体外诱导软骨细胞形成的实验方法研究

本文用19日～21日胎龄的SD种胎鼠的后肢肌肉与同种大鼠骨基质明胶一起做体外诱导培养,培非液为含3 700 mg/L NaHCO_3的DMEM。培养10日时,8个培养物中有7个出现诱导性软骨细胞。培养15、20、25日时,30个培养物(每个时间点10个培养物)中都出现了诱导性软骨细胞。结果表明,本实验所采用的组织培养方法和含3 700 mg/L NaHCO_3的DMEM培养液完全适用于体外诱导软骨细胞形成。     

软骨细胞-骨基质明胶复合物修复兔关节软骨缺损的初步观察

目的　初步观察骨基质明胶 (bonematrixgelatin ,BMG)复合软骨细胞移植修复关节软骨缺损的可行性。方法　BMG复合软骨细胞体外培养 ,并将培养复合物植入同种异体兔膝关节软骨缺损处 ,术后行大体及组织学观察。结果　BMG复合软骨细胞体外培养后能形成软骨组织 ,此“工程软骨”植入兔膝关节软骨缺损处能继续生长发育。结论　BMG复合软骨细胞体外培养及体内移植均能形成软骨组织 ,有可能修复关节软骨缺损     

犬冠状动脉内植入肝素涂层国产支架的实验研究

目的　探讨明胶涂层支架介导肝素局部给药的可行性及疗效。方法　体外通过同位素标记的肝素测量涂层支架吸附肝素的量及峰时间 ;动物实验将家犬分两组 ,对照组植入裸支架 (n=1 2 ) ,实验组植入肝素涂层支架 (n=1 0 ) ,于 1、4周两个时间点观察血栓的发生情况。结果　明胶涂层支架吸附肝素的量随肝素浓度的增加亦增加 ,且最大吸附时间在 30 min左右 ;动物实验证明肝素涂层支架可预防冠状动脉内支架内血栓形成。结论　明胶涂层支架介导的局部肝素给药疗效好、方法简洁有效 ,值得进一步研究推广     

组织工程修复软骨基质蛋白聚糖代谢的初步探讨

目的 检测软骨修复组织中蛋白聚糖相关代谢指标,初步探讨在软骨修复过程中基质蛋白聚糖的代谢变化以及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)和蛋白聚糖酶(aggrcanases)的作用.方法 松质骨骨基质明胶(bone matrix gelatin, BMG)复合同种异体软骨细胞构建组织工程化软骨,体内植入修复兔膝关节骨软骨缺损.术后6个月取材检测蛋白聚糖合成表位3-B-3(-)、MMPs、MMPs裂解表位BC-4 以及aggrcanases裂解表位BC-13的表达情况.结果 在修复组织中,蛋白聚糖合成表位3-B-3(-)表达增加,MMPs及其裂解表位BC-4表达减低,而aggrcanases裂解表位BC-13表达阴性.结论 利用蛋白聚糖合成表位3-B-3(-)、MMPs、BC-4、BC-13的表达情况可以初步了解修复软骨组织中蛋白聚糖的代谢变化,修复软骨组织蛋白聚糖的合成大于分解,MMPs在兔关节修复软骨基质蛋白聚糖的基础代谢和重塑中具有重要作用.     

不同设计的两代国产铂铱合金支架对兔颈动脉血管反应的影响

目的　评估不同金属丝直径、不同结构设计的国产铂 铱合金支架对血管反应的影响。方法　将家兔分为三组 ,第一组置入直径 0 .1 3mm单丝缠绕成螺旋形结构的第一代支架 (n =5) ,第二组置入直径 0 .1 75mm单丝缠绕成“之”字形结构的第二代支架 (n =5) ,第三组置入第二代明胶蛋白涂层支架 (n =7)。术后 7d行病理形态分析及扫描电镜观察。结果　所有动物均成功置入支架 ,组织病理学检查显示 :一代和二代支架组各有 1例不完全性血栓形成 ;涂层支架组无血栓形成。支架置入血管无明显炎症反应和异物巨细胞聚集。涂层支架组平均新生内膜厚度与新生内膜面积最小 ,而管腔面积最大 (P均 <0 .0 5)。扫描电镜显示支架表面几乎完全内皮化。结论　支架金属丝直径与结构设计的不同对新生内膜增殖及管腔面积有影响 ;明胶蛋白涂层具有良好的组织相容性。     

