetal lung fibroblast HFL-I were cultured in vitro. After adding 100 nmol/L survivin mRNA molecular beacon, the fluorescent signals were observed under fluorescent microscope. The expressions of survivin in cervical cancer cells and HFL-I cell were examined by immunocytochemical streptravidin-biothin peroxidase （SP） assay at the same time. Results Two kinds of survivin mRNA molecular beacon, with different color fluorescence, had strong fluorescent signal in cervical cancer cell lines, and the signal in SiHa cell line was stronger, but these signals were not found in HFL-I ; Immunocytochemical staining of positive survivin was located in the cytoplasm of cervical cancer cell lines HeLa and SiHa, whereas, no expression of survivin was detected in HFL-I cell line. Conclusion The technology of molecular beacon imaging can be used to detect the expression of survivin mRNA in viable cells successfully, and may provide a new approach to the diagnosis of early stage cervical cancer and the following-up in the clinic.     

应用PCR方法检测人乳头瘤病毒的E_7转化基因

应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测５４份子宫颈癌活检标本中人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ－１６）Ｅ７转化基因的存在情况，结果显示阳性率为７２．２％（３９／５４）。ＨＰＶ－１６Ｅ７转化基因在人子宫颈癌组织中的高检出率，证实该转化基因与其发生关系密切。本研究同时证明，ＰＣＲ方法具有敏感、特异、快速和实用特点，值得推广。     

P21~(waf1/cip1)和P53在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

目的　探讨P2 1waf1/cip1和P5 3基因与子宫颈癌发生发展的关系以及它们之间的相互关系。方法　采用免疫组化方法研究 15例慢性子宫颈炎和 47例子宫颈癌P2 1waf1/cip1和P5 3的表达情况。结果　P5 3蛋白在慢性子宫颈炎中阳性表达率为 0 ,子宫颈癌中阳性表达率为 38 3%,其P5 3蛋白异常表达与肿瘤发生、肿瘤细胞分化程度、临床分期有关。P2 1waf1/cip1在慢性子宫颈炎中阳性表达率为 86 7%,子宫颈癌中阳性表达率为 5 7 5 %,其阳性表达率降低与肿瘤发生、肿瘤细胞分化程度相关。结论　在子宫颈癌中P2 1waf1/cip1可通过P5 3依赖及非P5 3依赖两种途径表达。     

子宫颈癌患者HPV16 E6,E7血清抗体检测

通过基因工程技术制备HPV16 E6,E7抗原,用免疫酶联吸附法检测了44例子宫颈癌病人和20例健康献血员血清HPV16 E6,E7抗体。结果表明,健康人血清HPV16 E6和HPV16 E7抗体阳性者分别占35％(7/20)和20％(4/20)。病人血清中,HPV16 E6抗体阳性率68.18％(30/44),但其反应滴度均值与健康人无显著差异。HPV16 E7抗体阳性率为58.18％(25/44),其阳性率及反应滴度均明显高于健康人。这提示,HPV16 E6抗体可能并非HPV16的型特异性抗体,而HPV16 E7抗体则有可能成为子宫颈癌发生的预报信号。     

印记基因H19和胰岛素样生长因子Ⅱ在人子宫颈癌组织中印记缺失及意义

目的探讨人子宫颈癌组织中印记基因胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF2)和H19印记缺失情况及意义。方法采用PCR技术筛选出40例人子宫颈癌组织及20例正常子宫颈组织中具有IGF2和H19基因杂合性病例,然后RT-PCR法检测IGF2及H19印记状态。结果IGF2基因在子宫颈癌组和对照组具有杂合性比率分别为52.5%(21/40)和65%(13/20);双等位基因表达率分别为47.6%(10/21)和7.7%(1/13),差异有统计学意义(P<0.05)。H19基因在宫颈癌组和对照组具有杂合性比率分别为47.5%(19/40)和55%(11/20);双等位基因表达率26.3%(5/19)和0,差异无统计学意义(P>0.05)。结论子宫颈癌中存在印记基因IGF2和H19的杂合性丢失(LOH)和印记缺失(LOI),IGF2和H19基因异常可能与子宫颈癌的发病相关。     

HUMAN PAPILLOMAVIRUS TYPE 16 L1 PROTEIN CAN BE EXPRESSED IN LIVE ATTENUATED SHIGELLA FLEXNERI 5A STRAIN SH42

Cervicalcanceristhesecondmostcommon canceramongwomenworldwide,anditaccountfor thehighestmortalityindevelopingcountries.There areabout600000newcasesdiagnosedanditcauses aboutaquartermillionwomendeathperyear[1]. Highrisktypehumanpapillomavirusinfection (suc…     

p53 codon72基因多态性与宫颈癌发病风险的meta分析

目的利用meta分析的方法系统评价p53codon72多态性与宫颈癌发病风险的关系。方法检索1998~2004年Medline、Elsevier、Evidence-Based Medicine Reviews、Ovid、中国期刊网、维普科技期刊数据库等,语种不限。并追溯检索获得的已发表文献及我们研究组未发表的文献。纳入标准:涉及p53codon72基因型频率的独立病例对照研究,各文献研究方法相似,有综合的统计指标。剔除不符合纳入标准的,重复研究报告及数据不完整的文献。用Rev-Man4.2软件进行统计分析。结果将总研究按病理组织学类型及种族和地域进行亚组分析,亚洲人群宫颈上皮内瘤样变(CIN)亚组和欧洲人群(主要为白种人)CIN亚组分析显示与其对照组无统计学差异。亚洲人群宫颈鳞癌(SCC)亚组合并OR=1.28,95%CI=1.05~1.55。欧洲人群SCC亚组合并OR=1.45,95%CI=1.08~1.95,P<0.01,有统计学意义。结论p53codon72Arg/Arg基因型未能增加亚洲人群和欧洲人群宫颈癌前期病变发生的危险性,但与浸润性宫颈癌发病风险有正向弱相关性。     

术前放疗对子宫颈癌根治术后并发症的影响

目的　探讨术前放疗对子宫颈癌根治术后近期并发症的影响。方法　将 1 54例子宫颈癌根治术后患者分为术前放疗组及未放疗组 ,对比分析两组并发症发生情况。结果　两组患者术后并发症的发生率无显著性差异。结论　术前放疗可使子宫颈癌的手术适应症的选择扩大到Ⅱb期 ,且不增加术后并发症。