芳香硫酸酯酶定点饱和突变方案的比较

目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。     

一种船舶吃水差的精确计算方法

此文通过分析纵倾状态下船舶吃水差传统计算方法中的误差，提出了一种适合于纵倾，特别是在较大纵倾状态下船舶吃水差的精确计算方法，该方法通常可以在具备一定船舶资料的条件下采用，也可以在船舶装载软件的设计中采用。     

二维非连续边界元分析积分计算的精确表达式

以二维弹性力学问题为研究对象,采用线性非连续元离散边界积分方程,给出了系数矩阵计算的精确表达式,对二维弹性力学问题进行了数值计算,对非连续边界元配位点对计算结果精度的影响进行了讨论,结果表明准奇异积分计算是配位点影响计算结构精度的主要因素。     

钢桁梁斜拉桥主桥精确合龙控制技术研究

以南广客运专线郁江双线特大桥为依托,对钢桁梁斜拉桥主桥精确合龙技术进行研究。在郁江桥斜拉索索力测量采用“双控”原则,以及利用有限元软件模拟郁江桥施工阶段的基础上,对合龙口的敏感性进行了准确的分析,并在其指导下确保了全桥的高精度合龙,为以后同类型桥梁的精确合龙控制提供了范例。     

阿拉斯加铁路列车防碰撞系统项目

美国阿拉斯加铁路公司(ARRC)正在实施一项计划,开展基于通信的安全精确列车控制系统(PTC),也称防碰撞系统(CAS)的设计、开发与实施。该系统可大大提高采用调度集中(CTC)和无信号控制直接调度(DTC)的阿拉斯加铁路线路上的旅客运输及货物运输的安全,同时提高运输效率。计划中提出的提高运输安全的措施包括:*制定安全强制标准;*为防止列车碰撞,强制实施故障-安全权限;*为防止因超速造成的列车脱轨,强制实施故障-安全限速;*保护线路工人在指定的工作范围内不受侵犯;*对通过误扳道岔列车实施保护。     

加强基础整治 确保IC卡揭示精确控制

列车运行监控装置(LKJ)数据是LKJ控制功能实现的基础和运行分析的依据,其准确性是监控列车安全运行的前提和保障。LKJ临时数据(IC卡数据)是LKJ数据的一部分,但现行LKJ基础数据内容及IC卡数据文件在应对运行揭示控制方面存在一定盲区或不准确性。通过对IC卡揭示控制要素深入分析,提出加强基础数据整治,确保IC卡运行揭示精确控制的解决方案。     

高质量来源于六西格玛(6Sigma)--一个新的管理理念

由Motorola和GE倡导的六西格玛质量管理理念,越来越被我国企业重视,这首先基于企业的产品质量的优劣已成为生存与发展的关键要件,而获得优良的产品质量的途径,已延伸至采用最新质量管理的方法和效果,直至使企业获得持续发展的动力与源泉。在六西格玛质量管理成为统计学派的管理理念之前,只是传统的基于检验控制的方法,而随后发展起来的质量体系保证模式和基础的统计学在质     

一类非线性四阶偏微分方程的精确解研究

研究了一类非线性四阶偏微分方程的精确解.首先将四阶偏微分方程约化成为常微分方程,进而对相应的常微分方程问题求解,而后通过参数取值的改变得到相关的精确解.最后根据不同情形下所得的精确解,利用Matlab软件绘图给出精确解的波形图分析.     

信息化战争交通重点目标防护的对策

针对信息化战争条件下战场透明化和打击精确化的特点,从建立和完善"综合集成" 的防护体系、完善伪装防护技术手段、适时做好交通保障器材的储备和更新等方面,提出了交通重点目标防护应采取的技术措施和应对精确打击的相关对策.