ICR－191体外诱发人成纤维细胞恶性转化的初步研究

ＭＳＵ－１．１细胞株是由ｖ－ｍｙｃ癌基因转染正常二倍体人成纤维细胞后所建立的生命期无限的近二倍体细胞株，使该细胞暴露于实验研究用广谱诱变剂ＩＣＲ－１９１以建立体外细胞转化体系，结果表明剂量０．３５及０．４５μｍｏｌ／Ｌ的ＩＣＲ－１９１可使ＭＳＵ－１．１细胞转化成具有转化灶形成能力和成瘤性的恶性转化细胞。本文支持永生化是人类细胞培养的多步骤的恶性转化过程的前提条件的假说。为建立的致癌物诱发细胞转化体系为研究阐明人类多步致癌的分子机理提供了一个有用的模型体系。     

用体外致敏联合EB病毒转化技术构建抗肝癌的人源Fab噬菌体抗体库

目的构建抗肝癌的人源Fab噬菌体抗体库。方法体外致敏并用EB病毒(EBV)转化肝癌患者的外周血单个核细胞(PBMC)。RT-PCR扩增人抗体轻链和重链Fd段基因,将抗体基因分别与载体pComb3连接后,电转化大肠杆菌XLI-Blue,构建噬菌体呈现型Fab抗体库。结果经EBV转化的4例肝癌患者PBMC,ELISA检测均有抗肝癌抗体产生;经PCR扩增出13条轻链基因片段(κ、λ)和28条重链Fd基因片段(γ);电转化构建的噬菌体抗体库库容为1.7×107puf/mL;Fab基因的重组率约为100%。结论用体外致敏法结合噬菌体抗体库技术,成功构建了全人源抗肝癌Fab组合抗体文库。