芳香硫酸酯酶定点饱和突变方案的比较

目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。     

提高舰船生命力的模块化方法

本文在广义的生命力概念基础上介绍了提高舰船生命力的模块化方法，论述了舰船装备及其系统模块化对提高舰船生命力的意义．     

舰船武器装备可靠性设计探讨

概述某舰武器装备可靠性设计的一些方法。舰船武器装备可靠性设计关系到舰船及人员的安全乃至战争的胜负等一系列重大问题，因此，开展舰船武器装备可靠性设计研究具有重要的现实意义。     

一种船舶吃水差的精确计算方法

此文通过分析纵倾状态下船舶吃水差传统计算方法中的误差，提出了一种适合于纵倾，特别是在较大纵倾状态下船舶吃水差的精确计算方法，该方法通常可以在具备一定船舶资料的条件下采用，也可以在船舶装载软件的设计中采用。     

计量在我所军工产品质量保证工作中的作用

本文阐述了在军工产品质量保证工作中开展计量工作的重要性与必要性，论述了计量工作和与国际标准接轨问题的关系，报告了在我所军工产品研制工作中开展计量工作的现状和体会。     

出人意料 扣人心弦——全新反战武器集萃

2004年11月9日，美国五角大楼的武器专家沃达尔克透露：“近年来，美国集中最优秀的人才、最先进的设施与技术，研制‘全新武器’。这些武器与现在正在使用的武器差别极大，甚至完全不同。由于近年来，恐怖分子已成为人类的主要敌人，反恐已成为世界共同的战争。因此，最近五角大楼要求，这些武器不仅能用于普通战争，     

“海长矛“反潜武器运载器

本文介绍美国“海长矛”反潜战远程武器运载器的设计和研制。“海长矛”是封装式的武器系统，可发射导弹和鱼雷，也可以发射深水炸弹。当“海长矛”导弹从水下攻占型潜艇发射时，装有导弹的运载器无控地浮至水面，出水，头盖打开，导弹与运载器分离，进入水中，寻找目标。运载器是带有夹层结构的用石墨纤维湿缠绕的圆筒，分三个组成部分：圆筒，前盖和后盖。运载器可以保护导弹免受自然环境和外界感应因素的影响，它能承受在潜艇上贮存和发射时的冲击载菏。运载器前盖上装行出水传感器。后盖与圆筒的连接设计独特，生产过程简单，成本低。     

二维非连续边界元分析积分计算的精确表达式

以二维弹性力学问题为研究对象,采用线性非连续元离散边界积分方程,给出了系数矩阵计算的精确表达式,对二维弹性力学问题进行了数值计算,对非连续边界元配位点对计算结果精度的影响进行了讨论,结果表明准奇异积分计算是配位点影响计算结构精度的主要因素。