芳香硫酸酯酶定点饱和突变方案的比较

目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。     

900t龙门吊钩头升速控制系统技术改造

介绍了９００ｔ龙六钩头弱磁升速控制系统的技术改造，提出了一种弱磁升速的逻辑控制方法，研制了一种直流电动机弱磁速用位能性负载检测装置。     

浅论柴油机曲轴工艺应力与热处理工艺改进

通过对磁弹性应力概念的介绍，并用弹性应力测定法跟踪测定了机车用８２４０柴油机曲轴各加工工序间的轴颈表面残余应力，论述了应力变化对热处理工艺的关系，并对热处理工艺进行了改进。     

利用孔压静探确定软土地基的强度

将孔压探头贯入近似为孔穴扩张的过程，通过对探头的受力分析，得到了由孔压静探确定的饱和软粘土的不排水剪切强度值，采用此方法对广东西部沿海高速公路二标段软土地基的强度进行了估算，并与十字板试验的测试值作了对比，验证了方法的可行性。     

国外无磁性反水雷舰艇磁性防护指标评估

自第二次世界大战中德国使用了非触发磁性水雷后，紧接着英、美便在舰船上加装了舰船消磁系统与之抗衡，其后研制出了磁防护能力较高的木壳扫雷艇。随着科学技术的发展，水雷的技术与性能得到了迅猛的发展，反水雷战也得到了相应的发展，尤其是是反水雷舰艇的磁防护技术一直被一些西方国家给予特别的重视。１９５９年法国首先公开宣称研制出了无磁性的扫雷艇“水星号”，其磁性防护指标为：距艇体（下方）９．０ｍ深度测量时，其垂直     

磁集成地铁变压器漏抗三维有限元计算

地铁逆变牵引系统中平衡电抗器的存在对减少大功率逆变器体积、降低造价不利。为此,运用磁集成技术将平衡电抗器与变压器有机结合,构造出新型12脉波二重逆变牵引供电系统,实现利用集成磁件的等效电感取代平衡电感的设计思想。采用基于边单元的稳态非线性有限元法,建立地铁变压器的三维有限元模型,对各绕组间的等效电感进行分析计算。仿真结果与样机现场试验数据非常接近,验证了所提出的有限元计算方法的正确性和可行性。     

在磁赤道校正磁罗经自差纪实

磁罗经是船舶航行的重要仪器之一,在PSC的检查中,如果它存在缺陷或自差表不在有效期内,将会给予17或30的纠正措施.本文从实际出发,就自行在磁赤道附近校正自差提出了具体的方法及体会,船员可参考实施.     

磁耦合线圈互感系数M的测量

互感现象在自然界中普遍存在，互感电路是一种基本电路,自拟的磁通法、伏安法、串联法等实验方案，在测量磁耦合线圈互感系数方面各有优缺点。