脱钙松质骨体外构建组织工程软骨的实验研究

目的软骨细胞复合同种异体脱钙松质骨(demineralized cancellous bone,DCB)体外构建组织工程软骨,评价DCB作为组织工程软骨支架的可行性。方法取新西兰兔长骨干骺端松质骨制备DCB,扫描电镜观察;分离幼兔关节软骨细胞,原代培养后种植在同种异体DCB体外培养,分别于7、14、21、28、35、42d取材进行苏木素-伊红(HE)、甲苯胺蓝(TB)、Ⅰ型和Ⅱ型胶原染色。结果制备的DCB成三维立体多孔结构,孔隙大小100~500μm,有良好的可塑性和一定的力学强度;软骨细胞在DCB表面和空隙内生长、分化良好,形成软骨陷窝,分泌基质蛋白聚糖和Ⅱ型胶原。培养42d软骨细胞在DCB表面及孔隙内形成软骨样组织。结论 DCB复合同种异体软骨细胞在体外成功构建了组织工程软骨,是一种较理想的软骨组织工程支架材料。     

水中微量氯离子的微型测定

利用氯化银沉淀在明胶-乙醇水溶液中的稳定性,建立了一种新的测定有机物工艺水中微量氯离子的分光光度法.其λmax=300 nm,线性范围为0～6 mg/L,吸收曲线为C=-0.002 89+1.216 4 A,回收率为95.2%～101.3%.作者提出的水样中微量氯离子浓度测定的实验微型化具有理论上定量分析的可行性,同时也可在实际中应用.     

甘油明胶栓剂基质组方的改进研究

目的　设计耐热性较好、融变时间适宜的甘油明胶栓剂基质新组方。方法　以甘油明胶栓剂基质的融变时间与受热软化温度为考察指标 ,依次改变基质中明胶的用量、筛选加入其他辅料 (聚乙二醇、β 环糊精、尿素、甘露醇 ) ,通过正交设计试验确定甘油明胶栓剂基质新组方。结果　明胶用量能改变基质的融变时间 ,但对其耐热性无显著影响 ;添加的 5种辅料中 ,甘露醇提高基质的耐热性效果最好 ,也能缩短基质的融变时间。结论　耐热性与融变时间均适宜的甘油明胶栓剂基质新组方为明胶 2 0 g、甘油 5 0g、甘露醇 6 0 g ,控制基质含水量为 10 %。     

原状粉质黏土抗剪强度的恢复试验研究

利用静力三轴仪对长春地区原状土进行固结不排水抗剪强度试验，根据摩尔强度理论得出原状土的抗剪强度指标c和φ值。然后加入不同含量的氯化钙、明胶及氯化钙、明胶组合剂，对扰动土进行重塑，分别得出与原状土强黏聚力明胶含量，与原状土内摩擦角氯化钙含量，以及原状土黏聚力和内摩擦角两者添加剂组合含量，并分析黏聚力和内摩擦角影响因素和加入添加剂重塑土抗剪强度变化的原因。研究结果表明:含1%明胶、7%氯化钙重塑土黏聚力和内摩擦角与原状土基本拟合。     

组织工程化软骨的构建及应用

"组织工程"(tissue engineering)是上世纪80年代正式提出来的新概念。它是生物医学和材料科学多学科交叉融合的新兴分支学科。近20年来,该学科有了很大的发展,其研究范围也更加广泛。本文结合我们近年的研究成果,着重论述组织工程化软骨的构建及其在软骨损伤和修复研究中的应用。