侧向流免疫层析-表面增强拉曼光谱联用技术超灵敏检测猪肉中喹乙醇残留

以具有强表面增强拉曼光谱(surface enhanced Raman scattering, SERS)活性的胶体金颗粒(Au nanoparticles, AuNPs)为基础,分别在其表面修饰4-氨基苯硫酚(PATP)和喹乙醇单克隆抗体(monoclonal antibody against olaquindox, OLA mAb),获得拉曼免疫探针OLA mAb-AuNPs-PATP.依据间接竞争原理组装侧向流免疫层析试纸,对各项实验条件进行优化,并借助拉曼光谱仪器,测定特征谱峰的拉曼信号强度计算出喹乙醇的浓度,由此建立了一种超灵敏定量检测猪肉中喹乙醇残留的侧向流免疫层析-表面增强拉曼光谱联用技术(SERS-LFA).结果表明:用该方法检测喹乙醇在0.000 1～1.0 ng/mL范围内线性良好,检出限为0.31 pg/mL,回收率为93%～108%,相对标准偏差在3%～6%之间(n=3).并且对信号的重现性进行测定,在5个不同浓度下,每个浓度随机测定10个点的相对标准偏差分别为5.6%,6.3%,3.7%,4.8%和3.1%.该方法检测猪肉中喹乙醇具有简便、快速、超灵敏性、高特异性和良好重现性的优点.     

滴金法检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A抗体试剂盒的研制及应用

目的　建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫渗滤法 (DIGFA)。方法　采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,将重组的CagA抗原固定于硝酸纤维素膜上 ,制成免疫渗滤试剂盒。血清中抗CagA抗体与试剂盒上金标记物及硝酸纤维素膜上的固相抗原结合后 ,形成肉眼可见的红色斑点。结果　用DIGFA与酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂盒对比检测了 32 6份血清标本中抗CagA抗体 ,本方法的特异性为 95 .8% ,敏感性为 97.3% ,两种方法符合率为 96 .6 %。结论　DIGFA检测血清中的抗CagA抗体特异性强、灵敏度高、简便快速 ,无需特殊仪器设备 ,有广泛应用价值     

蛋白芯片技术对8种自身抗体的检测及其评价

目的　研究蛋白芯片技术对自身抗体检测的敏感性及特异性,探讨其对自身免疫性疾病的鉴别诊断价值,并对其方法学进行评估。方法　用胶体金标法、间接免疫荧光法及蛋白芯片法检测抗 ds- DNA;用免疫印迹法、蛋白芯片法检测抗Sm 、抗u1RNP 、抗SSA、抗SSB 、抗Rib- P、抗 Jo -1及抗 Scl- 70 7 种自身抗体,对检测结果进行统计学分析。结果　抗dsDNA抗体检测,蛋白芯片法优于胶体金标法 (P<0.01);皮肌炎和多发性肌炎(DM/PM)组 Jo -1 抗体(P<0.01)、混合性结缔组织病(MCTD)组u1RNP抗体(P<0.01)、硬皮病(PSS)组 Scl- 70 抗体(P<0.05),蛋白芯片法与免疫印迹法检测结果存在显著性差异;在 DM/PM组、PSS组、MCTD组,蛋白芯片法与免疫印迹法对自身免疫性疾病的鉴别诊断有显著性差别(P<0.05)。4种方法的总体敏感性依次为蛋白芯片法、免疫印迹法、间接免疫荧光法、胶体金标法。结论　蛋白芯片法检测项目多、简便快速、敏感性好、特异性强、分析客观,值得推广使用。